Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
ПИВО ВОЛЬФГАНГ КУНЦЕ.doc
Скачиваний:
544
Добавлен:
12.07.2019
Размер:
33.77 Mб
Скачать

4.2.2. Выделение пригодных дрожжевых клеток

Для разведения чистой культуры использу­ют клетки тех штаммов дрожжей, которые хо­рошо зарекомендовали себя в опытах. Изоля­ция дрожжевых клеток осуществляется в ста­дии высоких завитков. По методу Линднера (Lindner) капли с одиночными дрожжевыми клетками изолируются под микроскопом (ка­пельная культура Линднера). Изолируют много таких отдельных культур и дают им развиваться при температуре 8-10 ˚С, то есть при тех же температурах, при которых дрож­жи бродят в бродильном отделении. Под мик­роскопом можно наблюдать различные стадии роста дрожжевых клеток и отобрать самую сильную колонию. Эта культура промокается стерильной полоской из фильтрованной бу­маги, помещается в пробирку, наполненную 5 мл стерильного сусла, размножается и пе­реливается в следующую колбу при соотно­шении объемов 1:10.

Если дрожжевая культура не использует­ся сразу, то клетки хранятся на твердой пита­тельной среде, чаще всего на сусло-агаре. Культура на косом агаре хранится под слоем парафинового масла, защищающего ее от вы-

382

сыхания, в течение 6-9 месяцев при темпера­туре 0-5 °С (дрожжевой банк).

4.2.3. Разведение чистой культуры в лаборатории

Для разведения чистой культуры в лаборато­рии используется пробирка с 5 мл сусла, в которой уже находится колония дрожжей.

Размножение (пропагация) дрожжей про­исходит далее таким способом, что содержи­мое колбы переливается на стадии высоких завитков в следующую колбу, с объемом в 10 раз большим, чем у предыдущей колбы.

Колба № 1 2 3

Объем колбы 10 мл 100 мл 1000 мл

Объем стерильного сусла 5 мл 50 мл 500 мл

Объем культуры 5 мл 55 мл

Общее количество 5 мл 55 мл 555 мл

Начиная с объема 10 л применяются ме­таллические (из хромоникелевой стали) сосу­ды, называемые колбами Карлсберга. Обыч­но используют:

  • маленькие колбы Карлсберга емкостью 8— 10 л;

  • большие колбы Карлсберга емкостью 20- 25 л.

Колба Карлсберга (рис. 4.7) герметично закрыта резьбовым соединением с уплотнени­ем (4, 5).

Большинство колб оснащены ручкой (6) для облегчения переноса колбы, фильтром для стерилизации воздуха (1) и пробоотбор­ником (2) или гибкой трубкой для наполне­ния/опорожнения колбы с шланговым за­жимом. Гибкая трубка связана с подъемной трубкой, доходящей до дна емкости. Колба стерилизуется вместе с суслом. После охлаж­дения до температуры внесения дрожжей про­исходит пересев культуры. Для этого боль­шинство колб оснащено специальным шту­цером с резиновой мембраной (3), через которую с помощью шприца впрыскивается 100-200 мл культуры.

Стерильный воздух подводится к пробоот­борнику (2) и подается по подъемной трубке в сусло снизу; это стимулирует размножение дрожжей.

Рис. 4.7. Колба Карлсберга:

1 — фильтр для стерилизации воздуха; 2 — проотборник; 3 — штуцер для пересева культуры с резиновой мембра­ной; 4, 5— уплотнение резьбового соединения; 6— руч­ка для переноса

Когда достигается желаемая концентрация клеток, через воздушный фильтр в колбу под­водится воздух под давлением, и колба опо­рожняется через подъемный трубопровод и пробоотборник.

Дальнейшее разведение дрожжей проходит на производстве, так как транспортировка большого количества сусла в лабораторию затруднена.