- •27Лепные работы при оформлении наглядных пособий Инструменты и оборудование
- •Материалы
- •Техника лепки рельефных моделей
- •Формы и их изготовление
- •Изготовление форм из гипса и отливка по ним чистовых моделей
- •Отливка чистовой модели по черновой форме из гипса
- •Техника работ с применением клеевых форм
- •Работа с папье-маше
- •Выклейка из папье-маше моделей топографического рельефа
- •Отделка изделий из папье-маше
- •Изготовление макетов
- •Лепим из пластики
- •Основные правила работы с пластикой:
- •Тема. Цитологический рисунок. Измерение объектов под микроскопом.
- •Ход работы
- •Задачи и техника биологического рисунка
- •Советы преподавателю
- •Советы начинающему рисовальщику
- •Методические и технические приемы рисования
- •Работа с рисовальным аппаратом
- •Измерение объектов под микроскопом
- •Способы подготовки к исследованию и методы изучения клетки
- •Постоянные микротомные препараты
- •Подбор объектов для исследования и подготовка их к фиксации
- •Специальная обработка объектов перед фиксацией
- •Фиксаторы, их состав и использование
- •Фиксация
- •Промывание и обезвоживание
- •Пропитывание промежуточной жидкостью и парафином
- •1. Растворители парафина и их основные свойства
- •Приготовление парафиновых блоков
- •Получение микротомных срезов
- •Последовательность работы на санном микротоме.
- •Неудачи при изготовлении срезов.
- •Наклейка парафиновых срезов на предметные стекла
- •Удаление парафина и окрашивание срезов
- •Монтирование препаратов
- •Временные препараты. Перевод их в постоянные Фиксация, хранение и мацерация объектов
- •Окрашивание препаратов
- •Приготовление красителей.
- •Ускоренный метод приготовления давленых препаратов
- •Приготовление препаратов из стеблевой меристемы
- •Приготовление препаратов из молодых листочков
- •Перевод временных препаратов в постоянные
- •1. Правила гербаризации растений
- •Простейшее оборудование для сбора гербария
- •Засушивание
- •1. Различные способы засушивания растений
- •2. Сбор растений для засушивания
- •3. Продолжительность засушивания
- •4. Закладка растений
- •5. Засушивание под прессом
- •6. Засушивание в гербарных рамках
- •7. Готовность засушенного материала
- •8. Хранение засушенного материала
- •9. Монтирование
- •10. Определение
- •Оформление этикетки:
- •11. Инсерирование гербария
Специальная обработка объектов перед фиксацией
В некоторых случаях, когда хромосом много и они длинные что затрудняет их изучение и подсчет, корни перед фиксацией обрабатывают специальными реактивами, например 8-оксихино-лином, хлоралгидратом, колхицином, парадихлорбензолом, холодом. 8-оксихинолин применяют для предварительной обработки объекта или как составную часть фиксатора. В первом случае объект помещают на 3 ч в 0,002 М. раствор 8-оксихинолина при температуре 10-14 °С и после промывки в воде фиксируют. Эту методику в основном используют для приготовления временных препаратов. Однако она была испытана и на постоянных препаратах в лаборатории цитогенетики Ботанического института имени В.Л. Комарова. Для этого 0,58 г 8-оксихинолина растворяют в 200 см3 теплой дистиллированной воды. Водный р-р реактива готовят при температуре воды около 60 °С. Оказалось, что предварительная обработка этим реактивом увеличивала толщину хромосом в 1,5 раза, не изменяя их длины. Первичные и вторичные перетяжки хромосом выступали резче. По данным. Всесоюзного НИИ растениеводства им. Н.И. Вавилова (ВНИИР), требуется обработка: лука – в течение 4 ч, ячменя – 3-4, картофеля – 2-3, вики – 5 ч при комнатной температуре.
Если для укорачивания хромосом применяют хлоралгидрат, то берут водный р-р этого реактива 0,3-1%-й концентрации. Корни погружают в него на 1 ч, затем столько же времени промывают в проточной воде. После этого их помещают во влажную камеру на 2-4 ч и фиксируют.
Нередко для остановки митозов объекты перед фиксацией обрабатывают слабым р-ром колхицина. Например, корни скерды зеленой размерам 2-3 мм за 2 ч до фиксации обрабатывают этим препаратом в концентрации 0,05%. Для пшеницы и риса берут 0,1 %-й р-р колхицина и выдерживают в нем соответственно 5 и 4 ч.
Другие зерновые культуры и картофель для приостановки митозов опускают в р-р колхицина 0,01%-й концентрации. Молодые листочки можно выдерживать в 0,2%-м р-ре колхицина в течение 1-2 ч.
Для обработки корней иногда используют насыщенный р-р парадихлорбензола. Для этого 5-10 г кристаллического препарата растворяют в 500 мл дистиллированной воды и оставляют в закрытой посуде в термостате при температуре 60 °С на 10-12 ч, Материал опускают в р-р на 2-3 ч при температуре 12-16 °С, корни гороха при комнатной температуре - на 6 ч.
Для кардиологического анализа нередко действие колхицина сочетают с последующей обработкой смесью насыщенного р-ра парадихлорбензола и 0,002 М 8-оксихинолина (1:1). При исследовании пшеницы берут насыщенный р-р монобромнафталина в воде и 0,1-0,01%-й р-р колхицина, кукурузы - 0,05%-й - колхицина и 0,5%-й - монобромнафталина. Экспозиция в обоих случаях – 4 ч (общее время).
Растворы колхицина, монобромнафталина и других веществ готовят в резиновых перчатках.
Хромосомы укорачиваются также, если перед фиксацией выдерживать чашки Петри с проросшими семенами в холодильнике при температуре 1-2°С в течение суток.
При изучении морфологии хромосом иногда объекты перед фиксацией обрабатывают одним из следующих способов:
в 2%-м растворе кумарина 2 ч при температуре 12-16°С;
в смеси кумарина и 8-оксихинолина (1:1) в течение 2 ч при 16 °С.