- •1.Критерии аналитической надежности лабораторных исследований
- •6.Устройство, основные характеристики и правила настройки микроскопа. Основные микроскопические технологии.
- •7.Приготовление цитологического мазка, правила фиксации и окраски. Теория цитологических окрасок.
- •9.Основные этапы созревания гранулоцитов и моноцитов, опишите морфологические и цитохимические признаки клеток миелопоэза. Клиническое значение цитологического исследования клеток миелопоэза.
- •20.2.5.1. Фрагмент общей схемы
- •20.2.5.2. Антигеннезависимая дифференцировка
- •20.2.5.3. Антигензависимая дифференцировка
- •II. Проплазмоцит и плазмоцит
- •III. Активированные т-лимфоциты
- •14.Хронические миелопролиферативные заболевания. Патогенез, диагностика. Современные возможности лечения.
- •16.Острый миелолейкоз. Методы цитохимического анализа миелобластов.
- •18.Современные методы клинического исследования крови. Сравнительная характеристика и клиническое значение микроскопии мазка и исследования крови в гематологическом анализаторе.
- •20.Цитологические характеристики и клиническое значение исследования бластов в крови и препарате костного мозга.
- •25.Анемия хронических заболеваний. Этиология, патогенез, диагностика.
- •31.Стадии созревания мегакариоцитов, морфологические и иммунофенотипические характеристики. Структура и функция рецепторов тромбоцитов, роль арахидоновой кислоты, простациклин, тромбоксан.
- •33.Клиническое исследование мочи. Возможности визуальной колориметрии мочи в сравнении со стандартным клиническим исследованием.
- •3. Анализ мочи по Нечипоренко Процедура анализа :
- •4.1. Активированное парциальное (частичное) тромбопластиновое время (аптв)
- •4.2. Протромбиновое время
- •4.3. Тромбиновое время
- •51 . Ионометрия. Ионоселективные электроды. Кислотность среды и ее измерение. Индикаторы.
- •53.Нарушения обмена калия. Причины, методы диагностики. Гипокалиемия.
- •Диагностика
- •63.Диагностика сахарного диабета. Значение определения гликозилированного гемоглобина.
- •Лабораторные исследования : 1.Исследование уровня глюкозы в крови натощак Нормальным считается уровень глюкозы в пределах 3,5-5,5 ммоль/л.
- •6.Исследование гликированного гемоглобина
- •7.Исследование уровня фруктозамина в крови
- •8.Исследование липидов в крови
- •9.Исследование креатинина и мочевины
- •10 .Определение белка в моче
- •11.Исследование на кетоновые тела
- •Изменения фракции α2-глобулинов.
- •Изменения фракции β-глобулинов.
- •Изменения фракции γ-глобулинов.
- •Метод – колориметрический электрофорез Показания к назначению анализа - белковые фракции:
- •Лабораторная диагностика
- •2.Функциональная геномика
- •3.Сравнительная геномика
- •1.Обнаружение биомаркеров биологических процессов
- •2.Применения в медицине
- •3.Уточнение аннотации генома
- •4.Сравнительная протеомика
- •Основные методы Масс-спектрометрия
9.Основные этапы созревания гранулоцитов и моноцитов, опишите морфологические и цитохимические признаки клеток миелопоэза. Клиническое значение цитологического исследования клеток миелопоэза.
Общие свойства клеток классов I-III*
Локализация: Данные клетки находятся, в основном, в красном костном мозгу.
Морфология. Все клетки похожи на малые лимфоциты, т.е. друг от друга морфологически не отличаются, а отличаются только по поверхностным антигенам. Причина в том, что на данных стадиях дифференцировка идёт лишь на уровне генома.
Самоподдержание.
Клетки классов I-III обладают способностью к самоподдержанию. При их делениях
часть дочерних клеток полностью идентична материнским (т.е. пополняет пул клеток того класса, к которому принадлежали родительские клетки), и лишь другая часть подвергается дифференцировке (превращается в клетки последующих классов).
Образование колоний.
Благодаря этим свойствам (самоподдержанию и дифференцировке), способны образовывать колонии, поэтому для многих из них используется обозначение КоЕ (колониеобразующие единицы).
Класс I - стволовые клетки крови.
1. Эти клетки делятся редко. Поэтому их доля (от общего числа гемопоэтических клеток) в кроветворных органах очень низкая (10-4 - 10-5).
2. При этом они являются полипотентными, могут давать начало всем форменным элементам крови.
3. На первом этапе их дифференцировки образуются полустволовые клетки двух видов:
предшественники миелопоэза;
предшественники лимфопоэза.
Класс II - полустволовые клетки
От предыдущих (полипотентных) клеток они отличаются тем, что являются частично детерминированными: возможности дальнейших превращений для каждой из них уже ограничена. От последующих же клеток они отличаются тем, что ещё сохраняют возможность дифференцироваться не по одному, а по двум или более различным направлениям.
Чувствительность к регуляторам:
Данные клетки приобретают чувствительность к регуляторам гемопоэза, которые и определяют направление дифференцировки.
Регуляторы миелопоэза
эритропоэтин (синтезируемый в почках, лёгких и печени),
лейкопоэтины,
тромбопоэтин.
Класс III - унипотентные клетки
В отличие от предыдущих клеток, каждая клетка этого класса может развиваться только по одному направлению. Поэтому, по числу разных видов форменных элементов крови имеются 8 видов унипотентных клеток - предшественники
1) эритроцитов (КоЕ-Э),
2,3,4) нейтрофильных гранулоцитов (КоЕ-Гн),
5) моноцитов (КоЕ-М),
6)тромбоцитов (КоЕ-МГЦ),
7) предшественников В-лимфоцитов (Пре-В)
8) предшественников Т-лимфоцитов (Пре-Т).
Гемопоэтические клетки класса IV
Деления и созревание 8 видов клеток класса III приводят к образованию бластов - клеток класса IV.
Свойства клеток
Здесь впервые изменяется морфология клеток (за счёт начала специфических синтезов) от клеток классов I-III бласты отличаются
большим размером,
более светлым ядром и светлой цитоплазмой,
появлением в цитоплазме первых продуктов специфических синтезов.
Несмотря на последнее обстоятельство, между собой (т.е. "по горизонтали") бластные клетки морфологическически практически неразличимы.
В отличие от предыдущих клеток, бласты не способны к самоподдержанию. Это означает, что при их делениях образуются только более дифференцированные клетки, а клетки, подобные родительским, не воспроизводятся.
Завершающие стадии миелопоэза.
Общая характеристика - множественность промежуточных форм.
Класс V гемопоэтических клеток почти в каждом из 6 направлений миелопоэза представлен не одной клеточной формой, а целым рядом последовательно переходящих друг в друга клеток. Поэтому он обозначается как класс созревающих клеток.
Морфология:
Здесь уже имеются чёткие морфологические отличия:
не только "по вертикали" - между смежными клетками каждого ряда,
но и "по горизонтали" - между клетками различных направлений дифференцировки.
Таким образом, каждая из многочисленных гемопоэтических клеток класса V может быть морфологически идентифицирована.
Результат созревания: В конечном счёте, дифференцировка клеток V приводит к образованию дифференцированных клеток, т.е. клеток класса VI, или зрелых форменных элементов крови.
Гранулоцитопоэз.
Фрагмент общей схемы
Промиелоциты* - первые клетки класса V
Промиелоциты (нейтрофильные, эозинофильные и базофильные) ещё друг от друга практически не отличаются:
нейтрофильные |
эозинофильные |
базофильные |
Все они имеют следующие признаки:
округлые ядра,
голубую (при окраске по Романовскому) цитоплазму, а в цитоплазме - азурофильную зернистость; её образуют первичные (неспецифические) гранулы. По наличию последних промиелоциты отличаются от прочих гемопоэтических клеток.
Миелоциты* - первые клетки, содержащие специфические гранулы.
На стадии миелоцитов в цитоплазме, кроме первичных, появляются и вторичные гранулы, специфические для каждого из трёх типов клеток.
В нейтрофильных миелоцитах – нейтрофильные. Мелкие, окрашиваются в лиловый (розовато-фиолетовый) цвет, содержат лизоцим, фагоцитины и др. антибактериальные вещества; |
В эозинофильных миелоцитах – эозинофильные. Крупные, желто-красные, содержат ферменты инактивации ряда веществ.
|
В базофильных миелоцитах – базофильные. Крупные, синие или темно-фиолетовые, налегают на ядро, содержат гепарин, гистамин и пр. |
Таким образом, на данной стадии клетки уже отличаются друг от друга (по типу вторичных гранул). Эти гранулы сохраняются и на последующих стадиях развития - вплоть до зрелых клеток, что позволяет различать три типа гранулоцитов.
Ядра, их последующие изменения и способность к делениям.
Дальнейшее созревание клеток проявляется, главным образом, в изменении структуры и формы ядра. В результате этих изменений ядра клеток теряют способность к делениям. Миелоциты - последние клетки гранулоцитопоэтических рядов, способные делиться.
Метамиелоциты* | |||
нейтрофильные |
эозинофильные |
базофильные | |
Палочкоядерные гранулоциты* |
обычно не различимы | ||
нейтрофильные |
эозинофильные |
базофильные | |
Сегментноядерные гранулоциты * | |||
нейтрофильные |
эозинофильные |
базофильные |
Все эти клетки имеют ряд общих свойств: не делятся, обнаруживаются в периферической крови, содержат ядро специфической формы. При этом, обнаруживаемые в крови метамиелоциты называются юными гранулоцитами.
Форма ядра закономерно меняется:
у миелоцита – овальная;
у метамиелоцитов – бобовидная или подковообразная;
у палочкоядерных клеток ядро похоже на толстую изогнутую палочку без перемычек;
у сегментоядерных клеток ядро состоит из нескольких сегментов, разделённых узкими перетяжками.
Моноцитопоэз. Фрагмент общей схемы.
Класс |
Клетки |
Характеристика клеток |
V. Созревающие клетки |
Промоноциты |
В моноцитопоэтическом ряду в классе V различают только один вид клеток - промоноцит. Ядро круглое, большое.
|
VI. Зрелые клетки |
Моноциты* |
В отличие от промоноцита, в зрелом моноците ядро - бобовидное, а в цитоплазме обнаруживается немного мелких неспецифических гранул (лизосом). |
10.Основные этапы созревания, цитологическая и иммунофенотипическая характеристика лимфоцитов. Клиническое значение иммунофенотипирования Созревание В-лимфоцитов в костном мозге.
-
Поверхностная экспрессия
Цитоплазматическая экспрессия
Ядерная экспрессия
Про-В-лимфоцит
HLA-DR, CD34,CD38
CD19,CD79a
CD22
TdT
Пре-пре-В-лимфоцит
CD20,CD24,CD10
Пре-В-лимфоцит
IgM
Незрелый В-лимфоцит
IgM
Зрелый девственный В-лимфоцит
IgM+IgD
Периферические В-лимфоциты в отличие от костномозговых содержат на мембране : CD21, CD22
Схема лимфоцитопоэза включает два этапа:
антигеннезависимое созревание лимфоцитов,
антигензависимую дифференцировку, которая следует после встречи лимфоцитов с антигенами в периферической лимфоидной ткани.