Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Технология продуктов животного происхождения (Технология сыра и продуктов из вторичного молочного сырья). Лабораторный практикум. Учебное пособие

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
07.09.2026
Размер:
1 Мб
Скачать
Посев сыра для определения БГКП (при контроле производ­ства сычужных сыров). Бактерии группы кишечных палочек в
сыре определяются посевом на агар желчный фиолетово­красный.
Каждое разведение (I, II, III, IV) должно быть засеяно по 1 см3 в отдельную чашку Петри и залито расплавленным и осту­женным до 45 °С агаром желчным фиолетово-красным. После застывания агара чашки Петри переворачивают крышками вниз и ставят в таком виде в термостат при температуре (37±1) °С на 16-24 ч, но не более 24 ч.
Учитывают розовато-фиолетовые колонии диаметром больше 0,5 мм с более светлым, по сравнению с центром, орео­лом. Число колоний, выросших на каждой чашке, пересчитывают на 1 г или 1 см3 продукта с учётом разведения.
Количество бактерий группы кишечных палочек рассчиты­вают на твердой среде по общепринятой методике.
Определение количества спор мезофильных анаэробных лактатсбраживающих (маслянокислых) бактерий. Споры мезо-
фильных анаэробных бактерий в сыре определяются на среде СДА.
Разведения исследуемого продукта (0, I, II ), предварительно подвергнутые прогреву при (75± 1) °С с выдержкой 3 0 мин, высе­вают каждое по 1 см3 отдельно в 2 пробирки со средой СДА. Перед посевом среду кипятят в водяной бане 30 мин, охлаждают до тем­пературы 45 °С. После застывания питательной среды сверху, ее поверхность заливают слоем водного агара высотой 1 5-20 мм. По­севы выдерживают в термостате при (37±1) °С в течение 3 сут.
Рост мезофильных анаэробных лактатсбраживающих бак­терий в посевах определяют по образованию разрывов столбика агара и изменению цвета питательной среды с красного до соло­менно-желтого ( рисунок).
11
Р
исунок
. Признаки роста
Образование в среде желтых пятен или точек также указывает на наличие анаэробных лактатсбраживающих бактерий.
Наиболее вероятное число спор лактатсбраживающих анаэробных бактерий рассчитывают по табл. 3. При определении споровых анаэробов учитывают число пробирок, давших положительный и отрицательный результат при посеве (0, I и II)
разведения сыра в 2 параллельные
споровых анаэробных
пробирки со средой СДА.
микроорганизмов
на среде СДА
Таблица 3
Вероятное число спор лактатсбраживающих анаэробных бактерий
Наибо-
Количество пробирок
с положительными
результатами
при посевах
1,0 см30,1 см30,01 см31,0 см31,0 см30,1 см3 0,01 см31,0 см
0 0 0 0,0 1 1 2 ­0 0 1 0,5 1 2 0 2,0 0 0 2 - 1 2 1 3,0 0 1 0 0,5 1 2 2 ­0 1 1 0,9 2 0 0 2,5 0 1 2 - 2 0 1 5,0 0 2 0 0,9 2 0 2 ­0 2 1 - 2 1 0 6,0 0 2 2 - 2 1 1 13,0 1 0 0 0,6 2 1 2 20,0 1 0 1 1,2 2 2 0 25,0 1 0 2 - 2 2 1 70,0 1 1 0 1,3 2 2 2 110,0 1 1 1 2,0 2 - - и более
лее
веро-
ятное число
спор
Количество пробирок
с положительными
результатами
при посевах
Наи-
более
веро-
ятное число
спор
3
12
Пример определения: количество пробирок, обнаружи­вающих рост микроорганизмов для 0, I, II разведений (1,00; 0,10; 0,01 см3), соответственно равно 2, 1, 0. Из табл. 3 вероятное число споровых анаэробов в 1 см3 составляет 6,0.
Результаты, в которых количество пробирок с видимыми признаками роста бактерий при посевах 1,00; 0,10; 0,01 см3 про­дукта соответственно равно 002, 012, 102, 112, 202, не могут быть использованы для расчета, т. к. в 95 % случаев они вызваны несо­вершенной техникой приготовления разведений или присутстви­ем антибактериальных веществ. В данных случаях исследование продукта следует повторить.
Определение маммококков. Эта группа бактерий вызывает пептонизацию казеина и образование горьких пептидов, поэтому в ряде случаен требуется определение маммококков.
Из подготовленного ряда десятикратных разведений высе­вают IV и V разведения на молочный агар, после чего учитывают выросшие мелкие колонии с незначительной светлой зоной.
3. Результаты микробиологических исследований необхо-
димо занести в табл. 4.
Таблица 4
Результаты исследований образцов
Объект
исследова-
ния
Молоко
Проба на
брожение
(класс)
Сычужно-
бродильная
проба (класс)
Маслянокислые
бактерии (споровые
анаэробы) в 1 г
БГКП
в 1 г
Сыр
4. Сравнить полученные результаты с требованиями Тех­нического регламента Таможенного союза «О безопасности мо­лока и молочной продукции» (ТР ТС 033/2013) (табл. 5) и сделать выводы.
13
Допустимые уровни содержания микроорганизмов в сырах и сырных продуктах
Масса продукта, г,
в которой не
Индекс, группа
продуктов
Сыры (сверх­твердые, твер­дые, полутвер­дые, мягкие, сывороточно­альбуминные) - 0,001 25 Сыры и сыр­ные продукты плавленые:
- без компо­нентов
- с компонен­тами
- копченые
КМА-
ФАнМ,
КОЕ/г, не
более
3
5·10
4
1·10
4
1·10
допускаются
БГКП (коли-
формы)
0,1
0,1
0,1
Патоген-
ные, в том
числе
сальмо-
неллы
25
25
25
S. aureus не допус- каются в 0,001 г; L. monocytogenes в 25 г не допускают-
ся
Плесени и дрожжи не более 50 КОЕ/г;
Плесени и дрожжи не более 100 КОЕ/г;
Плесени и дрожжи не более 100 КОЕ/г
Таблица 5
Примечание
Контрольные вопросы
1. В чем заключается сущность и методика проведения бродильной и сычужно-бродильной проб?
2. По каким микробиологическим критериям проводят оценку качества сыров и сырных продуктов?
3. Какова методика определения наличия БГКП в сырах и сырных продуктах?
4. В чем заключается сущность и методика определения количества спор мезофильных анаэробных лактатсбраживающих (маслянокислых) бактерий?
14
Лабораторная работа № 2.
ИЗУЧЕНИЕ ФАКТОРОВ, ВЛИЯЮЩИХ
НА СЫЧУЖНОЕ СВЕРТЫВАНИЕ МОЛОКА
Цель работы: ознакомиться с процессом свертывания мо-
лока под действием сычужного фермента; изучить влияния коли­чества сычужного фермента, температуры свертывания, содер­жания солей кальция и режимов пастеризации молока на процесс его свертывания.
Приборы, материалы и реактивы: сухой порошок сы- чужного фермента, раствор с массовой долей хлорида кальция 40 %, раствор с массовой долей хлорида кальция 4 %, молоко ко­ровье 2 дм3, колбы мерные на 100 см3 (4 шт.), стаканы стеклян­ные на 250 см3(16 шт.), цилиндр мерный на 250 см3, пипетки на 10 см3 (4 шт.), пипетки градуированные на 1 см3 (3 шт.), секундо­мер, баня водяная.
Теоретические сведения
Одно из основных свойств молока − способность сверты­ваться под действием сычужного фермента широко используется в сыроделии для выработки разнообразных сыров. Лишь при производстве некоторых видов сыров вместо сычужного исполь­зуется кислотное свертывание.
При выработке сыров для свертывания молока применяют сычужный фермент, препараты ВНИИМС и пепсины животных.
Сычужный фермент − это однородный порошок от белого до желтовато-серого цвета с кристаллами соли, имеющий специ­фический запах.
В сыроделии молокосвертывающие препараты использу­ются в виде водных растворов, которые готовят на кипяченой питьевой воде, нагретой до t = 30-32 °С путем выдержки фермен- та в течение 0-30 мин до его внесения в молоко. Количество мо­локосвертывающего фермента, необходимого для свертывания
15
подготовленного молока, устанавливают по показаниям прибора (кружки) ВНИИМС. По данным ВНИИМС (В. П. Табачников и др.), процесс сычужного свертывания условно разделяют на че­тыре стадии:
1) индукционный период, включающий ферментативную
стадию и стадию скрытой коагуляции;
2) стадия массовой коагуляции;
3) стадия структурообразования и упрочнения сгустка ;
4) стадия синерезиса.
Реограмма, отражающая процесс сычужного свертывания белков молока (рис. 1), показывает, что после внесения сычужно­го фермента (точка 0) наступает стадия индукционного периода, в течение которого вязкость молока почти не изменяется, лишь после точки К на II стадии наблюдается ее резкое повышение, так как происходит массовая агрегация частиц. В точке Г (гель­точка) все агрегаты цепочки частиц объединяются в пространст­венную структуру сгустка и в течение III стадии вязкость остает­ся постоянной - заканчивается образование и уплотнение струк­туры, после чего начинается ее разрушение с падением вязкости на IV стадии (стадии синерезиса после точки С).
Вязкость
Продолжительность сычужного свертывания
Рис. 1. Реограмма процесса сычужного свертывания молока
Готовность сычужного сгустка определяют следующим об­разом. Острым ребром шпателя делают разрез сгустка, затем пло-
16
ской стороной шпателя вдоль разреза приподнимают сгусток и по расколу судят о его свойствах (прочности) и готовности. Если сгусток дает раскол с нерасплывающимися острыми краями без образования хлопьев белка и с хорошо выделяющейся сыворот­кой светло-зеленого цвета, то он готов к разрезке. Неровный из­лом сгустка с мелкими кусочками белка и мутно-беловатый цвет сыворотки указывают на слабую прочность сгустка.
Прочность сгустка повышается с ростом температуры свер­тывания молока, кислотности молока, увеличением содержания растворимых солей кальция, увеличением количества молокос­вертывающего фермента, нормальном физико-химическом соста­ве молока, а снижается при уменьшении температуры свертыва­ния молока, понижении кислотности молока, растворимых солей кальция, количества фермента в сычужно-вялом молоке.
Свертывание молока сычужным ферментом происходит при слабокислой реакции молока (рН 5,9-6,0) и достаточном со­держании растворимых солей кальция. Медленное или быстрое свертывание молока сычужным ферментом, образование «вяло­го» или «плотного» сгустка определяет формирование качествен­ных показателей сыра. От свойств сычужного сгустка зависит скорость выделения сыворотки зерна при обработке его в ванне и содержание в нем влаги, которая, в свою очередь, влияет на ход ферментативных процессов образования сыра, структуру и физи­ческие свойства сырного теста и, тем самым, на качество сыра.
Химизм действия сычужного фермента на казеин молока изучен во многих работах. Согласно последним данным разли­чают три стадии действия сычужного фермента на молоко:
1 − энзиматическая или ферментативная;
2− коагуляция казеина (образование сгустка);
3 − протеолитическое расщепление фракций казеина.
Первые две стадии протекают в начальный период выра­ботки сыра, третья − на заключительном этапе при его созрева­нии. Наиболее изучена в настоящее время первая стадия сычуж­ной коагуляции казеина, при которой происходит ферментатив­ный разрыв полипептидной цепи κ-фракции казеина. Сычужный фермент действует избирательно на пептидную связь между
17
105-м и 106-м аминокислотным остатком фенилаланина и метио-
C
нина. При этом происходит отщепление гликомакропептида и нарушение «защитных» свойств κ-казеина (рис. 2).
После разрыва этой связи происходит коагуляция as- и β- фракций казеина под влиянием ионов кальция. Электрический заряд частиц казеина, являющийся фактором его агрегативной устойчивости, снижается, и между частицами увеличивается дей­ствие сил гидрофобного взаимодействия (силы Ван-дер-Ваальса­Лондона), которые в конечном итоге ведут к образованию сгуст­ка. На стадии ферментативного гидролиза происходит дальней­шее расщепление молекул as- и β-казеина на фрагменты с мень- шей молекулярной массой (полипептиды и аминокислоты).
На процесс свертывания молока сычужным ферментом оказывают влияние следующие факторы: масса сычужного фер­мента, температура свертывания, содержание растворимого каль­ция, рН молока, содержание белковых веществ, режим пастери­зации молока, примесь молозива и др.
Масса сычужного фермента. Известно, что время коагуля- ции tc обратно пропорционально массе используемого фермента. Согласно правилу Сторка и Сегелке эта зависимость выражается уравнением:
K
tt +=
,
0c
где t0 − время между моментом прекращения ферментативной реакции и моментом свертывания;
К − константа; С − масса фермента.
Температура. Продолжительность свертывания молока за-
висит от температуры. Ниже 10 °С свертывание молока не проис­ходит, в диапазоне температур от 10 до 20 °С и даже 40-42 °С скорость свертывания постепенно возрастает. Затем она снижает­ся, и при температуре выше 65 °С свертывание прекращается, фермент теряет свертывающую активность.
18
19
Рис. 2. Механизм сычужной коагуляции казеина
19
Кислотность. Влияние кислотности на свертывание моло­ка довольно существенно. При повышении кислотности продол­жительность свертывания сокращается, что можно объяснить его воздействием на активность фермента (оптимум рН для воздей­ствия находится в интервале рН 5-6).
Массовая доля казеина в молоке. От содержания казеина зависят скорости сычужного свертывания и обсушки зерна, поте­ри белков и жира с сывороткой, качество и выход сыра. Показа­тели сычужно-вялого молока, из которого не выработать качест­венный сыр, − это низкое содержание казеина, ионов кальция (менее 8 мг в 100 см3 при нормальном содержании 11 мг в 100 см3) и Р (содержание Са и Р коррелирует с содержанием казеина). При наличии в молоке более 2,5 % казеина существует линейная зави­симость между этим показателем и плотностью сгустка. Сниже­ние массовой доли казеина до 0,7 % приводит к полной потере способности молока свертываться под действием сычужного фермента.
Содержание казеина в молоке нормального состава тесно коррелирует с содержанием общего белка, которое чаще всего и принимается за показатель сыропригодности молока. В нормаль­ном молоке массовая доля казеина составляет 78-85 % от содер­жания белка. Считается, что высококачественный сычужный сыр можно выработать из молока с массовой долей белка не менее 3,2 %, что соответствует примерно массовой доле 2,5 % казеина.
Порядок выполнения работы
Влияние массовой доли раствора сычужного фермента на процесс свертывания молока. 1. Приготовить растворы с массовой
долей сычужного фермента 0,25; 1,00; 2,00; 3,00 %. Для этого необ­ходимо отвесить на технических весах соответствующее количест­во сухого порошка и растворить его в осветленной (70-90 °Т) пас­теризованной сыворотке при 30-40 °С, доведя до 100 см3.
2. Определить продолжительность свертывания молока по-
лученными растворами сычужного фермента.
20
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]