2. Вызывание суперовуляции у коров-доноров

Трансплантация зародышей может быть эффективной в том случае, когда за один прием от донора будет получено несколько половых клеток. А это возможно только в результате искусственного вызывания суперовуляции.

Вызвать суперовуляцию можно путем применения гонадотропина СЖК или очищенного ФСГ. Эти гормоны применяют в отдельности или в комплексе с гонадотропин-рилизинг-гормоном, простагландином, эстрогенами, хорионическим гонадотропином.

Существуют два основных способа вызова суперовуляции с помощью ГСЖК (фоллигон, интергонан, маротропин и др. препараты).

Таблица 1 – Ирландский способ

9

Гонадотропин СЖК оказывает более продолжительное действие, чем эндогенный или экзогенный ФСГ, что может быть причиной высокой изменчивости в числе и качестве овуляций, низкого выхода качественных эмбрионов. Для предотвращения нежелательных явлений вводят дополнительно антисыворотку на СЖК. Эстрогены вводятся для повышения оплодотворяемости, а хорионический гонадотропин и простагландины – для ускорения овуляции.

Главное достоинство применения ГСЖК для вызова суперовуляции – однократное введение животному всей дозы препарата.

Однако более стабильные результаты получают при использовании очищенного ФСГ, получаемого из гипофиза. Общая доза на обработку препарата ФСГ-П (США) – от 32 до 50 мг. Инъецируют гормон два раза в день с промежутком 12 ч.

10

Простагландин целесообразнее вводить на 4-й день после начала обработки. Используют и другие схемы гормональной обработки коров-доноров эмбриона (в течение 5 дней по 10 мг ФСГ-П, простагландин на 3–4-й день, начало обработки на 8-й день полового цикла; в течение 4 дней: 15 мг, 12 мг, 10 мг и 5 мг ФСГ-П, простагландин на 3-й день и т.д.). Дозу гормона регулируют в зависимости от серии препарата, срока его хранения, индивидуальной чувствительности животных и других факторов. Препараты фоллитропин (Литва), ФСГ (Беларусь), «ФСГ-СУПЕР» (Россия), фолликотропин (Чехия) и др. применяют в дозах, рекомендуемых наставлениями по применению этих препаратов.

У обработанных животных число овуляций варьирует от 0 до 50, чаще – 10–15. Это зависит от дозы и качества гормональных препаратов, индивидуальных особенностей животных и ряда других факторов. Увеличение дозы ГСЖК увеличивает число зрелых фолликулов, но процент овуляций может снизиться. Большие дозы препарата нередко вызывают образование кист яичников, геморрагических фолликулов или их лютеинизацию. Некоторые животные совершенно не реагируют на введение гонадотропных гормонов; таких коров может быть до 40 %. Существует и ряд других проблем. Так, большое число созревающих фолликулов приводит к продлению процесса овуляции на несколько суток, а это отрицательно отражается на оплодотворяемости яйцеклеток и приживляемости их после пересадки реципиентам. При множественных овуляциях оплодотворяемость снижается, часть оплодотворенных яйцеклеток теряется вследствие увеличения яичника и неспособности воронки яйцепровода воспринять их. На результаты обработки оказывают влияние порода, возраст животных, сезон года (в зимние месяцы число овуляций снижается), лактация и др.

В качестве коров – доноров эмбрионов отбирают ценных в генетическом отношении животных, хорошо реагирующих на введение гонадотропинов и дающих биологически полноценные зародыши. Молочная продуктивность донора за ряд лет должна быть выше стандарта данной породы в среднем на 50–60 %, содержание жира в молоке – на 20 % и более. Используют обычно коров, имеющих не менее двух-трех лактаций, в возрасте не более 8–9 лет. После родов гормональную обработку не следует начинать ранее, чем

11

через 2–3 мес. До обработки животное должно проявить минимум два нормальных естественных половых цикла, иметь положительный баланс энергии, хорошее состояние половых органов и нормальный воспроизводительный статус в предыдущий репродуктивный период. Учитывают при отборе доноров эмбрионов и такие селекционные признаки, как породность, экстерьер, конституция, морфофункциональные свойства вымени, жизнеспособность приплода.

После отбора доноров и при необходимости вызвать суперовуляцию у нескольких животных одновременно им вводят дважды с промежутком 11 дней простагландин (клопростенол). Можно подкожно имплантировать синхромат (норгестамет). Через 9 дней имплантант удаляют и внутримышечно инъецируют простагландин (прозолвин, 3 мл). Через двое суток наблюдается половая охота.

Учитывая возможные нарушения половых циклов у коров-до- норов эмбрионов, а также для повышения возможного выхода пригодных зародышей на одного донора и синхронизации половых циклов животных нами была апробирована схема подготовки животных, включающая применение помимо протагландинов F2α масляного раствора прогестерона и гомеопатического препарата Овариовит.

Масляный 2,5 %-й раствор гормона желтого тела прогестерона способствовал синхронизации половых циклов у коров-доноров эмбрионов, а также наличию оптимального количества прогестерона в период половой охоты и формированию у животных полноценно функционирующего желтого тела на 10-й день полового цикла. Данное обстоятельство повышало количество пригодных для обработки коров и результативность самой обработки.

Овариовит – раствор для инъекций ТУ 9337-007-73027337-05.

Состав: Сalcium carbonicum D6, Damiana D4, Aquilegia D4, Pulsatilla D8,Aurum jodatum D6, Sepia D10,Aristolochia D4.

Damiana D4, Aquilegia D4, Aristolochia D4, Sepia D10, Pulsatilla D4 – в гомеопатии считаются основными при гормональной дисфункции, бесплодии, нарушении полового цикла (ациклия, инфантильность половых органов), в том числе обусловленных недостаточностью передней доли гипофиза.

Aurum jodatum D6 – рекомендуется при хроническом эндометрите, субинволюции матки, снижении тонуса, выпадении матки, кистозном перерождении яичников.

12

Сalcium carbonicum D6 – основное средство при нарушении кальциевого обмена. Так же применяется при хронических заболеваниях слизистых оболочек и пролиферативных процессах на них.

Применение препаратов осуществлялось вне зависимости от дня полового цикла коров по следующей схеме, отраженной в таблице 3.

Таблица 3 – Схема подготовки коров-доноров к суперовуляции

Суперовуляция у животных была проведена по схеме, приведенной в таблице 4.

Таблица 4 – Схема проведения суперовуляции у коров-доноров эмбрионов

13