Рис. 1. Плод крупного рогатого скота в возрасте 45дней

7.2. Применение «достима» для повышения выхода пригодных для пересадки эмбрионов крупного рогатого скота

В настоящее время, по данным многих исследований, при применении ФСГ-супер выход пригодных для пересадки эмбрионов составляет 4,5 эмбриона, что составляет в среднем 45 % от полученного числа эмбрионов. Возникает необходимость повысить процент выхода эмбрионов хорошего качества, не меняя препарата для стимуляции полиовуляции. От количества пригодных к пересадке эмбрионов, получаемых от высокопродуктивных коров-доноров, напрямую зависит выход телят-трансплантантов.

Современные биохимические, иммунологические методы исследований позволяют накапливать объективные данные и глубже понять процессы, способствующие в организме самок обеспечивать половую цикличность и оплодотворяемость.

59

Дальнейшеерешениепроблемыповышениявыходаэмбрионов, которое определяется запросами животноводства, связано с всесторонним изучением динамики клеточных и гуморальных факторов, характеризующих защитные силы организма и внедрением современных методов стимуляции цикличности и оплодотворяемости коров в скотоводстве. Одним из таких методов стимуляции половой цикличности у коров является применение иммуномодулирующих препаратов, к группе которых относится «достим».

Целью исследований на данном этапе работы явилось определение эффективности применения «достима» в сочетании с гонадотропным препаратом «ФСГ-супер» и простагландином Ф2-альфа (эстрофан) для повышения выхода пригодных для пересадки эмбрионов от коров-доноров.

Для решения поставленных задач нами были проведены исследования на базе госплемзавода «Россия» Сосновского района Челябинской области. При постановке опытов было сформировано по принципу аналогов 3 группы коров-доноров.

С целью стимуляции суперовуляции у животных первой опытной группы (n = 5) нами проведена обработка по следующей схеме:

В 0-й день полового цикла (признаки охоты) вводили внутримышечно однократно в дозе 15 мл «достим», представляющий собой 0,5 %-ю суспензию очищенного полисахаридного комплекса, иммобилизированного в геле.

На 10-й день полового цикла ректально диагностировали наличие желтого тела полового цикла. При его наличии начинали обработку ФСГ-супер в сочетании с эстрофаном по следующей схеме

(табл. 9).

На 14-й день (0-й день цикла) пришедших в охоту осеменяли вечером двукратной дозой спермы.

На 15-й день (1-й день цикла) утром и вечером осеменяли так же двукратной дозой спермы.

На 21-й день (7-й день цикла) осуществляли извлечение эмбрионов нехирургическим методом с помощью двухканального катетера.

Животных второй опытной группы (n = 5) обрабатывали по той же схеме, только «достим» вводили 2-кратно в дозе 15 мл через день, т.е. на 0-й и 2-й дни полового цикла.

У животных третьей – контрольной группы (n = 5) использовали общепринятую схему без применения «достима».

60

Таблица 9 – Схема стимуляции суперовуляции ФСГ-супер

Примечание: 1 флакон ФСГ-супер = 50 ЕД, растворяли в 5 мл растворителя.

Всех животных перед применением препаратов подвергали обследованию половых органов на гинекологические отклонения.

Для изучения иммуномодулирующих свойств «достима» проводили иммунобиохимические исследования коров в каждой группе (n = 5) до введения и на 14-й день после введения препарата. Эмбрионы оценивали морфологическим методом по 5-балльной шкале. При этом особое внимание обращали на объем, форму, целостность, состояние прозрачной оболочки и цитоплазмы эмбрионов, критерий уровня дробления бластомеров, степень фрагментации. Биологически полноценными, пригодными для пересадки считались эмбрионы шарообразной формы, с гомогенной неповрежденной цитоплазмой, одинакового размера.

Исследования содержания белков и белковых фракций в сыворотке крови коров второй опытной группы показали повышение концентрации общего белка до 87,3 %±3,42 г/л на 14-е сутки против 69,8±3,20 г/л при Р < 0,05 у коров контрольной группы. Перед началом опыта отмечены снижения содержания альбуми-

нов до 44,6±1,26 % против 47,2±0,74 % при Р < 0,05 и увеличение

α-глобулинов до 26,45±0,82 % против 25,7±0,76 %. У коров первой опытной групп динамика этих показателей имела недостоверный характер. Иммунотропные свойства препарата характеризовались увеличением общего количества лейкоцитов, лимфоцитов и моноцитов и, как результат системных сдвигов в состоянии лейкоцитов,

61

повышалась иммунологическая реактивность организма. Анализ количественного состава отдельных популяций лимфоцитов свидетельствует о том, что увеличение общего содержания лимфоцитов периферической крови во второй опытной группе животных по сравнению с фоном и контрольной группой животных происходит за счет Т- и В-популяций лимфоцитов к 14-му дню на 13,2 и 16,3 % (при Р < 0,01) соответственно.

Содержание молодых незрелых форм лейкоцитов, какими являются 0-лимфоциты, на 14-й день у коров контрольной и первой опытной групп было стабильным и практически не изменялось по сравнению с исходным показателем, в то время как во второй опытной группе наметилась тенденция снижения 0-популяций лимфоцитов в течение опыта.

Со стороны гуморального звена иммунной системы также отмечены определенные сдвиги, свидетельствующие об иммуностимулирующем эффекте препарата. При этом у коров второй опытной группы отмечено повышение таких показателей, как лизоцим и комплемент, которые превышали исходные показатели на 26,2 и 12 % (при Р < 0,01) соответственно. Повышение уровня лизоцима и комплемента отразилось и на общей бактерицидной активности сыворотки крови, показатель которой превышал показатели животных контрольной и первой опытной группы, но эти изменения носили недостоверный характер.

Критерием оценки результатов проведенных исследований можно считать количество полученных эмбрионов, пригодных для пересадки (рис. 2).

Вследствие применения предложенных схем стимуляции полиовуляции у коров черно-пестрой породы в первой опытной группе животных средний выход эмбрионов составил 8,2±0,58 эмбриона на донора, а пригодных к пересадке 4,2±0,58 эмбриона (при

Р< 0,001). Во второй группе средний выход эмбрионов составил 11,8±0,73 эмбриона на донора, пригодных 7,2±0,58 эмбриона (при

Р< 0,001).

Вконтрольной группе животных этот показатель составил 7,4±0,92 и 2,8±0,37 соответственно (при Р < 0,01). В процентном отношении выход эмбрионов хорошего качества составил в первой

62

группе 50 %, во второй группе 61 % и контрольной 37,9 %, т.е. с применением «достима» выход эмбрионов во второй опытной группе был на 23,1 % больше, чем в контрольной (рис. 3).

63

Такимобразом,применение«достима»укоров-доноровпопред- ложенной схеме свидетельствует о стимуляции иммуно-биохимиче- ских процессов в организме животных, что является важным звеном повышениявыходапригодныхдляпересадкиэмбрионовкрупногорогатого скота и активации их воспроизводительных функций.

7.3.Стимуляция половой охоты

иповышение оплодотворяемости коров

сиспользованием лютеолитических, овуляторных

ивитаминных препаратов

На первом этапе работы были проведены исследования по использованию лютеолитических, лютеотропных и овуляторных препаратов в сочетании с витамином Е-селен с целью восстановления циклической и овуляторной деятельности яичников с последующим осеменением коров герефордской породы.

Врезультате проведенной комплексной оценки маточного стада коров в количестве 498 голов было выявлено 429 стельных коров при эффективности искусственного осеменения 86 % (табл. 10). При этом из 166 телок случного возраста было выявлено стельных 127 голов, а сомнительных и выбракованных – 39 голов. Эффективность осеменения составила 76,5 %.

Воснове идеи становления половой функции у коров нами предполагалась стимуляция фолликулогенеза эстрофаном в определенные сроки и уплотнение овуляции для достижения возможности осеменения животных в максимально сжатые сроки овуляторным препаратом.

Опыт отечественных и зарубежных авторов указывает на разнообразие использования эстрофана во временном аспекте. Начиная

с48 часов после инъекции ПГ ф2α до 96 часов происходит «растянутая» овуляция у животных, что вызывает ошибку в осеменении. Предполагаемая инструкцией схема осеменения после двукратного использования эстрофана (через 48–72 часа) не отвечает современным требованиям оптимального времени осеменения, что приводит к повышенному перерасходу спермы и ошибкам ее введения относительно индуцированной овуляции.

64

Таблица 10 – Результаты бонитировки основного стада и молодняка крупного рогатого скота герефордской породы

В связи с этим нами была апробирована схема использования лютеолитического, лютеотропного и овуляторного действия препаратов в сочетании с витамином Е-селен у анэстральных коров (табл. 11), что позволило восстановить циклическую и стимулировать овуляторную деятельность яичников, а также осеменить коров в фиксированное время, однократно.

65

Таблица 11 – Схема использования препаратов лютеолитического, лютеотропного и овуляторного действия в сочетании с витамином Е-селен

Эстрофан – синтетический аналог простагландина, обладающий специфическим лютеолитическим действием, с целью синхронизации течки и охоты у коров первый раз вводили в дозе 2 мл внутримышечно в сочетании с внутримышечной инъекцией витамина Е-селен в дозе 10 мл. На 14-й день повторяли ведение эстрофана

ичерез 56 часов внутримышечно инъецировали сурфагон в дозе 10 мл с целью стимуляции выделения гонадотропинов гипофиза

ииндукции овуляции у коров, после чего проводили однократное искусственное осеменение коров ректо-цервикальным способом.

Учитывая механизм действия испытуемых препаратов, постановке опытов предшествовало гинекологическое исследование 152коров,неосемененныхвсроки,принятые вмясномскотоводстве (март – апрель – май).

На момент гинекологического исследования этих 152 «проблемных» коров были получены следующие результаты: стельные – 39 голов (25,7 %), сомнительные на стельность – 25 голов (16,4 %), нестельные – 88 голов (57,9 %) (рис. 4), в том числе с гипофункцией яичников – 79 голов (52,0 %), с фолликулярной кистой яичника – 7 голов (4,6 %), с продуктивным эндометритом – 1 голова (0,7 %), нормально циклирующие – 1 голова (0,7 %) (рис. 4, 5).

Характеризуя наличие эструса у обработанных коров по раскрытию цервикального канала при осеменении, следует отметить, что 16 коров (18,6 %) не отреагировали адекватно на введение гормонов. Из 7 коров с фолликулярной кистой яичника у 3 коров (42,9 %) после лечения и стимуляции половая функция была восстановлена. Все 79 коров с гипофункцией яичников были осеменены при нормальном раскрытии шейки матки, т.е. циклическая активность яичника у них нормализовалась.

66

Рис. 4. Результаты гинекологического исследования коров

52

Рис. 5. Патология бесплодных коров

Критерием оценки результатов нашего вмешательства можно считать установленную ректальным исследованием беременность. При этом стельность установлена у 46 коров, что составило 52,3 % от общего количества обработанных животных.

Если учесть, что из опыта выбыли 4 (4,5 %) коровы, то расчет стельности необходимо проводить из 84 коров, принимая их за 100 %. По причине абортов недополучено 2 теленка (2,3 %), фолликулярные кисты, атрофия и склероз яичников были обнаружены соответственно у 3 (3,4 %), 4 (4,5 %) и 3 (3,4 %) коров.

67