Лабораторная работа № 4 Санитарно-бактериологическое иСследование воды

Согласно СанПиН 2.1.4.1074–01, внутрилабораторный (внутренний) контроль является обязательным звеном в обеспечении качества исследований воды.

Вода является благоприятной средой для развития различных микроорганизмов, в том числе и возбудителей многих инфекционных заболеваний. В связи с этим санитарно-микробиологический анализ водоемов и питьевой воды является обязательным и важнейшим этапом системы контроля качества воды.

Микрофлору воды по ее происхождению можно разделить на две группы:

– автохтонная, или водная группа – микроорганизмы, живущие и размножающиеся в воде. Состав этой группы определяется физическими свойствами воды;

– аллохтонная группа – микроорганизмы, поступающие извне с выделениями животных и людей, с различными бытовыми и промышленными сточными водами.

Санитарно-бактериологическое исследование воды заключается в следующем:

1) определяют микробное число (общее количество микроорганизмов в 1 мл воды);

2) вычисляют количество общих и термотолерантных колиформных бактерий.

Приборы, посуда, реактивы: пипетки градуированные, цилиндры мерные емкостью 100–250 мл, чашки Петри, пробирки химические и бактериологические, колбы, пинцеты, вата, марля, бумага, спички.

Отбор проб. Воду для санитарно-бактериологического исследования отбирают в стерильные емкости. Пробы воды из открытых водоемов рекомендуется брать на глубине 10–15 см от поверхности воды и на таком же расстоянии от дна (при малой глубине водоема).

Из кранов водопроводных сооружений отбор проб воды производят после предварительного обжигания кранов спиртовым факелом и спуска воды в течение 10 мин при полном открытии крана.

Определение общего микробного числа воды

Общее микробное загрязнение определяется количеством микроорганизмов, содержащихся в 1 мл воды.

Исследуемую воду в зависимости от степени предполагаемого загрязнения разводят стерильной водопроводной водой в соотношении 1:10, 1:100 и т. д.

Воду водопроводную и из артезианских колодцев засевают в неразведенном виде. Из исследуемого образца неразведенной воды или из пробирок с разведениями берут по 1 мл и вносят в пустые стерильные чашки Петри. Затем в чашки Петри наливают по 15–20 мл стерильного расплавленного и остуженного до 45 С МПА. Медленно вращая чашку по поверхности стола, равномерно распределяют содержимое по дну чашки. Остывшие чашки переворачивают вверх дном и помещают в термостат на 24 ч при температуре 37 С, после чего производят подсчет выросших колоний. Число выросших колоний соответствует количеству микроорганизмов в засеянном объеме воды при данном разведении. Для получения среднего арифметического необходимо сосчитать число колоний, выросших в каждой чашке, и затем умножить на соответствующий коэффициент разведения. Полученное число и будет показателем общей обсемененности воды.

В водопроводной (или питьевой) воде, в соответствии с СанПиН 2.1.4.1074–01, микробное число не должно превышать 50 КОЕ в 1 мл.

Сведения о возможности опасного загрязнения окружающей среды дает количественный учет санитарно-показательных микроорганизмов. Это связано с тем, что непосредственное обнаружение патогенных микроорганизмов затруднено, а именно:

1) патогенные микроорганизмы обнаруживаются не постоянно, а только в период эпидемических вспышек;

2) количество патогенных микроорганизмов во внешней среде значительно уступает количеству непатогенных;

3) применение элективных сред или других методов культивирования патогенных микроорганизмов не всегда гарантирует успех их точной идентификации.

Поэтому возможное загрязнение внешней среды патогенными микроорганизмами определяют на основании косвенного показателя – обнаружения так называемых индикаторных микроорганизмов. Присутствие санитарно-показательных микробов в воде указывает на зараженность их фекальными массами.

Многолетние исследования позволили отдать предпочтение бактериям группы кишечной палочки (БГКП) как основному и наиболее надежному показателю фекального загрязнения воды. Преимущество БГКП как показателя фекального загрязнения состоит в полном соответствии основным требованиям, предъявляемым к санитарно-показательным микроорганизмам. К БГКП относятся грамотрицательные, не образующие спор палочки, ферментирующие лактозу, глюкозу, манит, мальтозу при 37–45 С и не обладающие оксидазной активностью. Таким образом, кишечная палочка – представитель нормальной микрофлоры кишечника человека – является показателем фекального загрязнения объектов внешней среды.

Качество питьевой воды, подаваемой централизованными водопроводами для питьевых и хозяйственно-бытовых целей, оценивают в соответствии с требованиями ГОСТа и СаНПиН. По существующему санитарному законодательству для питьевой воды общее число колонеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл не должно превышать 50, а колиформные и термотолерантные колиформные бактерии в 100 мл воды должны отсутствовать.