2. Порядок проведения испытаний.
Подготовка к испытаниям.
Приготовление растворов.
Бромфеноловый синий. 0,1 г бромфенолового синего растворяют в смеси 1,5 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 20 мл 96% спирта этилового, доводят объем раствора до 100 мл.
Натрия гидроксида раствор. 20 г натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл, разбавляют до концентрации 0,1 М.
Хлористоводородная кислота разведенная. Содержит 73 г/л НСl (2М). 20 г кислоты хлористоводородной доводят водой до объёма 100 мл, разбавляют до концентрации 0,1 М.
Установление критериев валидации.
Перед проведением валидации необходимо установить критерии валидации, которым должны соответствовать определяемые валидационные характеристики и показатели точности. Критерии валидации устанавливают в соответствии с рекомендациями, приведенными в разделе 2.1, принимая во внимание, что содержание натрия уксуснокислого в лекарственном препарате «Ацесоль, раствор для инфузий» составляет (1,9–2,1) мг/мл, т.е. допуск содержания составляет B= ± 5%. Диапазон применения методики составляет 80-120 % от номинального количества содержание натрия уксуснокислого в лекарственном средстве. В состав лекарственного средства входят: натрий уксуснокислый 2,0 г, натрий хлорид 5,0 г, калий хлорид 1,0 г, вода для инъекций до 1 л.
Критерии валидации, для которых в табл. 2.4 не приведены значения необходимо рассчитать и занести в таблицу.
Таблица 2.4
Критерии валидации
Параметр валидации |
Критерий приемлемости |
1 |
2 |
Специфичность |
Компоненты «плацебо» ее должны искажать результат |
Линейность |
Остаточное
стандартное отклонение
Свободный
член
Коэффициент
корреляции
|
Правильность |
Коэффициент
вариации
Среднее
значение степени извлечения
Коэффициент
Стьюдента
|
Продолжение табл. 2.4
1 |
2 |
Повторяемость |
Коэффициент вариации |
Промежуточная прецизионность
|
Коэффициент вариации Критерий Стьюдента Критерий
Фишера
|
Проведение испытаний
2.1 Количественное определение натрия уксуснокислого в лекарственном препарате «Ацесоль, раствор для инфузий».
20,0 мл лекарственного средства помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 0,2 мл бромфенолового синего раствора Р и титруют 0,1 М раствором кислоты хлористоводородной до появления зеленовато-желтого окрашивания.
Параллельно проводят контрольный опыт с 20,0 мл воды Р.
Содержание натрия уксуснокислого (Х) в 1 мл лекарственного средства, в миллиграммах, вычисляют по формуле:
.
(2.68)
где V − объем 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной, израсходованного на титрование испытуемого раствора, мл; Vk − объем 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной, израсходованного на титрование на титрование контрольного опыта, мл; k − поправочный коэффициент к молярности 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной; 13,60 − количество натрия уксуснокислого, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной, мл.
2.2 Специфичность.
Специфичность доказывается титрованием раствора «плацебо», который представляет собой раствор, содержащий все компоненты лекарственного препарата за исключением определяемого вещества. Для приготовления раствора «плацебо» отвешивают на весах 0,5000 г натрия хлорида и 0,1000 г калия хлорида, помещают в колбу объемом 100 мл и доливают водой для инъекций до метки. Титрование осуществляют в соответствии с п.2.1. Одновременно определяют количество хлористоводородной кислоты пошедшей на титрование раствора лекарственного средства по п.2.1. Результаты измерений заносят в табл. 2.5. Делают вывод о соответствии валидационной характеристики критерию приемлемости (табл. 2.4).
Таблица 2.5