Общие принципы лабораторной диагностики микозов

Диагностическому обследованию пациентов подлежат чешуйки кожи, волосы, ногти. При подозрении на глубокие и системные микозы необходима также лабораторная диагностика на грибы мокроты, мочи, фекалиев, отделяемого узлов, язв, слизистых оболочек, промывных вод, крови, биопсийного материала. Патологический материал забирается из очагов поражения у лиц, не подвергавшихся местной и системной антимикотической терапии. Если же подобное лечение проводилось, то исследование на грибы осуществляют не ранее 2-3 дней после его окончания. Участки поражения для удаления местных средств очищаются с помощью мыла, спирт-эфирной смеси. Материал предпочтительно забирать из периферической части очагов или толщи пораженного ногтя. Для взятия материала используют затупленный скальпель, эпиляционный пинцет, маникюрные кусачки, препаровальные иглы; бормашину для исследования на грибы пораженных ногтей. Частота выявления возбудителей микозов повышается путем применения метода герметизации. Для этого обследуемые очаги заклеивают черепицеобразно узким лейкопластырем на 2-3 суток. Результаты микроскопического исследования на грибы заметно повышаются при заклеивании очагов салфетками, пропитанными питательной средой и последующим трехкратным исследованием материала из участков поражения каждые 24 часа. Для исследования очагов на гладкой коже у детей применяют их заклеивание скотчем.

При подозрении на микотическое поражение различной локализации, а также "спорных" случаях диагноз "микоза" необходимо подтверждать лабораторно.

Лабораторные методы исследования на грибы

Микроскопическое выявление грибов в патологическом материале.

Данный метод является доступным, достаточно быстрым и недорогим в ежедневной практике. При правильном взятии материала и микроскопии 3-4 препаратов из разных очагов положительные результаты можно ожидать у 70-80% обследованных. Для выявления элементов гриба чаще всего применяют просветление материала (чешуйки, волосы, ногти) с помощью 20-30% раствора едкой щелочи (калия гидроксида).

Кроме того, для повышения результатов исследований применяют различные методы обогащения патологического материала.

С целью экспресс-диагностики (в течение 1-30 мин.) микозов стоп и онихомикозов используют быстро просветляющие составы (10% раствор дисульфида натрия в этаноле, в соотношении 3:1).

Применяют также микроскопию окрашенных препаратов: 1% хлоразол черный в диметилсульфоксиде; 5% раствор метиленового синего (1 часть) в дистиллированной воде (9 частей); смесь 2% голубой краски для хлопка с равными частями фенола и молочной кислоты в глицерине; 0,3% раствор конгокрасного в 5% растворе лаурилсульфата; хорошие результаты отмечаются при использовании паркеровских чернил.

Препараты можно исследовать путем их окраски флюорохромами (буферным раствором акридинового оранжевого) в течение 5 мин. и последующей микроскопии с помощью флюоресцентного микроскопа. При указанных методах микроскопии обнаруживаются споры, септированный или спорулированный мицелий; расположение нитей, спор внутри (эндотрикс) или снаружи волоса (эктотрикс).

При кандидозных поражених характерно обнаружение в препаратах дрожжевых почкующихся клеток овальной, округлой или грушевидной формой в виде кучек, гроздьев винограда, тутовых ягод. Одновременно наблюдаются немногочисленные тонкие короткие нити мицелия. В ряде случаев овальные или палочковидные споры располагаются в ряд и напоминают нити мицелия (псевдомицелий).

При плесневых микозах выявляются скопления крупных округлых или овальных, полигональных или лимоноподобных спор с двухконтурной оболочкой и бледный, извитой, плохо преломляющий свет мицелий, схожий с листьями шафрана.