8.3 Практическая часть

Дрожжи богаты нуклеопротеидами главным образом рибозного типа. Нуклеопротеид извлекается при разрушении дрожжевых клеток в условиях щелочной среды и осаждается при окислении.

Гидролиз нуклеопротеида осуществляется при кипячении с 5%-ной серной кислотой. При этом происходит расщепление до отдельных нуклеотидов, фосфорной кислоты и пентозы.

Пуриновые основания определяют по образованию осада серебряных солей, фосфорную кислоту по реакции с молибденовокислым аммонием.

Приборы и реактивы: ступки с пестиком на 100 мл; мерные цилиндры на 100 мл; центрифуга; пипетки; стеклянные палочки; штатив с пробирками; колбы конические на 100 мл с пробкой, снабженные длинной стеклянной трубкой, служащей обратным холодильником; воронки; фильтры; прессованные дрожжи; эфир; 0,4%-ный раствор едкого натра; 5%-ный раствор уксусной кислоты; 5%-ный раствор серной кислоты; 10%-ный раствор едкого натра; 1%-ный раствор сернистой меди; концентрированный аммиак; аммиачный раствор серебра (к 5%-ному раствору азотнокислого серебра добавить концентрированный раствор аммиака до растворения выпадающего осадка); раствор молибденовокислого аммония (7,5 г молибденовокислого аммония растворяют в 100мл дистиллированной воды и добавляют 100 мл 32%-ного раствора азотной кислоты).

8.3.1 Методика выполнения работы

В ступку помещают 5 г дрожжей, смачивают их 15 каплями эфира и таким же количеством воды, приливают 30 мл 0,4%-ного раствора едкого натра. Тщательно растирают содержимое ступки в течение 20 минут. Отфильтровывают содержимое ступки, затем приливают к фильтрату 15 мл уксусной кислоты. Осадок собирают при помощи центрифугирования и переносят его в колбу для гидролиза. Добавляют туда же 15 мл серной кислоты. Закрывают колбу пробкой с обратным холодильником осторожно кипятят содержимое колбы в течение часа. После охлаждения гидролизат отфильтровывают. Отливают в две пробирки по 2 мл гидролизата и проделывают качественные реакции на пуриновые основания и фосфорную кислоту.

В первую пробирку приливают 5 капель аммиака и 0,5 мл аммиачного раствора серебра. Образуется хлопьевидный осадок. В другую пробирку добавляют 2 мл молибденовокислого аммония и нагревают на спиртовке. Образуется осадок фосфорномолибденового аммония.

8.3.2 Оформление результатов опыта

Полученные результаты записывают в таблицу 17.

Таблица 17

Соединение, на присутствие которого проводится реакция	Употребляемые реактивы	Наблюдаемые изменения в пробирке, окраска	Принцип реакции

8.4 Контрольные вопросы

1. В чем заключается биологическая роль нуклеиновых веществ?

2. Как получить нуклеопротеиды из дрожжей?

3. Какие соединения образуются в результате гидролиза нуклеопротеида?

4. Какие качественные реакции используются для обнаружения некоторых продуктов гидролиза нуклеопротеида?

Рекомендуемая литература

[1 с.311-329];[3 с.371-392]