Построение калибровочной кривой для определения аммонийного азота по Несслеру

Для этого графика готовят серию проб с точно известными концентрациями аммонийного азота. Для этого готовят образцовый раствор хлористого аммония(NH₄CI) растворением 0,7405 г химически чистого перекристаллизованного аммония хлористого в дистиллированной безаммиачной воде и доводят объем до 1 л. 20 мл этого раствора переносят в мерную колбу на 1 л, доводят объем до метки: 1мл этого раствора содержит 0,05 мг NH₄.

В мерные колбы на 100 мл помещают 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 мл рабочего образцового раствора NH₄CI, затем во все колбы добавляют те же реактивы, что в колбы с испытуемым раствором (сегнетову соль, реактив Несслера).

Во всех приготовленных растворах проводят определение оптической плотности через 15 минут после прибавления реактива Несслера. На миллиметровой бумаге строят график, откладывая по оси абсцисс значения концентрации, а по оси ординат – соответствующие значение А.

Затем определяют по графику концентрацию аммонийного азота в испытуемых растворах. Содержание аммонийного азота в процентах рассчитывают по формуле:

N = ,

где а – количество азота по графику, мг;

b – общий объем раствора, мл (500);

н – навеска, г;

с – объем раствора, взятый для окрашивания, мл(10).

Далее проводят расчет содержания «сырого протеина» в продукте, пользуясь таблицей 12.

7.3.2 Оформление результатов опыта

Полученные результаты записывают в таблицу 16.

Таблица 16

№ образца	Навеска, г	Общий объем раствора, мл	Объем раствора для окрашивания , мл	Отсчет по ФЭКу	Количество азота по графику, мг	N, %	Сырой протеин, %

7.4 Контрольные вопросы

1. Сколько процентов от общего содержания азота приходится на долю белков в продуктах растительного и животного происхождения?

2. Какими соединениями представлены небелковые азотсодержащие вещества в пищевых продуктах?

3. В чем заключается принцип метода определения содержания общего азота в продуктах по Несслеру?

4. Как следует строить калибровочный график?

5. При каких условиях калибровочный график пригоден для определения неизвестных концентраций аммиачного азота?

Рекомендуемая литература

[1 с.283-298];[6 с.28-34]

Лабораторная работа №8 Получение нуклеопротеида из дрожжей и его гидролиз

8.1 Цель работы: изучение метода выделения и гидролиза нуклеопротеидов.

8.2 Общие сведения

Нуклеопротеиды представляют собой очень важный класс соединений сложных белков. Эти соединения являются необходимой составной частью каждого живого организма, ткани или клетки.

Биологическая роль нуклеопротеидов тесно связана с процессами роста и морфогенеза. Наиболее важной функцией нуклеопротеида является синтез белка. Быстро растущие ткани и органы, а также органы, в которых интенсивно происходят синтетические процессы, содержат особенно много нуклеопротеидов. Очень богаты нуклеопротеидами бактерии и другие микроорганизмы. Нуклеопротеиды представлены нуклеиновыми кислотами ДНК и РНК, связанными с простыми белками. ДНК является составной частью клеточных ядер животных и растительных клеток. РНК содержится в основном в цитоплазме клеток (особенно богаты ею митохондрии и микросомы).

Нуклеопротеиды растворимы в щелочной среде и осаждаются кислотами. При кипячении с разведенными кислотами нуклеопротеиды подвергаются частичному гидролитическому распаду, нуклеиновые кислоты диполимеризуются, отщепляются и гидролизуются белки, пуриновые основания, моносахарид и фосфорная кислота. Пиримидиновые основания отщепляются только при глубоком гидролизе нуклеиновых кислот.