10. Канцерогенность

В тестах используют молодых крыс и мышей, дозы начинают вводить спустя очень короткое время после того, как животные были отлучены от матери. Обычно химикат вводят через рот, но он также может вводиться через кожу или через легкие. Тестируются три уровня дозы, используют как минимум 100 животных на каждую дозу, и еще 100 животных используются для контроля. Результат оценивают с помощью анализов крови, взвешивания, фиксации патологических внешних изменений и, после умерщвления, исследования тканей и органов на предмет обнаружения раковых заболеваний. Неизбежным образом, у некоторых животных действительно развивается рак.

Основные доводы против тестирования на животных

Существуют различия в результатах, даже у разных грызунов, таких как мыши и крысы, или у разных пород одного и того же вида. Рак - это заболевание, связанное с делением клеток. Скорость деления наших клеток в 100 000 раз выше, чем у мышей, однако люди гораздо менее подвержены раковым заболеваниям. Интенсивность метаболизма изменяется в зависимости от размеров животного. У мышей скорость метаболизма в семь раз выше, чем у человека; это означает, что их организм вырабатывает больше оксидантов, повреждающих ДНК и в результате вызывающих рак³⁵. У многих животных механизмы восстановления ДНК менее сложные, чем у человека³⁶. Поэтому неудивительно, что грызуны более подвержены раковым заболеваниям, чем люди,³⁷ и это очень усложняет интерпретацию результатов. Главные метаболирующие печеночные ферменты у человека и у грызунов сильно различаются, что оказывает свое влияние на реакцию на тестируемые химикаты. Эти тесты дорогостоящи, и для их выполнения требуется до пяти лет, и, тем не менее, повторные исследования по тому же химикату могут давать иные результаты.

Глава 5 Без тестирования на животных: разработка и применение методов non-animal

В предыдущей главе были описаны испытания на животных, проведения которых требуют регламентирующие органы в целях оценки безопасности косметических ингредиентов для человека. Данная глава описывает положение дел с подходами non-animal и разъясняет, какие шаги необходимо предпринять для того, чтобы завершить их разработку и провести их в жизнь, заменив ими эксперименты на животных. Научный Комитет по потребительским товарам (SCCP)³⁸ требует предоставления определенной информации по безопасности тех косметических ингредиентов, по которым он главным образом консультирует (то есть по краскам для волос, консервантам, красителям и УВ фильтрам). Это информация о: 1) разъедании/раздражении кожных покровов. 2) сенситизации кожи³⁹ 3) абсорбции кожей 4) раздражении глаз 5) острой токсичности (если такие данные имеются) 6) токсичности повторных доз⁴⁰ 7) мутагенности/генотоксичности Если существует вероятность попадания значительного количества ингредиента в кровоток, например через кожу или через пищеварительный тракт, запрашиваются следующие данные: 8) всследования токсикокинетики и метаболизма 9) тератогенность и репродуктивная тосичность 10) Канцерогенность Плюс, поглощает ли химикат ультрафиолетовые лучи, и существует ли вероятность фото- или светотоксичности. 11) Фотораздражение, фотомутагенность и фотосенсибилизация⁴¹ SCCP рассматривает любые данные, если таковые имеются, полученные при применении вещества людьми. Другие виды веществ, используемых в косметике, также требуют проверки, подобными же методами, как установлено Директивами по опасным веществам. Важно помнить, что оценка безопасности химиката - это более сложный процесс, чем просто описание его как "токсичного" или "нетоксичного". Поскольку почти все может быть токсичным в достаточно высоких дозах, степень токсичности должна быть оценена так, чтобы вещества классифицировались и использовались соответствующим образом. Тесты на безопасность должны предоставлять информацию о том, как возрастает токсичность при увеличении или более частом введении дозы, так, чтобы можно было принимать регламентирующие решения относительно допустимого содержания этого вещества в различных косметических продуктах.

Тесты без использования животных - официальный статус

Как разъяснялось в главе 2, компании проводят свои собственные испытания, которые они находят полезными+ при выборе новых косметических ингредиентов для дальнейшей разработки. Однако для того, чтобы получить санкцию властей на использование нового ингредиента, компания должна предоставить данные, полученные с помощью стандартных тестов, утвержденных регламентирующими органами в руководствах по тестированию. В рамках Евросоюза а также в ОЭСР⁴² список официальных тестов время от времени обновляется, по мере того, как принимаются новые методы тестирования. Предполагается, что до официального принятия все новые регуляторные тесты должны проходить тщательную валидацию, с целью продемонстрировать, что они отвечают своему назначению, то есть, что они релевантны и надежны. Однако даже когда тест прошел научную валидацию, официальное включение его в руководства ЕС по тестированию может занять до 2 и более лет, а процедура одобрения ОЭСР может затянуться на еще более долгий срок. Несмотря на все эти препятствия, несколько валидизированных тестов non-animal уже одобрены и включены в руководста по тестированию ОЭСР и/или ЕС (см. Таблицу 2). В Евросоюзе, если метод non-animal внесен в руководства как полностью замещающий своего предшественника, его применение вместо соответствующего теста на животных является обязательным.

Альтернативы, не требующие животных: преимущества во времени и в цене

Многие государства все же серьезно озабочены тем, что предложения REACH в отношении тестирования существующих химикатов непрактичны с точки зрения затрат, времени и имеющихся ресурсов. Целевое развитие и валидация методов non-animal потребуют инвестиций. Исследования валидности стоят 1-2 миллиона евро для испытаний на клеточных культурах и около 20 тысяч евро для компьютерного метода. Это относительно небольшие цифры в сравнении со стоимостью испытаний на животных, проведения которых в противном случае потребует REACH. Более того, быстрое внедрение методов non-animal позволит оперативно провести приоретизацию химикатов и протестировать химикаты, вызывающие наибольшие опасения, а также будет более выгодным в плане временных и финансовых затрат. Например, в недавно опубликованном экспертном обзоре компьютерных методов, предсказывающих токсичность, исходя из структуры химиката (известных как QSAR), было сказано⁴³, что "Принимая во внимание ограниченные возможности промышленности ЕС в отношении тестирования, представляется вероятным, что в намеченный для получения требуемой информации крайний срок можно будет уложиться только в том случае, если подходы QSAR будут использоваться везде, где это осуществимо с научной точки зрения. Датское агентство по защите окружающей среды уже применило QSAR для проверки 47 000 химикатов и идентификации тех из них, которые могут оказывать воздействие на здоровье людей⁴⁴. Другие правительственные органы по всему миру поступили также, в том числе Агентство по защите окружающей среды Соединенных Штатов. В докладе по безопасности химикатов, подготовленном Королевской комиссией по загрязнению окружающей среды, о предложениях REACH говорится следующее⁴⁵: "С тем, чтобы избежать ненужных задержек и использования животных там, где в этом нет необходимости, процесс классификации (химикатов) не следует задерживать на тот период, пока обновляется экспериментальная информация по токсичности". Они рекомендуют провести приоретизацию химикатов, исходя, главным образом, из их химической структуры, с применением QSAR и родственных компьютерных подходов. Оценки затрат на испытания, которые будут проводиться в соответствии с REACH, главным образом на животных, варьируются от 1,5 до 8,68 миллиардов евро. Цифра зависит от множества факторов, особенно от того, насколько широко будут применяться и приниматься методы non-animal. Европейское бюро по химическим веществам заявило, что стратегии "разумного тестирования", во всей полноте использующие QSAR и другие подходы non-animal, могли бы сэкономить для индустрии до 1,2 миллиардов евро; они также могли бы спасти от 1,3 до 1,9 миллионов животных⁴⁶.

Ведущие методы, в которых не используются животные

Ниже мы рассматриваем доступные в настоящее время не использующие животных методы тестирования различных видов токсичности, и называем исследования, которые нужно провести в первую очередь, для того чтобы как можно скорее заменить эксперименты на животных, создавать и тестировать новые косметические ингредиенты гуманным образом. При исследовании почти любого вида токсичности химикаты нужно будет тестировать поэтапно или поуровнево. Потому что редко когда можно заменить одноэтапное тестирование на животных одноэтапным альтернативным методом. Наоборот, шаг за шагом применяются несколько различных техник non-animal. Первая ступенька - это, как правило, простой, рентабельный метод, предоставляющий некоторую ограниченную информацию о химикате. Примером может служить анализ физико-химических свойств химиката. Иногда для того, чтобы идентифицировать и классифицировать явно токсичное вещество, первого уровня было бы достаточно, но чаще химикат должен проходить второй шаг или уровень. Это может быть компьютерный прогноз или простой пробирочный тест на клеточной культуре. Для некоторых химикатов могут потребоваться третий или четвертый уровень с проведением более сложных клеточных испытаний или даже исследований на добровольцах.

Таблица 2. Методы тестирования без использования животных, прошедшие валидацию и одобренные для официального применения в ОЭСР и/или Евросоюзе

Предмет исследования	Метод non-animal	Номер руководства по тестированию ОЭСР и/или ЕС *
Разъедание кожных покровов	Восстановленная человеческая кожа	TG431, B40
Разъедание кожных покровов	TER-метод, использующий изолированные фрагменты кожи	TG430, B40
Абсорбция кожей	Отдельные фрагменты кожи	TG428
Мутагенность/генотоксичность	Тест Эймса с использованием бактерий	TG471, B13/14
Мутагенность/генотоксичность	Мутации генов у дрожжевых грибков	TG480, B15
Мутагенность/генотоксичность	Митотические рекомбинации у дрожжевых грибков	TG481, B16
Мутагенность/генотоксичность	Тест на аберрацию хромосом в клетках млекопитающих (на клеточной культуре)	TG473, B10
Мутагенность/генотоксичность	Тест на мутацию хромосом в клетках млекопитающих (на клеточной культуре)	TG476, B17
Мутагенность/генотоксичность	Внеплановый синтез ДНК (на клеточной культуре)	TG482, B18
Мутагенность/генотоксичность	Обмен сестринских хроматид (на клеточной культуре)	TG479, B19
Светораздражимость (фотосенситизация)	NRU (Neutral Red Uptake) метод (культуры клеток)	TG432, B41
Канцерогенность	Тест на трансформацию клеток у млекопитающего (на клеточной культуре)	B21

* Номер 'TG' обозначает руководство ОЭСР. Номер 'B' обозначает руководство Евросоюза (перечисленные в Приложении V к Директиве по опасным веществам 67/548/EEC). На каждой стадии тестирования применяются более надежные и предиктивные методы, в совокупности дающие более полные и точные результаты, чем предыдущий шаг. При поэтапном или поуровневом подходе, для того чтобы предоставить информацию, требуемую оценщиками безопасности, обычно требуются взаимодополняющие методы, не использующие животных.