Работа № 2. Качественный анализ аминокислотного состава желатина и яичного белка.

Желатин – белковый материал, полидисперсная смесь полипептидов (М = 50-70 •10³) и их агрегатов (М = 300•10³). Образуется из коллагена при длительной обработке хрящей, костей, дермы кипячением в щелочи и экстракцией водой при температуре 50-100˚С. Сохраняет способность к образованию трехспиральной структуры коллагена и образует плотные коллоидные растворы – студни.

Принцип метода. С помощью качественных реакций обнаруживают аминокислоты, входящие в состав желатина и пептидную связь, присущую всем белкам.

Ход работы:

Таблица 1

Качественный анализ аминокислотного состава белков

Название реакции	Предмет обнаружения	Условия опыта		Изменение цвета	Результат
		V р-ра белка	V реактива		Желатин	Яичный белок
Биуретовая	Пептидная связь	0,5 мл	Биуретовый 0,5 мл	Сине-розово-фиолетовый
		Перемешивают при комнатной температуре
Нингидриновая	α-аминогруппы белков, пептидов	0,5 мл	Нингидрин 0,5 мл	Сине- или сине-фиолетовый
		Нагревают до кипячения
Ксантотеиновая (Мульдера)	Ароматические аминокислоты (фен, тир, три)	0,5 мл	Конц. HNO3 5 капель	Желтый
		Нагревают до кипения, охлаждают, по каплям добавляют раствор щелочи
Нитропруссидная	Серосодержащие аминокислоты	1 мл	Р-р щелочи 0,5 мл	Красно-фиолетовый
		Кипятят, охлаждают
		-	Нитропруссид 5 капель

Диагностическое значение: Качественные (цветные) реакции часто используются в клинико-биохимических исследованиях, фармацевтической практике для обнаружения присутствия белков, аминокислот в препаратах, подтверждения подлинности препарата, «проявления следов» аминокислот и белков при хроматографическом и электрофоретическом исследованиях.

Рекомендации по оформлению результатов работы написанию выводов.

Перенесите в лабораторную тетрадь таблицу №1 и отметьте в графе «результаты работы», какие качественные реакции для желатина и яичного белка дали положительные или отрицательные пробы.

7. Контрольные вопросы по теме занятия (см. задание к занятию).

8. Литература для подготовки (см. задание к занятию).

9. Обсуждено на заседании кафедры 18. 04. 2010 г.

10. Учебное задание подготовлено ст. преп. Каминской Л.А., асс. Гавриловым И.В.

ГОУ ВПО «Уральская государственная медицинская академия

Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

кафедра биохимии

Утверждаю

Зав. каф. проф., д.м.н.

Мещанинов В.Н.

_____‘’_____________2010 г

Методические указания к практическому занятию № 26 (для студентов)

Факультеты: лечебно-профилактический, медико-профилактический, педиатрический

Курс: 2

1. Тема занятия: Физико-химические свойства и состав крови.

2. Учебная цель занятия: Изучить состав крови здорового человека и изменение качественного и количественного состава при различных патологических процессах.