Определение фенилмолочной кислоты в моче

Образец мочи	Окраска с FeCl3	Выводы
проба № 1 проба № 2

Клинико-диагностическое значение работы.

Цветная реакция на фенилмолочную кислоту в моче является первичным скрининг-тестом на фенилкетонурию. По его результату проводиться дальнейшее обследование для уточнения диагноза.

7. Контрольные вопросы по теме занятия (см. задание к занятию).

8. Литература для подготовки (см. задание к занятию).

9. Обсуждено на заседании кафедры 18. 04. 2010 г.

10. Учебное задание подготовлено асс. Голомолзиным Б.В.

ГОУ ВПО «Уральская государственная медицинская академия

Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

кафедра биохимии

Утверждаю

Зав. каф. проф., д.м.н.

Мещанинов В.Н.

_____‘’_____________2010 г

Методические указания к практическому занятию № 21 (для студентов)

Факультеты: лечебно-профилактический, медико-профилактический, педиатрический

Курс: 2

1. Тема занятия: Обмен нуклеопротеидов. Биосинтез белка.

2. Учебная цель занятия: Рассмотреть: 1) биохимические механизмы переваривания нуклеиновых кислот и всасывания продуктов в ЖКТ; 2) пути тканевого обмена нуклеотидов, РНК и ДНК; 3) биохимические аспекты биосинтеза белка и его регуляции.

3. Задачи занятия:

1. Повторить: строение, классификацию, свойства и биологическое значение нуклеопротеидов (нуклеиновых кислот, белков хроматина).

2. Изучить биохимические механизмы переваривания нуклеиновых кислот и всасывания продуктов в ЖКТ.

3. Изучить пути тканевого катаболизма и биосинтеза пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов.

4. Самостоятельно ознакомиться с биохимическими механизмами тканевого обмена ДНК и РНК (репликация, транскрипция).

5. Самостоятельно ознакомиться с биохимическими аспектами биосинтеза белка и его регуляции.

6. Провести лабораторную работу по определению мочевой кислоты в сыворотке крови. Дать клинико-диагностическую интерпретацию полученных результатов.

7. Выполнить тест-контроль по разделу: Обмен белков.

4. Продолжительность занятия: 3 акад. Часа.

5. Задание студентам:

1. Определить содержание мочевой кислоты в трех пробах сыворотки крови.

6. Методические указания к выполнению самостоятельной работы на занятии. Работа № 1. Определение мочевой кислоты в сыворотке крови.

Принцип метода: Мочевая кислота – это главный продукт обмена пуриновых нуклеиновых оснований. Определение мочевой кислоты основано на фотоколориметрическом определении окрашенных продуктов, образующихся при восстановлении фосфорно-молибденового реактива Фолина мочевой кислотой. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации мочевой кислоты.

Ход работы: В центрифужную пробирку вносят 1,5 мл сыворотки крови, 1,5 мл воды и 1,5 мл раствора ТХУ. Содержимое перемешивают, выдерживают 30 минут и затем центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин. Готовят опытный и стандартный растворы следующего состава:

Реактивы	Опытный раствор	Стандартный раствор
1. Центрифугат (соответствующий 1,5 мл сыворотки) 2. Стандартный раствор * 3. Раствор трихлоруксусной кислоты 4. Вода 5. Реактив Фолина *	1,5 мл - - - 1 капля	- 0,5 мл 0,5 мл 0,5 мл 1 капля

Примечание: * реактивы готовят лаборанты.

Готовые растворы выдерживают при 20˚С 10 мин, при этом развивается окраска. Оба раствора колориметрируют на ФЭКе (зеленый светофильтр, измерение проводят относительно воды).

Расчет проводиться по формуле:

Соп = 0,12•Доп/Дст мМоль/л,

Где Соп – концентрация мочевой кислоты в сыворотке крови, 0,12 – концентрация стандартного раствора мочевой кислоты, Доп и Дст – оптические плотности соответственно опытного и стандартного растворов.

Рекомендации по оформлению результатов работы и написанию выводов

Результаты работы оформить в виде таблицы: