Методические указания к практическому занятию № 18 (для студентов)

Факультеты: лечебно-профилактический, медико-профилактический, педиатрический

Курс: 2

1. Тема занятия: Механизмы переваривания и всасывания белков.

2. Учебная цель занятия: Изучить биохимические механизмы переваривания и всасывания белков.

3. Задачи занятия:

1. Изучить роль белка в питании, показатели качества пищевого белка и принципы его нормирования в рационе, азотистый баланс.

2. Изучить механизм действия пищеварительных ферментов, механизмы всасывания аминокислот, процесс «гниения» белков в кишечнике.

3. Ознакомиться с биохимическими причинами, метаболическими и клиническими последствиями белковой недостаточности и методами ее профилактики.

Дополнительный вопрос для педфака: возрастные особенности переваривания и всасывания белков.

4. Продолжительность занятия: 3 акад. Часа.

5. Задание студентам:

1. Определить рН трех образцов желудочного сока.

2. Определить присутствие лактата в трех образцах желудочного сока.

3. Определить кислотность (свободную и связанную соляную кислоту и общую кислотность) в трех образцах желудочного сока.

6. Методические указания к выполнению самостоятельной работы на занятии. Работа № 1. Определение рН желудочного сока.

Принцип метода: Индикатор Конго в нейтральной и слабо кислой среде имеет красную окраску, а при рН меньше 3-4 меняет ее на синюю. Это происходит только в присутствии сильной соляной кислоты (органические кислоты не снижают рН ниже 4,0).

Ход работы: Одну каплю желудочного сока наносят стеклянной палочкой на красную бумагу Конго. Изменение цвета на синий свидетельствует о присутствии в желудочном соке свободной соляной кислоты. Записать результаты и выводы в таблицу.

Работа № 2. Определение лактата в желудочном соке.

Принцип метода: Качественная реакция на молочную кислоту основана на ее способности образовывать с ионами Fe³⁺ комплекс желто-зеленого цвета. Эта окраска наиболее четко определяется при проведении реакции с фенолятом железа.

Ход работы:

В пробирку наливают 2-3 мл 1% раствора фенола и добавляют 1-2 капли 3% раствора FeCl₃. Образуется сине-фиолетовый фенолят железа. Затем добавляют несколько капель желудочного сока. При наличии в нем лактата окраска становиться желто-зеленой. Записать результаты и выводы в таблицу.

Работа № 3. Определение кислотности желудочного сока.

Принцип метода: Определение кислотности желудочного сока основано на титровании кислореагирующих веществ 0,1 Н раствором NaOH. Титрование в присутствии двух индикаторов позволяет в одной пробе определить свободную HCl, связанную HCl и общую кислотность. Кислотность определяется количеством мл 0,1 Н раствора NaOH, пошедшего на титрование 100 мл желудочного сока (титрационные единицы, Т.Е.). В норме общая кислотность у взрослых составляет 40-60 Т.Е.

Ход работы:

В колбу вносят 5 мл желудочного сока и по 1-2 капли индикаторов: диметилазобензола и фенолфталеина. Титруют 0,1 Н NaOH до оранжевого окрашивания, отмечают количество израсходованного NaOH – это I пункт титрования, он соответствует количеству свободной HCl, которое определяется по формуле:

Свободная HCl = А•100/5 = 20•А Т.Е.,

где А – количество мл 0,1 Н NaOH, израсходованного до I пункта.

Далее эту же пробу продолжают титровать до лимонно-желтого окрашивания, отмечают израсходованное количество NaOH от начального пункта – это II пункт титрования. Затем эту же пробу титруют до появления розовой окраски – III – пункт, отмечают израсходованное количество NaOH от начального пункта. Количество NaOH, необходимое для связывания общей HCl равно средне арифметическому количеств NaOH, пошедших на титрование до II и до III пунктов. Поэтому общая HCl рассчитывается по формуле:

Общая HCl = (Б+В)/2•100/5 = 10• (Б+В) Т.Е.,

где Б и В – количества 0,1 Н NaOH, пошедшие на титрования до II и до III пунктов соответственно.

Связанная HCl = Общая HCl – Свободная HCl

Общая кислотность = В•100/5 = 20•В Т.Е.

Рекомендации по оформлению результатов работы и написанию выводов

Оформить результаты работы в виде таблицы: