Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Микротренинг

.pdf
Скачиваний:
184
Добавлен:
26.03.2016
Размер:
6.1 Mб
Скачать

тех же научных целей. Значимую часть микрохирургического тренинга занимают неживотные модели.

К лабораторным животным также применимы понятия «боль» и «ди- стресс». – неприятное чувствительное или эмоциональное восприятие, ассоциированноеБоль с потенциальным или имеющим место повреждением ткани (IASP). – биологическийответ,с помощьюкоторогоживотноепытаетсяДистресссправиться с угрозой для своего гомеостаза [41].

Признаки боли и дистресса указаны в табл. 1 и на рис. 2.

 

 

 

Таблица 1

Потенциальные симптомы боли или дистресса животных

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Симптом

Мыши

Крысы

 

Кролики

Снижение потребления пищи и воды

+

+

 

+

 

Снижение массы тела

+

+

 

+

 

 

 

 

 

 

 

Немотивированная изоляция (животное прячется)

+

+

 

+

 

Нанесение себе увечий (животное грызет

+

+

 

+

 

конечности)

 

 

 

 

 

 

 

НЦРВХ СО

+

РАМН+ +

 

Учащенное дыхание

+

+

+

 

Дыхание открытым ртом

+

+

+

 

Дыхание с участием живота

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Скрежетание зубами

+

+

 

Кусание/ворчание/агрессия

+

+

 

Замедление/убыстрение движений

+

+

+

 

 

 

 

 

 

 

Взъерошенный вид (ощетиненность,

+

+

+

 

всклоченность)

 

 

 

 

 

 

Аномальная поза (голова вжата в туловище,

+

+

+

 

спина выгнута)

 

 

 

 

 

 

Беспокойный сон

+

 

 

 

 

 

 

 

Слезотечение (включая порфирию),

+

+

 

снижение мигательного рефлекса

 

 

 

 

 

 

Расширенный зрачок

+

 

Ригидность мышц или недостаточный тонус

+

+

+

 

 

 

 

 

 

Признаки дегидратации, запавшие глаза

+

+

+

 

Подергивание, дрожание, тремор

+

+

+

 

 

 

 

 

 

Издавание звуков

+

+

+

 

Покраснение, отек в месте вмешательства

+

+

+

 

Повышенная саливация

+

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

17

НЦРВХ СО РАМН

Рис. 2. Изменения мимики крысы в ответ на боль [22].

0 — изменения отсутствуют; 1 — умеренные изменения; 2 — выраженные изменения.

18

АдекватноеобезболиваниеАНЕСТЕЗИЯиседациялабораторныхживотных,какиправильныйуходзаними,являютсяобязанностьюисследователя.Существуют ингаляционный и инъекционный способы введения анестезирующего вещества.Инъекциюпроводятвнутривенно(в/в),интраперитонеально(и/п), внутримышечно(в/м)иподкожно(п/к).Способанестезиивыбираютисходя издоступностипрепаратовиособенностейисследования.Длямикрохирургического тренинга обычно используют разновидности инъекционного наркоза(табл.2).Угрызуновметаболизмнамногоинтенсивнее,чемучеловека,илекарственныевеществабыстреевыводятсяизорганизма,поэтому дозировки анестетиков значительно отличаются от таковых для человека. Многие вещества относятся к наркотическим, в связи с чем требуются специальные условия для их хранения и разрешение на применение.

 

 

 

 

 

Таблица 2

Инъекционные анестетики для применения у крыс

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Препарат

 

Доза

Эффект

Длительность

 

Сон

 

 

 

 

 

(метод введения)

мин

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

НЦРВХ

СО

РАМН

Ketamine/

75

мл/кг +

Поверхностная

20–30

120

 

Acepromasine

2,5 мг/кг (и/п)

анестезия

 

 

 

 

 

Ketamine/

75

мл/кг +

то же

20–30

120

 

Diasepam

5 мг/кг (и/п)

 

 

 

 

 

 

Ketamine/

75

мл/кг +

Хирургическая

20–30

 

120–240

Medetomidine

0,5 мг/кг (и/п)

анестезия

 

 

 

 

 

Ketamine/

75

мл/кг +

Поверхностная

20–30

120

 

Midasolam

5 мг/кг (и/п)

анестезия

 

 

 

 

 

Ketamine/

75–100 мг/кг +

Хирургическая

20–30

 

120–240

Xylasine

10

мг/кг (и/п)

анестезия

 

 

 

 

 

Methohexital

10–15 мг/кг (в/в)

то же

5

10

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Pentobarbitone

40–50 мг/кг (и/п)

Поверхностная

15–60

 

120–240

анестезия

 

 

 

 

 

 

 

 

Propofol

10

мг/кг (в/в)

Хирургическая

5

10

 

анестезия

 

 

 

 

 

 

 

 

Thiopentone

30

мг/кг (в/в)

то же

10

15

 

50

мг/кг (и/п)

 

 

 

 

 

 

 

Tiletamine/

40

мг/кг (и/п)

Поверхностная

15–25

 

60–120

Zolezepam

анестезия

 

 

 

 

 

 

 

Urethane*

1,00 мг/кг (и/п)

Хирургическая

360–480

 

60–120

анестезия

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

* Индуцирует опухоли, использовать только в безвозвратных экспериментах.

19

Лабораторные животные небольшие по размеру, поэтому объем вводимых растворов ограничен (табл. 3). При внутримышечных инъекциях – не более двух, при подкожных – до трех мест введения в день. Интраперитонеальное введение не должно быть частым из-за риска развития перитонита.

Таблица 3

Максимальные объемы препаратов для лабораторных животных при различных способах введения

Животные

 

Доза (максимально вводимый объем), мл/кг

 

per os

 

п/к

и/п

в/м

в/в

 

в/в

 

 

(быстро)

(медленно)

 

 

 

 

 

 

Мыши

10 (50)

 

10 (40)

20 (80)

0,05*

5

 

(25)

 

(0,1)*

 

Крысы

10 (40)

 

5 (10)

10 (20)

0,1*

5

 

(20)

 

(0,2)*

 

Кролики

10 (15)

 

1 (2)

5 (20)

0,25

2

 

(10)

 

(0,5)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

* Объем инъекции в одно место (мл).

НЦРВХВ случае операционной кровопотериКРОВОПСОТЕРЯили приРАМНзаборе крови на анализ следует руководствоваться параметрами, приведенными в табл. 4. При кровопотере 5 % от ОЦК животному на восстановление требуется 1 нед, 10 % – 2 нед.

 

 

 

 

 

 

 

 

Таблица 4

 

Приблизительный расчет объема кровопотери

 

 

 

для лабораторных животных

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Животные

 

Общий объем

 

Объем кровопотери, мл

 

(масса)

 

крови, мл

5 %

 

10 %

15 %

 

20 %

Мыши (25 г)

 

1,8

0,1

 

0,2

0,3

 

0,4

Крысы (250 г)

 

16

0,8

 

1,6

2,4

 

3,2

Кролики (4 кг)

 

224

11

 

22

34

 

45

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Планируя эксперимент, следуетЭВТАНАЗИЯвыбрать гуманное его окончание. Эксперимент с использованием лабораторного животного должен быть завершен эвтаназией. В соответствии с классификацией AVMA (American Veterinary MedicalAssociation)выделяютприемлемые,условноприемлемые и неприемлемые методы эвтаназии.

20

аПриемлемые) барбитуратыметоды(большинство: видов животных); б) CO газ (большинство видов животных);

в) ингаляционная2 анестезия (большинство видов животных); г) микроволновое излучение, (мыши, крысы); д) трикаинметансульфат (рыбы, амфибии); е) эфир, угарный газ (опасно для персонала).

аУсловно) переломприемлемыешейногометодыотдела :позвоночника (птицы, мелкие грызуны, кролики);

б) декапитация (птицы, грызуны); в) повреждение спинного мозга;

г) различные фармакологические и физические методы. аНеприем) хлоралгидратемые мет, хлороформды: , цианид; б) декомпрессия; в) блокаторы нейромышечной передачи;

г) различные фармакологические и физические методы; д) генерированный сухим льдом СО2.

НЦРВХ СО РАМН

ОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ

Работа в лабораторииС ЛАБОРАТОРНЫМИсопряжена со следующимиЖИВОТНЫМИрисками: 1) аллергия (аллергены: моча, перхоть, шерсть и др.); 2) укусы (крысы, мыши), удары (кролики), царапины;

3) инфекционные заболевания (зоонозы: Hantavirus, Lymphocytic cho riomeningitis virus

); -

4) распространение заболевания среди лабораторных животных (по этому в виварии соблюдается карантинный режим: специальная одежда, сменнаяобувь,ограниченныйдоступкживотным,исследуемыеживотные не контактируют с выращиваемыми и между собой);

5) уколиглой(введениетоксичныхвеществ,патогенаилиопухолевых клеток по неосторожности); ном6)).  вдыхание паров ядовитых веществ (формалин является канцероге-

Приработесживотнымивлабораториинеобходимособлюдатьследующиеправилаповедения.Обязательнымявляетсяношениечистойзащитнойодежды:лабораторныйхалат,колпак,маска,перчатки,сменнаяобувь. Находясь в лаборатории, не следует касаться рта и глаз. Запрещается есть, питьиноситьконтактные линзы. Особую осторожность нужнопроявлять при работе с иглами! Обращаться с животными деликатно и осторожно,

21

при необходимости использовать ограничительные приспособления или седацию. Помещение должно хорошо проветриваться, особенно при работе с ингаляционными анестетиками и формалином. Двери лаборатории необходимо всегда держать закрытыми и ограничивать вход в комнату к животным. После выхода из лаборатории следует вымыть руки и лицо.

НЦРВХ СО РАМН

22

Глава 2

ОРГАНИЗАЦИЯ МИКРОХИРУРГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ

Восновуорганизациисовременныхмикрохирургическихлабораторий

вбольшинстве развитых стран положено согласие этического комитета учреждениясрегистрациейвдепартаментезащитыживотных, допускающеготренингиэкспериментынадживотными(понашимданным,вРоссии такогосогласиянетребуется).Лабораториюобычновозглавляетквалифицированныйхирург(нейрохирург),имеющиймикрохирургическийопыти стажработы,еедеятельностькоординируетсяхирургическимотделением больницы или кафедрой хирургии университета. Одной из существенных особенностейНЦРВХорганизациилабораторииСОявляетсяРАМНпредоставлениесвободногодоступадругимклиническимилиобразовательнымучреждениямдля проведения микрохирургического тренинга. При этом устанавливается круглосуточный график работы (включая выходные дни), что позволяет болеегибкосочетатьтренировочныйкурссредиразличныхспециалистов иоптимизироватьиспользованиемикроскопов.Координирующийадминистраторсоставляетпрограммуирасписаниетренировокдляпрактикантов. Так, ординаторы, которые освоили базовые микрохирургические навыки, но не имеющие разрешения для проведения операций в клинике, могут продолжать обучение по более свободному графику [58, 60, 91].

Организуемая лаборатория по возможности должна располагаться отдельно от лечебных корпусов и находиться вблизи зданий, где могут содержаться животные. В лаборатории предусмотрены операционная и комната для конференций. Последняя имеет профессиональную библиотеку (с видеоматериалами, книгами и статьями по микрохирургии), оборудованную компьютером и литературным поисковиком. Операционная комната(площадьюнеменее20м2),расположеннаявосвещенном,хорошо проветриваемом помещении, оснащается микроскопами. Операционные стулья,желательнофиксированныекполу,располагаютсятакимобразом, чтобы два человека (стажер и тренер) находились напротив друг друга. Операционныйстулдолженрегулироватьсяповысоте,иметьподлокотники

23

и быть удобным. Необходимо наличие раковины с водопроводом и лотка для промывки использованных инструментов. Специальное стерилизационное оборудование может потребоваться при других исследованиях, но при тренинге нецелесообразно, так как соблюдение правил асептики и антисептики не обязательно (рис. 3).

НЦРВХ СО РАМН

Рис. 3. Общий вид лаборатории микронейрохирургии Yasargil в Китае

(Пекин, 2005 г.).

24

Глава 3 ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

Профессиональное владение микрохирургической техникой – обязательное, но не единственное условие современной микрохирургии. Для эффективного проведения микрохирургических вмешательств необходимо наличие специального оборудования (операционного микроскопа, микроинструментов,шовногоматериала)исоблюдениерядатехнических условий. Многое зависит от качества микроинструментов. В данной главе нами представлены принципиальные типы нейрохирургического микроинструментария и описаны его основные качества.

НЦРВХСтажердолженОПЕРАЦИОННЫЙуметьнастраиватьСОмикроскопМИКРОСКОПиРАМНуверенноуправлятьим. Принципиальное устройство микроскопа схоже с использовавшимся в

школе на уроках биологии, но имеет некоторые отличия (рис. 4).

а

б

в

 

Рис. 4. Современные микроскопы.

 

а — лабораторный микроскоп Zeiss STEMI DV4; б — операционный микроскоп Leica; в — операционный микроскоп Zeiss Pentero 900. 1 — окуляры; 2 — объектив; 3 — регулятор степени увеличения; 4 — регулятор высоты (фокусного расстояния); 5 — регулятор освещения; 6 — рабочая «голова»; 7 — изгибающаяся «рука»; 8 — основание; 9 — встроенный компьютер.

25

Операционныймикроскоплибожесткофиксирован,либоимеетоснование – тяжелую платформу, придающую ему устойчивость и позволяющую избегать колебаний. У современных микроскопов там же находятся встроенный компьютер с программным обеспечением и дублирующая системаконтроля.Рабочая«голова»микроскопавключаетвсебяобъектив с линзой, направленный на операционное поле, окуляры – основной для хирурга и дополнительный для ассистента, ручки с кнопками-манипуля- торами (рис. 5). Возможна также установка манипулятора, зажимаемого губами. Некоторые модели микроскопов оснащены переносной педалью с кнопками-манипуляторами.

НЦРВХа СОб РАМНв

ис. 5. Настройка и управление микроскопом.

а — Zeiss OPMI 1; б — Zeiss Pentero; в — ножная педаль. 1 — регулятор увеличения линз окуляров (отдельно для левого и правого глаза); 2 — регулятор межзрачкового расстояния;

В современные3 — регулятор степоперационныени увеличения;микроскопы4 — егулятор фокусвмонтированого расстоянияэлектриче. -

ский мотор, обеспечивающий автоматические движения вверх и вниз, контролируемые при помощи ножной педали (рис. 5, ) или манипулятора, зажимаемого губами. Кроме того, можно установить дополнительную систему линз и окуляров для ассистента. Трехмерное пространственное изображение объекта формируется за счет его получения отдельно в каждом окуляре (рис. 6). Освещение операционного поля осуществляется коаксиальночерезлинзуобъективаотисточникасвета,вмонтированного в микроскоп. Это абсолютно необходимо для оперирования на глубоких структурах.

Несмотрянасложностьконструкциипоследнихмоделеймикроскопов, принципы работы с ними остаются прежними: 1) регулировка степени увеличения;2) регулировкафокусногорасстояния(ранниемоделиимеют ручную регулировку, современные – лазерную автокоррекцию).

– один из важных параметров. Указанное на рамкеФо усноелинзырасст, онояниедолжнолинзысоответствовать доступному операционному

26