21.Технология получения витамина в12.

Получают только микробиологическим путем. Продуценты в основном пропионовокислые бактерии P.Shermani, а также в роли продуцента может выступать р.псеудомонесPs.denitrificans. При использовании п.шермани используется периодический режим без доступа кислорода, среда содержит глюкозу, кукурузный экстракт, соли аммония, колбальта; рН 7 поддерживается добавляяNH4OH. Продолжительность 6 суток. Через 3 суток в питательную среду добавляют предшественника витамина В12 (5,6-диметилбензинидазол) и продолжают ферментацию 3 суток. Витамин В12 по другому цианкобаламин накапливается в клетке бактерий, поэтому дальнейшая операция направляется на извлечение его из клеток. Сепарирование, экстракция водой при рН 4-5 и температуре 85-90град в присутствии стабилизатора 0,25% раствор нитрита натрия. Экстракцию проверяют 1 час, затем охлаждают, нейтрализуют р-ром едкого натра, добавляют коагулянты белка (хлорид железа, сульфид аллюминия) и затем фильтруют. Фильтрат упаривают и очищают, используя методы ионного обмена и хромотографии. После чего кристаллизуют при темпер 3-4град. Поскольку вит В12 светочувствителен все операции проводят в затемненных условиях или при красном свете. Вит В12 идет на спиртовой и ацетонобутиловой бардах, с добавлением солей кобальта получают кормовой препарат. КМБ – это концентрат содержащий вит В12 и другие ростовые вещества. Картиноиды – изопленоидные соединения кот синтезируют многими пигментными м/о р.торуля, сарцины, карнии бактерий и тд. Известны ок 500 картиноидов. Карни локализуются в виде сложных эфиров гликозидов, клеток мембраны м/о, либо в свободном состоянии в липидных гранулах цитоплазме. Из одной молекулы каратина при гидролизе образуется 2 молекулы вит А в кишечнике человека.

22.Получение лимонной кислоты при поверхностном культивировании продуцента.

Поверхностное культивирование на жидкой среде. Распространен в странах Европы и Америки. Жидкую среду размешивают в неглубокие кюветы и засевают конидиями гриба. Гриб развивается в виде плотной пленки на поверхности среды; к-та поступает в раствор из кот ее осаждают. Захар заменили на мелассу, кот освобождают от ионов металлов. Меласса содержит 50% сахарозы, микроэлементы, в том числе железо, которое препятствует образованию к-ты. Активность кислотообразованной грибной пленки достигает максимума на 5-6 сутки 100-150г к-ты на 1 кубический метр в час и далее удерживается на высоком уровне 50-60 кубич метр в час. 3 способа ведения процессов: бессменный, сменный, доливной. 1)при бессменном рост и кислотообразование происходит на одной и той же среде. 2)это метод готовых пленок, под готовую пленку после промывки подводят новый питательный раствор. 3)способ доливной – через 6-7 суток когда содержание сахара снижается до 3-4% подливается свежий раствор меласса. В процессе культивирования важную роль играет аэрация, температура, влажность. Темпер 34-36град, подача воздуха стерильного 3-4 метр кубический/час на 1 метр в квадрате мицелия. При усиленном продуцировании 15-18 кубический метр. В конце процесса концентрация к-ты составляет 200 гр/литр. После ферментации культуральную жидкость сливают и используют для выделения к-ты.