11.Получение ферментов при глубинном культивировании продуцента.

Жидкая питательная среда 5 этапов: 1) приготовление питательной среды – компоненты, готовые к растворению, подают при постоянном помешивании в емкость для приготовления среды в определенной последовательности. Стерилизацию среды осуществляют либо микрофильтрацией через полупроницаемые мембраны, либо при помощи высокой температуры. Стерилизуют все аппараты, воздух очищают до и после аэрирования. 2)получение засевного материала – готовят только глубинным способом, для грибов это мицеальная вегетативная масса, для бакт – молодая растущая культура. Получение посевного материала заключается в увеличении массы продуцента в 3-4 стадии. 3)производство культивирования – в глубинной культуре биосинтез ферм протекает 2-4 суток при подаче кислорода и перемешивании или часто свежая среда или некоторые ее компоненты вводятся в ферментер на стадии активного роста культуры с целью избежания торможения роста биомассы на первых этапах. Тепература 22-32 град. Ферментеры все автоматизированы – содержание углеводов, концентрация клеток, кол-во метаболитов. 4)выделение фермента – в мицелии 3х суточные структуры не более 15% ферментов, остальные выделяются в окружающую среду. Практически все гидролазы внеклеточные. Биомассу отделяют и фермент выделяется из фильтрата. 5)получение товарной формы.

12.Технология получения уксусной кислоты при культивировании продуцента глубинным способом.

Уксус спиртовый винный. Уксус наряду с уксусно кислыми содержит незначительное кол-во сложных эфиров, которые придают ему вкус и аромат. Сырьем для получения спиртового уксуса является водный раствор этилового спирта, для винного – виноградное вино, мед, соки, пивное сусло. Уксусную к-ту получают периодическим или непрерывным, поверхностным или глубинным способами. Поверхностный – на поверхности буковых стружек, глубинный в ферментерах. Используют р.акцетобактер. Питательная среда содержит от 3до 5 % спирта, 5-6% уксусной и минеральные соли (фосфор, сера, калий, магний, натрий). В качестве источника витамина иногда добавляют пивное сусло. Спирт и уксусная к-та являются источником углерода. При высоком содержании спирта и уксусной к-ты размножение уксуснокислых преостанавливается. Высокая производительность достигается при доминировании р.акцетобактер ацети. Стерильность не соблюдается, поскольку рНот 2,5 до 3 и состав среды неспецифичен для других бактерий. При глубинном способе используют р.акцетобактер ацети, выход 18-23 кг на 1 кубический метр среды в сутки. Наиболее эффективным является непрерывный глубинный метод в ферментерах, здесь используется несколько ферментеров последовательно соединяющихся друг сдругом. В каждый ферментер обязательно поступает воздух. Во второй и последний поступает дополнительное кол-во спирта. В первом ферментере – размножение, поскольку концентрация уксусной к-ты и спирта не значительные, а в остальных ферментерах превращение спирта в уксусную к-ту происходит благодаря активности ферментов не размножающихся клеток. При концентрации уксусной к-ты 8% уксусно кислые бактерии не растут.