9.Перспективность иммобилизации ферментов.

Иммобилизованные ферменты – в-ва белковой природы и поэтому неустойчивы к хранению и чувствительны к тепловым воздействиям, кроме этого они не могут использоваться многократно, все эти проблемы решают с помощью иммобилизации. Иммобил – это прикрепление ферментов в активной форме к нерастворимой основе или заключениях их в полупроницаемую мембранную систему. Прикрепление ферм к носителю осуществляется адсорбционно, хим связью или путем включения механического ферм в орг-ий или неорганический гель или капсулу. Преимущество иммобил ферм: 1)катализатор легко отделим от реакционной среды, что дает возможность в любой момент остановить р-ю, а также использовать ферм повторно и получить чистый от фермента продукт. 2)ферментативный процесс можно проводить непрерывно регулируя скорость и выход продукта. 3)каталитическая активность можно регулировать путем изменения свойств носителя, напр при воздействии света, ультразвука. Существует 2 метода иммоб – фихический и хим. Физ иммобил это включение ферм в определенную среду. 4 типа связывания ферментов: 1)адсорбция на нерастворимом носителе. 2)включение в поры геля. 3)отделение ферм от остального объема реакции сист с помощью мембранной перегородки. 4)включение ферм в 2х фазную систему, где фермент растворим и может находится только в одной из фаз. Для иммобил ферм в гель 2 способа: 1)ферм помещают в водный раствор мономера и проводят полимеризацию. 2)ферм вносят в раствор готового полимера, кот затем приводят в гелеобразное состояние. При использовании мембраны, мембрана пропускает только небольшие молекулы субстрата, но не пропускает молекулы ферм. Т.о вводный раствор ферм отделяется от водного раствора субстрата. Хим метод иммобил заключается в том, что путем хим-х взаимодействий на структуру ферм в его молекуле создаются новые ковалентные связи, в частности м/у белком и носителем. Иммобил ферм используется в пивоварении, виноделии, при очистке сточных и прир вод, при биосинтезе и трансформации таких как АК, анитбиотики, стероиды; использ при извлечении металлов и сточных вод. Выгода: 1)отсутствие затрат на выделение и очистку ферм. 2)на выделение и очистку продуктов р-ии. 3)более выс активность, стабильность. 4)возможность созд непрерывных и полунепр автоматизированных процессов. 5)способность к длит функционированию полиферментных систем без экзогенных кофакторов.

10.Влияние условий культивирования дрожжей на синтез липидов.

Липиды – соединения растворимые в неполярных растворителях (хлороформ, спирт). Технология процесса получ липидов включает стадию выделения липидов из клеточной массы методом экстракции в неполярном растворителе – бензине или эфире, при этом получается 2 готовых продукта – микробный жир или биожир и обезжиренный белковый препарат или биошрот. Сырьем явл те же среды, что и для произ-ва формовой биомассы. В процессе культивирования м/о на различных средах получается 3 класса липидов: простые, сложные и их производные. Простые – это нейтральные жиры и воски. Нейтр жиры – это эфиры глицерина и жирных к-т, основная масса которого триацилглицериды. Воски – это эфиры жирных к-т и алифатических спиртов с длинной углеродной цепью. Воски по структуре близки к нейтральным липидам. Наибольшее кол-во нейтр липидов синтезируют дрожи и мицелиальные грибы. Применяют в качестве смазке при обработке металлов, а продуценты сложных липидов – это бактерии. Сложные липиды делятся на фосфо- и глико- липиды. Фосфолип входят в состав клет мембран. Гликолип выступают в качестве рецепторов на поверхности мембран. К производным липидам относят жирные к-ты, спирты, УВ, вит Д, Е, К. Условия культивирования: влияние оказывает аэрация, рН и температура. При недостатке аэрации липиды содержат в 4 раза < триацилглицеридов, в 2 раза > фосфоглицеридов и в 8р > жирных кислот, чем при нормальной аэрации. При интенсификации аэрации возрастает степень ненасыщенных липидов и следовательно ненасыщенных жирных к-т. Повышенный рН ведет к увеличению фосфоглицеридов и жирных к-т, при одновременном снижении триацилглицеридов. Температура роста и липидообразование клеток совпадает.