Материально - техническое оснащение

1.Инструменты и оборудование: Микроскоп, красители, медицинские лотки, бактериальные петли, пробирки, пипетки, предметные стекла, культуры микроорганизмов, буферы, питательные среды.

2.Схемы и таблицы: «Санитарно-показательные микроорганизмы» «Исследование питьевой воды методом мембранных фильтров».

Контрольные вопросы

1. Дайте определение понятиям "микробное число", "колиформные бактерии" (общие и термотолерантные).

2. Какими методами определяют наличие санитарно-показательных микробов в воде, воздухе? Назовите основные требования к отбору проб и их транспортировке для санитарно-микробиологического исследования.

3. Перечислите объекты, которые подлежат контролю на стерильность в хирургическом отделении стоматологической клиники.

Выполнение лабораторной работы

1.Изучить морфологию и тинкториальные свойства индикаторных микробов (кишечная палочка, стафилококк, грибы рода Candida).

2.Отобрать пробу воды из водопроводного крана для санитарно-микробиологического исследования.

3.Познакомиться с ходом санитарно-микробиологического исследования воды.

4.Изучить демонстрационные посевы воды и воздуха.

5. Познакомиться с методами отбора смывов с различных объектов (халат, стол, посуда, руки) для качественного исследования.

6.Учесть результаты демонстрационного посева смывов (на солевом бульоне и ЖСА, среде Кесслера, Кода и Эндо).

7.Оформить протокол.

Правила оформления протокола

1.Ответить письменно на контрольные вопросы

2.Зарисовать морфологию и тинкториальные свойства индикаторных микробов (кишечная палочка, стафилококк, грибы рода Candida).

3.Записать результаты санитарно – бактериологического исследования: воды - микробное число, количество общих и термотолерантных колиформных бактерий; воздуха - микробное число, наличие стафилококков, грибов (мицелиальных и дрожжеподобных). Дать заключение о микробиологической безопасности объектов внешней среды.

Дополнительный материал

Основы санитарной микробиологии. С помощью санитарно-микробиологических исследований решают вопрос о наличии или степени вероятности присутствия опасных для человека микробов в объектах внешней среды (воздухе, воде, почве, пищевых продуктах, различных материалах, оборудовании и т.д.). Санитарно-микробиологическое исследование включает определение косвенных показателей неблагополучия (общая микробная обсемененность, микробное число, отсутствие санитарно-показательных микробов в конкретном объеме) и, реже, прямых - обнаружение патогенных микробов в объекте.

Микробным числом называют количество микробов в 1 мл жидкости, 1г твердого вещества или 1м³ воздуха. Для его определения делают мерные посевы материала на питательный агар с подсчетом выросших колоний, исходя из того, что 1 колония образуется 1 микробной клеткой. Микробное число выражают количеством колониеобразующих единиц - КОЕ/мл, КОЕ/г или КОЕ/м³. Например, для определения микробного числа воды по 1 мл из неразведенной пробы и из ее 10-кратных разведений вносят в чашки Петри и смешивают с расплавленным питательным агаром. После застывания среды чашки инкубируют при 37⁰С и подсчитывают выросшие колонии. Если, например, на чашке с посевом 1 мл из разведения 10^-3 выросло 120 колоний, то микробное число составляет 1,2х10⁵ КОЕ/мл.

Санитарно-показательными называют микробы - представители нормальной микрофлоры тела человека, которые служат показателями санитарного неблагополучия объекта, т.е. его загрязнения выделениями человека. В качестве санитарно-показательных выбраны микробы, постоянно и в больших количествах содержащиеся в соответствующих выделениях человека, легко идентифицируемые, не имеющие других природных местообитаний, сохраняющиеся в объекте столь же долго, как патогенные микробы той же группы. Например, основной показатель фекального загрязнения воды, пищевых продуктов, - бактерии группы кишечной палочки (БГКП). Воздух оценивают по содержанию стафилококков попадающих в него вместе с другими микробами из дыхательных путей и полости рта человека. К санитарно-показательным микробам относят так же эшерихии, клостридии, энтерококки, колифаги (бактериофаги). В ходе оценки состояния объекта определяют отсутствие особей санитарно-показательных микробов в единице объема (100 мл, 50 мл, 20мл воды) или их количество в 1м³ воздуха.

Санитарно-биологические показатели воздуха определяют седиментационным или аспирационным методами. Седиментационный метод (Коха) прост, но недостаточно точен. Чашки с питательной средой (ПА, ЖСА) оставляют открытыми в горизонтальном положении. Через 5-60 мин. их закрывают и инкубируют в термостате, подсчитывают колонии и вычисляют микробное число и содержание санитарно-показательных микробов в 1 м³ (считается, что за 5 мин. на площадь в 100 см² оседает такое количество микробов, которое содержится в 10 литрах воздуха). Аспирационные методы основаны на принудительном осаждении микробов из воздуха на поверхность среды или в улавливающую жидкость. Для этого используют специальные приборы (аппарат Кротова, пробоотборник аэрозольный бактериологический - ПАБ и др.), которыми можно исследовать заданный объем воздуха. В связи с распространением госпитальных инфекций в воздухе больничных помещений, помимо обычных показателей, определяют содержание Гр- бактерий.

Тема лабораторного занятия: Микрофлора организма человека и ее функции.

Цели: знать состав основных представителей и их свойства нормальной микрофлоры, ее значение и методы изучения, причины, признаки и критерии дисбиоза кишечника, препараты и принципы его коррекции; уметь оценивать результаты исследования и обосновывать способы коррекции дисбиоза.