Материально-техническое оснащение

1.Инструменты и оборудование: Планшеты, матрасы, питательные среды, буферные растворы для культур клеток. Серологические реакции. Наборы диагностикумов и диагностических сывороток для серодиагностики вирусных инфекций. Микроскоп.

2.Схемы и таблицы: «Строение вируса гепатита С», «Схема иммуноферментного анализа».

Контрольные вопросы

1. Дайте характеристику биологическим свойствам вирусов гепатита С и D. Назовите основные антигенные комплексы вирусов.

2. Перечислите механизмы и пути инфицирования человека вирусными гепатитами С и D.

3. Перечислите принципы микробиологической диагностики парентеральных гепатитов С и D.

4. Назовите маркеры вирусной инфекции в крови при диагностике парентеральных гепатитов С и D. Каково их значение в патологии человека?

5. Перечислите противовирусные препараты, используемые для лечения парентеральных гепатитов С и D.

Выполнение лабораторной работы

1. Изучить по демонстрационным таблицам схемы микробиологической диагностики парентеральных гепатитов С и D.

2. Изучить по демонстрационным таблицам схемы серологической диагностики вирусных гепатитов.

3. Учесть результаты ИФА при серодиагностике гепатитов.

4. Познакомиться с биологическими препаратами для лечения вирусных гепатитов С и D.

5. Решение ситуационных задач.

6. Оформить протокол.

Правила оформления протокола

1. Ответить на контрольные вопросы.

2. Зарисовать по демонстрационной таблице схему строения вируса гепатита С.

3. Зарисовать графически по демонстрационным таблицам схемы серологической диагностики вирусных гепатитов С и D.

4. Учесть демонстрационную ИФА при гепатите С: записать ингредиенты, схематично зарисовать результат реакции. Оценить результат.

5. Дать характеристику иммунобиологическим препаратам, применяемым для специфического лечения гепатитов С и D.

6. Записать интерпретацию результатов микробиологических исследований пациентов с вирусными инфекциями.

Дополнительный материал

Вирус гепатита D (HDV). HDV — дефектный РНК-содержащий вирус рода Deltavirus семейства Togaviridae. Поскольку в со­став вируса входит значительное количество HbsAg HBV, само­стоятельная инфекция, вызванная вирусом гепатита D, не на­блюдается. Таким образом, гепатит D протекает только на фоне гепатита В, осложняя его течение.

Вирус гепатита С (HCV). HCV — РНК-геномный, включен в состав рода семейства Flaviviridae. Выделяют 6 сероваров HCV, каж­дый из которых преимущественно встречается в определенной стра­не (например, 1-й тип — в США, 2-й тип — в Японии).

В связи с большими трудностями при выделении всех перечис­ленных вирусов практически единственным методом диагности­ки гепатитов является серологическая диагностика. В парных сыво­ротках крови больных выявляют IgM с помощью ИФА, РИА, ИЭМ, РИФ. Для исключения ложноположительных результатов ИФА рекомендуется метод рекомбинантного иммуноблотинга.

Для вирусов гепатита D, Е и G можно выявить IgM через 10 — 15 дней после начала клинических проявлений. К антигенам виру­79а гепатита СIgM обнаруживают в среднем через 3 мес. Вирусспе- цифические IgG возможно обнаружить для вирусов гепатита D через 2—11 недель.

Во всех случаях эффективным экспресс – методом диагностики является выявление вирусной РНК в материале от больных с по­мощью ПЦР и молекулярной гибридизации. Вирусную РНК об­наруживают с первых суток инфицирования. ПЦР позволяет выявлять РНК вируса в плазме крови уже в инкубационном периоде, задолго до появления антител, выявлять виремию у бессимптомных доноров крови, оценивать уровень виремии у заболевших, что важно для выбора наиболее благоприятного момента для начала противовирусной терапии и прогноза при хронической инфекции. Кроме того, ПЦР является единственным методом, позволяющим отличить перенесенную инфекцию от текущей.

РНК HDV обнаруживается методом ПЦР при всех вариантах ко- и суперинфекции с участием этого вируса (исследуют сыво­ротку, плазму крови, биоптаты печени). Этот метод подтверждает результаты ИФА, которые могут быть сомнительными в период «маскировки» анти-HDV-IgG в составе иммунных комплексов.

Тема лабораторной работы: Герпесвирусы. Вирусологическая диагностика.

ЦЕЛИ: знать биологические свойства герпесвирусов, их морфологические и физиологические особенности, цитопатическое действие. Методы диагностики. Препараты для лечения; уметь обосновать выбор методов исследования, написать направление на исследование материала при подозрении на герпетическую инфекцию, интерпретировать результаты исследований.