Лабораторне заняття № 7

ТЕМА: Спадковий апарат клітини: хромосоми і хроматин.

І. МОТИВАЦІЯ ЦІЛІ: Морфологічний комплекс ДНК з білком (ДНП), виявляється у формі хромосом при мітотичному поділі клітини. Хромосоми приймають участь при переносі спадкової інформації та її збереженні під час поділу клітини. В стані фізіологічного спокою, тобто між поділами, спадкова інформація міститься в клітині у вигляді хроматину, який зберігає їх і приймає участь в її перетворенні на білок. Таким чином, хроматин і хромосоми є дві форми спадкової інформації в клітині.

ІІ. ЛІТЕРАТУРА ДЛЯ ПІДГОТОВКИ ДО ЗАНЯТТЯ:

ОБОВ'ЯЗКОВА

1. Лекційний матеріал.

2. Ченцов Ю.С. Общая цитология. – М.: Наука, 1978. – С.50-75, 82-84, 90-94, 108-110, 263-271.

3. Заварзин А.А. Основы общей цитологии. – 1982. – С.162-175, 193-199.

4. Свэнсон К. Клетка. – М.: Мир, 1980. – С.44-62, 171, 172-179.

5. Сидорович М.М. Клетка – система систем разного уровня сложности. – Херсон: Айлант, 2003. – С.45-49.

ДОДАТКОВА

1. Хэм А. Гистология. – Т.1. – 1982.- С.132-150, 61-68, 74-88.

2. Быков В.Л. Цитология и общая гистология (функциональная морфология клеток и тканей человека). – СПб.: СОТИС, 1998. – С.76-84.

ІІІ. ПИТАННЯ ДЛЯ САМОПІДГОТОВКИ І КОНТРОЛЮ

1. Перерахуйте форми хроматину в інтерфазному ядрі.

2. Назвіть морфологічні відміни гетерохроматину від еухроматину.

3. Вкажіть функціональні відміни гетерохроматина від еухроматину.

4. Назвіть хімічний склад хроматину.

5. Назвіть морфологічні відміни хроматину і хромосом.

6. Дайте визначення поняттю „каріотип”.

7. Вкажіть особливості будови ядра (хроматину) в клітинах з високою синтетичною активністю ДНК.

8. Вкажіть передбачувані функції ділянок хроматину, що контактують з ядерною оболонкою.

9. Вкажіть хімічний склад ДНК.

10. Перерахуйте морфологічні елементи мітотичної хромосоми.

11. Назвіть різновиди мітотичних хромосом.

ІV. САМОСТІЙНА РОБОТА НА ЗАНЯТТІ

ЗАВДАННЯ І. Вивчити на мікропрепаратах і електронограмах морфологію і ультрамікроскопічну будову хромосом.

ПРЕПАРАТ № 7. Мітотичні хромосоми (мітоз в клітинах кореню цибулі). Заб. гематоксилін залізний, зб. 40^х. Під малим збільшенням на препараті знаходять кореневу меристему , тобто зону клітин, що інтенсивно діляться. Під великим збільшенням вибирають клітину, що знаходиться на стадії профази (пізньої) або ранньої телофази. Хромосоми в ній повинні знаходитися в одній площині (пропадати і з'являтися в полі зору одночасно при повороті мікрогвинта мікроскопа). Замалювати і позначити в ній:

1. клітинна оболонка

2. цитоплазма

3. хромосоми

ЕЛЕКТРОНОГРАМА № 12. ДНК в хромосомах при різних станах ядра. На електронограмі показані мітотичні хромосоми (зліва) і хромосоми типу „лампових щіток”, які виявляються у профазі I мейозу. Перемальовувати електронограму і позначити:

1. плече мітотичної хромосоми

2. центроміра

3. деконденсовані ділянки в хромосомах типу „лампових щіток”.

ЗАВДАННЯ ІІ. Приготувати препарату, що виявляє наявність статевого хроматину в клітинах слизової оболонки роту.

1. Зробити зіскоб із слизової оболонки рота і помістити його на предметне скло в краплю абсолютного спирту

2. Підфарбувати гематоксиліном - 2-3 хв.

3. Дофарбувати еозином - 1 хв.

4. Накрити покривним склом.

5. Розглянути препарати під мікроскопом і зробити рисунок однієї з клітин, на якому позначити статевий хроматин.

РЕЗУЛЬТАТ: В клітинах - ядро велике, кругле. В ньому брилки хроматину і ядерце. Біля оболонки ядра розташоване щільне тільце - це статевий хроматин, який є статевою Х - хромосому, яка не деконденсувалася після мітозу.

ЗАВДАННЯ ІІІ. Цитохімічне виявлення ДНК (реакція Фьольгіна)

1. Зробити мазок крові, не фіксуючи його в спирті.

2. Помістити його в 1н р-н соляної кислоти при 60⁰ С для гідролізу на

10-20 хв.

3. Перенести мазок в реактив Шиффа на 0,5-1 годину.

4. Сполоснути в 3-х порціях бісульфітної води.

5. Підфарбувати цитоплазму світлим зеленим протягом 1-2 хв.

6. Обезводнити в спиртах (як при роботі з парафіновими зрізами).

7. Просвітлити в кислоті і заключити в бальзам.

РЕЗУЛЬТАТ: ДНК забарвлюється в червоний колір, цитоплазма - в зелений.

Контроль засвоєння матеріалу проводиться наприкінці заняття при індивідуальній співбесіді з викладачем для з'ясування вміння студента пов'язати теоретичний матеріал з виконаними зарисовками препаратів.

Вивчення теми завершується складанням колоквіуму „Спадковій апарат клітини”, до якого входити розділ програми з цитології