Методы исследования качества продуктов питания. Учебное пособие

рисунке отражает предел проникания колонки. Все молекулы,

представляет собой линейный участок на градуировочной зависимости в координатах VR - lgM. Этот участок описывается уравнением

51

значений К максимальное число разрешенных пиков относительно невелико. Этим методом невозможно разделить молекулы одинакового размера, в частности, изомеры. Считается, что разделение двух веществ будет удовлетворительным, если их молекулярные массы различаются не менее, чем на 10%.

52

Ван-дер-Ваальсовы силы

OH

O

-

CO

53

Постоянный дипольный момент молекулы µ может индуцировать дипольный момент в соседней молекуле. Индуцированный дипольный момент всегда направлен в сторону индуцирующего диполя. Таким образом, между двумя молекулами возникает индукционные взаимодействия, также влияющие на разделение веществ.

универсальны и характерны для любых атомов и молекул.

Для веществ сложного состава, содержащих различные функциональные группы, реализуется другой механизм

54

разделения. Он предполагает, что на поверхности обращенно­фазного сорбента за счет сил адсорбции может образовываться слой жидкой фазы, обогащенный менее полярным компонентом подвижной фазы. В ОФ-ВЭЖХ в качестве подвижной фазы чаще используют смеси растворителей метанол-вода или ацетонитрил-вода, в которых менее полярными (и, соответственно, более подобными по химической природе к привитой фазе) являются метанол и ацетонитрил. Удерживаясь на поверхности сорбента, эти растворители создают на ней слой жидкости, отличающейся от подвижной фазы по составу и свойствам. Участвуя в разделении, такой слой жидкости взаимодействует с полярными группами анализируемых веществ по иному, чем привитый на носителе слой, механизму.

55

Если вещество имеет углеводородные группы, то взаимодействие с неполярной фазой происходит за счет Ван­дер-Ваальсовых взаимодействий. Основные взаимодействия могут дополняться вторичными взаимодействиями. Например, силанольные группы, остающиеся на поверхности силикагеля после ее модифицирования алкильными или другими группами, взаимодействуют с полярными молекулами.

56

распределения веществ между неподвижной и подвижной фазами из-за селективных взаимодействий компонентов анализируемой смеси с элюентом (смесью растворителей). По этой причине для эффективного разделения веществ в ВЭЖХ важную роль играет не только выбор сорбента, но и состав подвижной фазы.

элюирующей силой (

). В отличие от индекса полярности,

являющегося только характеристикой растворителя (подвижной фазы) и не зависящего от природы неподвижной фазы, элюирующая сила является мерой энергии взаимодействия молекул растворителя и неподвижной фазы и, следовательно, зависит от природы сорбента. Поэтому элюирующая сила различна для каждой комбинации сорбент-подвижная фаза.

57

расположения растворителей обычно приписываются различиям их протонодонорных и протоноакцепторных свойств (табл. 3.4).

Элюотропные ряды на обращенных (модифицированных) фазах обратны рядам на гидрофильной поверхности немодифицированного силикагеля. В зависимости от типа привитой на силикагель фазы (рис. 3.9) возможны изменения в последовательности ряда растворителей.

58

веществ (их молекулярной массы, растворимости в водных и неполярных средах, способности образовывать ионы при диссоциации и др.). Схема, показывающая принцип подбора соответствующего хроматографического метода для решения конкретной аналитической задачи, приведена выше.

59

разделения смеси веществ осуществляются в плоском слое сорбента (неподвижной фазе). Она подразделяется на бумажную и тонкослойную хроматографии. В первой в качестве сорбента используется специальная бумага. Во второй процессы разделения происходят в тонких слоях сорбента, нанесенного на инертную твердую подложку, или в пленках пористого полимерного материала. Бумажная и тонкослойная хроматографии сходны по технике выполнения анализа. Тонкослойная хроматография, однако, заняла особое место среди других хроматографических методов благодаря простоте методики и доступности оборудования, широкой области применения, высокой экономичности, достаточно высокой селективности и чувствительности. ТСХ является единственным хроматографическим методом, который позволяет проводить полный анализ неизвестной смеси, поскольку исследователь может проверить, не осталось ли на старте неэлюированных (неразделенных) компонентов.

Метод ТСХ был предложен в 1938 г. отечественными учеными Н.А.Измайловым и М.С.Шрайбер. Однако широкие возможности метода были открыты позднее благодаря работам Ю.Кирхнера и Э.Шталя, посвященным биохимии и фармацевтике.

Общее описание метода. На результаты анализа в методе

60