- •Оренбург 2014
- •Авторы:
- •- кандидат биологических наук, доцент Немерешина Ольга Николаевна;
- •Токсикологически важные вещества, изолируемые методом дистилляции. Учебное пособие к семинарским и лабораторно-практическим занятиям по токсикологической химии для студентов специальности 060108.65 – фармация. Модуль 2. Оренбург, 2014. – 82 с.
- •ХАРАКТЕРСТИКА ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИ ВАЖНЫХ ВЕЩЕСТВ, ИЗОЛИРУЕМЫХ ПЕРЕГОНКОЙ С ВОДЯНЫМ ПАРОМ
- •Дистилляция как метод очистки
- •ЭТАПЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
- •2 NaCN + FeSO4 → Fe(CN)2 + Na2SO4
- •Fe(CN)2 + 4 NaCN → Na4[Fe(CN)6]
- •ХЛОРАЛГИДРАТ
- •CCl4 + 4 NaOH → 4 NaCl + 2 H2O + CO2↑
- •AgNO3 + NH4OH → AgOH + NH4NO3
- •ЭТИЛОВЫЙ СПИРТ
- •2 CH3COONa + H2SO4 → 2 CH3COOH + Na2SO4
- •C2H5OH + HOSO3H ─→ C2H5OSO3H + H2O
- •I2 + 2 NaOH → NaOI + NaI + H2O
- •C2H5OH + NaOI → CH3CHO + 3 NaOH
- •ИЗОАМИЛОВЫЙ СПИРТ
- •2 CH3COONa + H2SO4 → 2 CH3COOH + NaSO4
- •I2 + NaOH → HOI + NaI
- •NaOH + HOI → NaOI + H2O
- •CH3COCH3 + 3 NaOI → CI3COCH3 + 3 NaOH
- •CI3COCH3 + NaOH → CHI3↓ + NaOCOCH3
- •ФЕНОЛ
- •МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЛАБОРАТОРНЫМ И СЕМИНАРСКИМ ЗАНЯТИЯМ
- •План оформления работы
- •Занятие № 1
- •Вопросы для самоконтроля
- •ЛИТЕРАТУРА
- •Ответы на вопросы для самоконтроля
- •Ответы на вопросы теоретические задания
- •Занятие № 2
- •Вопросы для самоконтроля
- •ЛИТЕРАТУРА
- •Занятие № 3
- •ЛИТЕРАТУРА
- •ЛИТЕРАТУРА
- •Методическое обеспечение самостоятельной работы студентов:
- •C2H5OH + HOSO3H ─→ C2H5OSO3H + H2O
- •I2 + 2 NaOH → NaOI + NaI + H2O
- •C2H5OH + NaOI → CH3CHO + 3 NaOH
- •ЛИТЕРАТУРА
- •Химико-токсикологического исследования № _1__
Занятие № 3
Тема занятия: Этиловый спирт в химико-токсикологическом отношении. Экспертиза и клиническая диагностика алкогольного опьянения
Цель занятия: Изучить основы экспертизы алкогольного опьянения, организацию и основы ведения документации. Рассмотреть медицинские, социальные и юридические аспекты употребления алкогольных напитков.
Основные понятия: Токсикологическое значение спиртов (метанол, этанол, амилол), токсикокинетика спиртов, токсикодинамика спиртов, объекты исследования и пробоподготовка, клиническая диагностика алкогольного опьянения, степени алкогольного опьянения, химические методы обнаружения спиртов (общие и специфические реакции), экспресс-методы химической диагностики алкогольного опьянения, количественное определение спиртов.
Вопросы к занятию:
1.Этанол и его суррогаты. Токсикологическое значение спиртов, медицинское и социальное значение. Социальные и юридические аспекты употребления алкоголя.
2.Механизмы биотрансформации этанола в организме человека. Медицинские последствия употребления алкоголя. Алкогольная болезнь печени. Лечение алкогольной зависимости и АБП.
3.Стадии алкогольного опьянения. Основы клинической диагностики опьянения.
4.Особенности организации работы кабинета экспертизы опьянения. Ведение документации. Пробоотбор и пробоподготовка.
5.Методы обнаружения алкоголя. Экспресс-методы, их принцип, надежность и достоверность.
6.Методы количественного определения алкоголя (энзимный и газохроматографический).
58
7.Методика экспертизы алкогольного опьянения (метод ГЖХ).
8.Судебно-химическое исследование суррогатов этанола, примеси, имеющие токсикологическое значение.
Вопросы для самоконтроля:
1.ГЖХ, как правило, используется при ХТА для:
1.Разделения анализируемых веществ;
2.Предварительной идентификации;
3.Отделения от метаболитов и балластных веществ;
4.Количественного определения.
2. Механизм разделения, лежащий в основе ГЖХ:
A.Распределение между газовой фазой и твердым сорбентом. Б. Различная сорбционная способность веществ на пластинке
B.Распределение между жидкостью (под давлением) и твердой фазой Г. Распределение между газовой фазой и высококипящей жидкостью Д. Обмен ионами между веществом и сорбентом 3. В ГЖХ неподвижной фазой является:
A.Силикагель; Б. Твердый носитель;
B.Жидкость, нанесенная на твердый носитель; Г. Газ; Д. Пористый газ.
4. Идентификацию веществ в методе ГЖХ проводят по: 1. По высоте пика на хроматограмме 2. По объему удерживания 3. По времени удерживания
7. По площади пика на хроматограмме
5. По числу теоретических тарелок 5. Качественное обнаружение компонентов хроматографируемой смеси в га-
зожидкостной хроматографии проводят по:
59
A. Площади пика
Б. Времени удерживания B. Высоте пика
Г. Коэффициентуемкости
Д. Разрешению Rs и фактору разделения α.
6. Исследование наизоамиловый спирт проводят:
1.При помутнении дистиллята;
2.При наличии капель наповерхности дистиллята;
3.При наличии капель надне дистиллята;
4.При наличии специфического запахадистиллята;
5.В обязательном порядке.
7. При наличии какого вещества(веществ) дистиллят представляет собой прозрачный бесцветный раствор:
1.Изоамиловый спирт;
2.Ацетон;
3.Хлороформ;
4.Метанол;
5. Четыреххлористый углерод.
8. Присутствие какого общего реактива необходимо для проведения реакции окисления метанолаи этанолапри судебно-химическом анализе?
A.Концентрированной серной кислоты; Б. Хлороформа;
B.Гидроксиданатрия;
Г. Карбоната натрия; Д. Уксусной кислоты.
9. Реакцию Комаровского (конденсация с ароматическими альдегидами) можно использовать для обнаружения:
1.Метанола;
2.Фенола;
3.Изоамилового спирта;
60
4.Синильной кислоты;
5.Уксусной кислоты.
10. Реакцией, позволяющей обнаружить этиловый спирт в присутствии других спиртов (метилового, изоамилового), является реакция:
А. Этерификации; Б. Окисления;
В. Взаимодействия с ароматическими альдегидами; Г. Образования йодоформа; Д. Образования этилнитрита.
ЛИТЕРАТУРА
1.Вергейчик Т.Х. Токсикологическая химия. – М: МЕДпресс-информ, 2009 –
400с.
2.Швайкова М.Д. Токсикологическая химия.– М.: медицина, 1975.– С.27– 69.
3.4. Крамаренко В.Ф. Токсикологическая химия. – Киев, 1989.
5. Плетенева Т.В. и др. Токсикологическая химия. – М.: Изд. «ГЭОТАРМедиа», 2005.
6. Лекционный материал.
Швайкова М.Д. Токсикологическая химия. –М.: медицина, 1975.– С.27– 69.
2.Белова А.В. Руководство к практическим занятиям по токсикологической химии. – М., 1976. – С. 5– 27, 44– 51.
3.Крамаренко В.Ф. Токсикологическая химия. – Киев, 1989.
4.Плетенева Т.В. и др. Токсикологическая химия. – М.: Изд. «ГЭОТАР-
Медиа», 2005.
5.Лекционный материал.
ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ЛИТЕРАТУРА
1.Белова А.В. Руководство к практическим занятиям по токсикологической химии. – М., 1976. – С. 5– 27, 44– 51.
2.Видергауз М.Е. Расчеты в газовой хроматографии. М.: Химия, 1978.
61
3. Приказ МЗ РФ «О медицинском освидетельствовании на состояние опьянения» № 308 от 14.июля 2003 г.
4. Приказ № 407 от 10 декабря 1996 г. «О введении в практику правил прои з- водства судебно-медицинских экспертиз». – М., 1997.
5. Под ред. Меньшикова В.В. Справочник «Лабораторные методы исследования в клинике». – М.: Медицина, 1987.
6. Федеральный закон «О государственной судебно-экспертной деятельности в Российской Федерации» № 73-ФЗ от 31 мая 2001 г.
7. Шабанов П.В. Руководство по наркологии. С-Пб.: Лань, 1998.
Методическое обеспечение самостоятельной работы студентов:
1. Заполнить таблицу:
Основные виды примесей, |
Токсикологическое |
Химическая природа, |
в суррогатах алкоголя |
значение |
изолирование, экспер- |
|
|
тиза |
|
|
|
|
|
|
2. Основной путь метаболизма этанола в организме связан с окислением его соответствующими дегидрогеназами до уксусного альдегида и затем
62
до уксусной кислоты, которая может утилизироваться далее в цикле трикарбоновых кислот, если для этого есть соответствующие условия (обеспеченность тканей кислородом, запасы гликогена, интенсивный гликолиз, пиридин- и флавинзависимые кофакторы и пр.). Такие условия наблюдаются чаще у непьющих людей.
Благодаря работе АДГ и АлДГ в клетках снижается концентрация НАД+. Тем самым нарушается целый ряд биохимических процессов в которых требуется НАД+. В каких процессах углеводного обмена расходуется НАД+? Аллостерическим регулятором каких ферментов является НАД+? Какие нарушения углеводного обмена развиваются под действием этанола?
Изменения каких биохимических показателей характерны после приема больших доз алкоголя? Поясните механизм развития этих изменений.
Ответы на вопросы для самоконтроля:
1.1. 2. 3. 4.
2.Г
3. B.
4. 2. 3. 5.
5. Б
6. 1. 2. 4.
7. 2. 4.
8. A
9. 3
10. Г
63
Занятие № 4 Тема занятия: Газохроматографический метод разделения, идентифи-
кации и количественного определения «Летучих ядов».
Цель занятия: Изучить принципы метода ГЖХ, его достоинства и недостатки, обнаружение и количественное определение веществ с использованием внутреннего стандарта.
Основные понятия: Определение алкоголя ферментативным методом, газожидкостная хроматография, коэффициент распределения, хроматограмма, элементы хроматограммы, время удерживания, удерживаемый объем, индексы удерживания, разрешение пиков, метод абсолютной калибровки и метод с использованием внутреннего стандарта, расчет по котангенсу, газ-носитель, подвижная и неподвижная фазы, катарометр, ПИД, ТИД, ДЭЗ, колонки, капиллярные колонки, инжектор с делением потока, образование алкилнитритов, порядок выхода спиртов из колонки, расчет содержания этанола в биожидкостях, судебно-химическая оценка результатов.
Вопросы, рассматриваемые на занятии:
1.Характеристика методов и методик предварительного определения спиртов. Методы, методики выполнения, судебно-химическое значение.
2.Биохимический метод количественного определения этанола (метод Бюхераи Родецки).
3.Теоретические предпосылки метода ГЖХ.Коэффициент распределения.
4.Основные элементы хроматограммы.
5.Основные хроматографические параметры.
6.Качественный анализ методом ГЖХ. ГХС-скрининг. Вычисление коэффициентов удерживания. Число теоретических тарелок.
7.Количественное определение методом ГЖХ. Метод абсолютной калибровки и метод внутреннего стандарта.
8.Аппаратурное оформление метода ГЖХ (газ-носитель, хроматографические колонки, наполнители колонок, детекторы – ПИД, ТИД, ДЭЗ).
64
9.Определение этанола методом ГЖХ.
10.Оценка результатовколичественного определения этанола в биожидкостях.
Вопросы для самоконтроля
1.Реакцией, позволяющей обнаружить изоамиловый спирт присутствии других спиртов (метилового, этилового), является реакция:
A. Этерификации; Б. Окисления;
B. Образования алкилнитрита;
Г. С ароматическими альдегидами; Д. Образования йодоформа.
2.Механизм разделения, лежащий в основе газожидкостной хроматографии: A. Распределение между газовой фазой и твердым сорбентом.
Б. Различная сорбционная способность веществ на пластинке
B. Распределение между жидкостью (под давлением) и твердой фазой Г. Распределение между газовой фазой и высококипящей жидкостью Д. Обмен ионами между веществом и сорбентом
3.ГЖХ по механизму разделения веществ является:
A. Адсорбционной Б. Распределительной B. Осадочной
Г. Ионообменной Д. Ситовой
4.В ГЖХ неподвижной фазой является: A. Силикагель
Б. Твердый носитель
B. Жидкость, нанесенная на твердый носитель Г. Газ Д. Пористый газ
5.Идентификацию веществ в методе ГЖХ проводят по:
1.По высоте пика на хроматограмме
65
