диссертации / 17

121

пы также выявлено отклонение от равновесия Харди-Вайнберга (HWE), обу-

словленное избытком гетерозигот (p=0,001).

Оксид азота, синтезируемый eNOS, оказывает мощное воздействие на реснитчатый эпителий бронхов, регулирует мукоцилиарный клиренс, участ-

вует в иммунной защите, участвует в регуляции тонуса сосудов и бронхов

[35, 134, 171].

В гене NOS3 проведен анализ мини-сателлитного полиморфизма, обу-

словленного варьирующим числом тандемных 27 п. н. повторов (VNTR) в 4

интроне; определялось два аллеля *4 и *5. Выявлена более высокая частота минорного аллеля *4 VNTR гена NOS3 в выборке агинских бурят, больных БА, по сравнению с контрольной группой (0,103 против 0,045; p=0,04);

ОШ =2,44; 95%ДИ [1,0–5,8]. Соотношение шансов для носителей генотипов

*4/4 и *4/5 гена NOS3 (VNTR) равно 2,72 (95%ДИ [1,1–7,0]; р=0,03), т.е. но-

сительство аллеля *4 VNTR гена NOS3 является маркером повышенного рис-

ка развития БА у подростков в изучаемой группе населения. Не установлено ассоциации данного полиморфизма с развитием БА у русских больных (табл.

30).

При изучении этнических особенностей распределения частот аллелей и генотипов показано, что среди больных БА частота минорного аллеля *4 у

русских подростков (0,236) выше, чем у бурят (0,103); частота аллеля *5 у

бурят (0,809) и русских (0,764) (р=0,01). Суммарная частота генотипов *4/4

+ *4/5 NOS3 (VNTR) у русских больных (0,472) также достоверно выше, чем у бурят (0,191) (р=0,005) (табл. 31).

Не выявлено достоверно значимых ассоциаций в частоте аллелей и ге-

нотипов полиморфизма VNTR гена NOS3 со степенью тяжести заболевания,

началом манифестации заболевания до 6 лет, повышенным уровнем IgE в

сыворотке крови у бурят и русских больных БА (р˃0,05).

122

Таблица 30. Частота аллелей и генотипов генов-кандидатов, ассоциированных с развитием бронхиальной астмы

у бурят и русских

123

124

125

делеционный полиморфизм гена GSTM1

Примечание: аллели гена NOS2 с числом повторов меньше одиннадцати - «короткие» аллели (S), аллели с числом повторов более двенадцати - «длинные» аллели (L) (выделены в таблице серым цветом)

126

Таблица 31. Значимые межэтнические различия в частотах аллелей и ге-

нотипов генов NOS3 (VNTR), GSDMB rs 2305480, FCER2 (T2206C), THOI

(STR) у больных бронхиальной астмой

127

Полученные нами данные у русских больных БА согласуются с данны-

ми литературы, не выявившими ассоциации гена NOS3 (VNTR) с развитием БА и уровнем IgE у британских и чешских больных [93, 190, 211]; с тяже-

стью заболевания [253].

Однако в ряде других исследований выявлена ассоциация БА с VNTR

полиморфизмом гена NOS3. Так, в работе Смирновой И.Ю. с соавторами

(2009) генотипы *4/4 и *4/5 встречались чаще при БА по сравнению с кон-

тролем и подверженность к болезни была выше у носителей этих генотипов

(ОР=2,89; 95%ДИ [1,2-7,1]; р=0,01; ОР=4,11; 95%ДИ [1,4-11,6]; р=0,007, со-

ответственно).

Продукт гена индуцибельной синтазы оксида азота регулирует ба-

ланс TH1/TH2, обладает противомикробной и цитотоксической активностью,

влияя на количество продуцируемого NO, поддерживает и усиливает воспа-

лительный процесс в дыхательных путях [134].

Аллели с восемью или девятью повторами CCTTT имеют более низкие уровни транскрипционной активности, чем аллели с 12-15 повторами. У ин-

дивидов – носителей аллелей с более низким числом повторов продуцируется меньше iNOS и, как следствие, вырабатывается меньше оксида азота II (NO),

чем у индивидов – носителей аллелей с более высоким числом повторов

[384].

При изучении микросателлитного полиморфизма (CCTTT)n в промо-

торной области гена NOS2А у бурят идентифицировано 11 аллелей с числом повторов CCTTT от *9 до *19 и 34 генотипа; у русских подростков – 9 алле-

лей от *10 до *18 и 22 генотипа. Ввиду большого числа установленных гено-

типов по гену NOS2A аллели с числом повторов меньше одиннадцати обо-

значены как «короткие» аллели (S), аллели с числом повторов более двена-

дцати как «длинные» аллели (L), а генотипы – соответственно как SS, SL, LL.

При рассмотрении каждого аллеля гена NO2А отдельно выявлена более низкая частота аллеля *11 в группе бурят-больных БА по сравнению с кон-

трольной группой (0,074 против 0,160; p=0,02; ОШ=0,42 [0,2–0,9]; рис. 7).

128

Однако, различий в частоте аллелей с низким и высоким числом повторов

(CCTTT)n, как и генотипов по гену NO2А между выборками больных и здо-

ровых бурят не установлено (табл. 30). Таким образом, ассоциация гена

NO2А с развитием БА у подростков бурятской национальности в настоящем исследовании не выявлена.

Рис. 7. Частота аллелей NO2А (CCTTT)n у бурят, больных бронхиальной аст-

мой и здоровых.

У больных БА и здоровых русских подростков выявлены статические различия в частоте аллелей S гена NOS2А (0,292 и 0,120, соответственно;

р=0,005, ОШ=3,02; 95%ДИ [1,4-6,6]). Отношение шансов для носителей ге-

нотипов S/S и S/L гена NOS2А (CCTTT)n равно 3,96 (95%ДИ [1,6–10,1];

р=0,003), т. е. носительство аллеля S, содержащего короткое число тандем-

ных повторов CCTTT в гене NOS2А, является маркером повышенного риска развития БА у русских подростков (рис. 8).

129

Рис. 8. Частота аллелей NO2А (CCTTT)n у русских, больных бронхиальной астмой и здоровых.

При анализе частоты каждого аллеля (CCTTT)n гена NO2А выявлено статистически достоверное различие в частотах аллеля *11 и *13 у русских подростков. Частота аллеля *11 выше у больных БА по сравнению со здоро-

выми (0,167 и 0,060, соответственно; p=0,024; ОШ=3,11; 95%ДИ [1,1–9,4]).

Частота аллеля *13 у больных оказалась ниже (0,139) по сравнению со здоро-

выми (0,300) (p=0,014; ОШ=0,38; 95%ДИ [0,2–0,8]) (рис. 8).

При сравнении выборок больных БА межэтнических различий в часто-

те аллелей и генотипов микросателлитного полиморфизма (CCTTT)n гена

NO2А отмечены различия лишь в частоте аллеля *11: у русских больных ал-

лель *11 встречался чаще (0,167) по сравнению с бурятами (0,074; р=0,04)

(табл. 31).

Не выявлено достоверно значимых ассоциаций в частоте аллелей и ге-

нотипов полиморфизма (CCTTT)n гена NO2А со степенью тяжести заболева-

ния, возрастом манифестации заболевания (до 6 лет), повышенным уровнем

IgE в сыворотке крови у бурят и русских больных БА (р˃0,05).

Полученные данные по отсутствию ассоциации развития БА с микро-

сателлитным полиморфизмом (CCTTT)n гена NO2А у бурят согласуются с

130

данными литературы. У китайских детей больных БА также не выявлено ас-

социации полиморфизма (CCTTT)n гена NO2А с БА, с уровнем сенсибилиза-

ции к аэроаллергенам и содержанием NO в выдыхаемом воздухе [258]. Ана-

логично у индийских детей не установлено ассоциации с БА и тяжестью за-

болевания [135]. У японских, китайских, английских, испанских и россий-

ских (из Томска и Башкоркостана) больных также ассоциация с БА не опре-

делена [89, 96, 190, 243, 258, 310].

По данным Смирновой И.Ю. с соавторами [2009] у российских детей с БА не установлено ассоциации (CCTTT)n NO2А с контролируемым течением заболевания на фоне лечения ИГКС. Но показано, что высокое содержание

IgE в сыворотке крови у больных БА ассоциировано с аллелем *14 гена

NO2А (р=0,02); раннее начало болезни (до 2 лет) характерно для пациентов с БА, имеющих гомозиготный генотип *14/*14 по гену NO2А (р=0,02); позд-

нее начало болезни (после 5 лет) чаще отмечается у пациентов, не являю-

щихся носителями аллеля *14 (р=0,04) [96].

Ген GSDMB кодирует гасдермин B, входящий в семейство белков с га-

сдерминовым доменом. Известно, что ген гасдермина В принимает участие в регуляции клеточной дифференциации, клеточного цикла и экспрессии генов цитокинов [293, 332]. Ввиду выявляемых ассоциаций активно ведутся иссле-

дования по изучению его роли в развитии БА.

Анализ однонуклеотидного полиморфизма rs7216389 гена GSDMB вы-

явил ассоциации данного ДНК-локуса с бронхиальной астмой у подростков

(агинских бурят и русских). Частота аллеля T полиморфизма rs7216389 у

подростков-бурят, страдающих БА, значительно выше (78,7%), чем в кон-

трольной группе (58,0%; p=0,00011) (табл. 30). Показатель отношения шан-

сов (ОШ) для аллеля T полиморфизма rs7216389 составил 2,66 (95%ДИ [1,6–

4,4]), для аллеля С – 0,38 (95%ДИ [0,2–0,6]). Гомозиготный генотип T/Т по полиморфизму rs7216389 гена GSDMB встречался в группе больных БА до-

стоверно чаще, чем в контроле (соответственно 0,662 и 0,230; p<0,0001). Но-

сительство гомозиготного генотипа T/Т полиморфизма rs7216389, очевидно,