Глава 9, Заметка 4. Провоцирование острого шока

Острый шок может быть вызван путем внутрибрюшных инъекций смесей конъюгированных жирных кислот. Применялся главным образом препарат - 10% раствор жира печени трески, конъюгированной путем обработки КОН в этиленгликоле или этиловом спирте, в масле жирной кислоты. Для крысы весом 200 г 8 см³ этого препарата, введенного путем одноразовой инъекции, было достаточно, что бы вызвать острый шок.

Глава 9, Заметка 5. Индукция состояния шока

Состояние шока вызывали повторным назначением смеси конъюгированных жирных кислот, полученных из жира печени трески. Чтобы быть уверенными в прогрессивной системной абсорбции, препарат вводили путем подкожной инъекции. Инъекция крысам 10 % раствора этих жирных кислот в жире в количестве 1 cм³ на 100 г веса тела, повторенная ежечасно, как было показано, вызывала через 3-5 повторений состояние шока. Добавление крысам 4% тиосульфата натрия в дозе 5 cм³ на 100 г веса тела, как было показано, способствовало появлению состояния шока.

Глава 9, Заметка 6. Влияние жирных кислот на травматический шок

Крысы весом 250 г помещались в барабан Collip-Noble Drum с приклеенными передними лапами и подвергались 500 падениям с частотой 40 в минуту. 50% умерли от острого шока менее чем через два часа. При внутриперитонеальной, или даже подкожной, инъекции 2 cм³ препарата жирных кислот, 10% масла печени трески на 100 г веса тела, за полчаса до помещения животных в барабан, более 50% животных погибали в течение самой травмы, и смертность в некоторых экспериментах приближалась к 100%. Кровотечение из носа и рта было темного цвета кровью и в меньшем количестве, чем у нелеченых животных. Если это же количество препарата жирных кислот вводилось животным непосредственно после извлечения их из барабана, это также увеличивало летальность в течение первых двух часов. У некоторых животных смерть наступила через несколько минут после инъекции.

Глава 9, Заметка 7. Влияние неомыляемых фракций на травматический шок

Влияние, оказываемое неомыляемыми фракциями на травматический шок становится очевидным у крыс, подвергнутых 5-700 падениям в барабане Collip-Noble. В этих экспериментах мы использовали 10% растворы неомыляемой фракции плаценты человека или коровы, яиц или сливочного масла в масле сезама. От 1 до 5 см³ этих растворов были введены путем внутрибрюшинной инъекции через разные интервалы до или после травмы. Инъекция 2 см³ за полчаса до травмы полностью предотвращала летальный шок (0/20) в группе экспериментов, где летальность контролей составила 18/20. Подобный результат был получен при инъекции 2-3 см³ препаратов непосредственно после того, как животные были освобождены из барабана. Дозы до 5 см³ препаратов, введенных путем инъекции через час после взятия животных из барабана, защитили только часть из них (11/20) и только из не имевших симптомов шока. При наличии симптомов шока эффект неомыляемых фракций был значительно уменьшен (от 2/20 до 5/20 в разных экспериментах.)

Глава 10, Заметка 1. Щавелевокислотный индекс

Необходимость получения количественной информации о числе двойных связей, присутствующих в организме, или в его жирных кислотах, привело нас к методу анализа, основанному на факте, согласно которому типичные компоненты предоставляются в результате расщепления молекул. При разделении, происходящем на уровне двойных связей, фракция, соответствующая конъюгированной двойной связи будет представлена щавелевая кислотой. Трудно было получить это разделение с карбоксилом, соответствующим каждому атому углерода, без искусственного провоцирования смещений двойной связи, что часто наблюдается в результате лечения.

Мы применили следующую методику. Жирные кислоты, полученные из организма, или любой другой препарат, нейтрализовали с помощью точно необходимого количества карбоната натрия. Это количество было установлено по индексу нейтрализации веществ, подлежащих воздействию. После достаточного разведения избыток карбоната натрия добавляли с целью получения щелочной среды. После доведения раствора до 4°C добавляли перманганат калия до тех пор, пока дальнейшее обесцвечивание перманганата прекращалось, после чего добавляли количество на 20% большее, чем уже применялось. Смесь оставляли в рефрижераторе при температуре 4°C в течение 16 часов, после чего избыток перманганата уменьшали дисульфидом натрия. Полученная жидкость была отфильтрована и преципитат отмыт. Жидкость была экстрагирована сначала эфиром для удаления жирных кислот, после чего она была подвергнута дистилляции с целью удаления летучих жирных кислот. В оставшейся части щавелевая кислота была преципитирована хлоридом кальция. Из преципитата, часть, соответствующая малонату кальция, была отделена от оксалата кальция путем использования разницы в растворимости при температуре кипения. Щавелевая кислота затем подвергалась титрованию обычным способом. Частное от деления количества щавелевой кислоты на количество использованных жирных кислот представляет собой Щавелевокислотный индекс препарата. Carlos Huesca Mejia и Daisy Franco провели широкие исследования изменений этого индекса щавелевой кислоты в наших лабораториях.

Чистые неконъюгированные жирные кислоты, обработанные подобным образом, не дают щавелевой кислоты. Когда линолевая кислота конъюгируется (т. е. путем обработки KOH в этиленгликоле) щавелевая кислота обнаруживается в продуктах деления в количествах, которые постепенно изменяются по мере продолжения воздействия. (таблица XXXIV)

ТАБЛИЦА XXXIV

КОЛИЧЕСТВО НАЛИЧНОЙ ЩАВЕЛЕВОЙ КИСЛОТЫ ПОСЛЕ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО РАСЩЕПЛЕНИЯ И ИОДНОЕ ЧИСЛО ПРОБ ЛИНОЛЕВОЙ КИСЛОТЫ, КОНЪЮГИРОВАНОЙ В РАЗНЫЕ ПЕРИОДЫ ВРЕМЕНИ. (ЛИНОЛЕВАЯ КИСЛОТА, СМЕШАННАЯ С РАВНЫМ КОЛИЧЕСТВОМ KOH: РАСТВОРЕННАЯ ДО 5% В ЭТИЛЕНГЛИКОЛЕ; ПРОДОЛЖАЮЩЕЕСЯ ЛЕЧЕНИЕ)

	Щавелевая кислота	Иод
Время	мг/г жирной кислоты	Количество
До лечения	0	180
Через 30 минут	117	119.8
Через 1 час	205	115.1
Через 2 часа	114.2	94
Через 4 часа	119.4	96
Через 8 часа	99.9	91
Через 12 часов	92	86
Через 24 часа	85	81.7
Через 36 часов	80	76
Через 48 часов	77.3	76.5
Через 144 часа	40.8	57.3

Подверглась исследованию количественная связь между известными пропорциями конъюгированных жирных кислот и щавелевой кислотой, полученная путем изучения их окислительного расщепления.

Было обнаружено влияние аутолитических изменений на происхождение жирных кислот, экстрагированных из тканей. Исследования показали, что связывание формалина не меняет значительно присутствующие жирные кислоты. (ТАБЛИЦА XXXV)

Уже отмечалось, что для конъюгации жирных кислот нормальных тканей необходимы относительно более сильные методы конъюгации, использующие KOH в более высокой концентрации и более высокой температуре, чем нужны для жирных кислот, экстрагированных из патологических тканей (ожог, шок, адреналэктомия, некроз опухоли), которые могут быть конъюгированы много более слабыми процедурами.

682 / RESEARCH IN PHYSIOPATHOLOGY

таблица XXXV

Влияние формалина на количество щавелевой кислоты, полученной путем окислительного расщепления смеси конъюгированных жирных кислот. (Смесь конъюгированных жирных кислот, кратная количеству 5 см³, перемешивалась в стопперном цилиндре с 10 см³ 20% раствора формальдегида. Цилиндр встряхивали и пробы отбирались с частыми интервалами для определения щавелевой кислоты.)

Время	мг щавелевой кислоты/г жирных кислот
Перед перемешиванием	121.7
Через 1 час	121.8
Через 24 часа	120.5
Через 48 часов	120.9
Через 72 часа	118.9
Через 144 часа	121.9