Глава 9, Заметка 2. Липиды и эритроцитарные столбики, формирование осадка

Кровь человека, полученная путем венепункции, смешивалась в шприце (1/10 его объема 1.5% раствора цитрата натрия), проводилась через несколько центрифужных пробирок и подвергалась разделению на плазму и клетки. Плазма из разных центрифужных пробирок помещалась в отдельные тестовые трубки. Один из этих образцов плазмы обрабатывался смесью конъюгированных жирных кислот жира печени трески, другой - жирокислотным препаратом из плаценты человека, а третий - препаратом неомыляемой фракции плаценты человека. В качестве контроля, плазма обрабатывалась жидким парафином. Смеси, часто встряхиваемые, содержались на теплой бане при температуре 37°C в течение одного часа, после чего они подвергались центрифугированию, и маслянистый препарат отделялся. Плазма, обработанная жирными кислотами, добавлялась затем к образцам необработанной плазмы в пропорции 1/10, которые затем воссоединялись со своими клетками красной крови. Плазма, обработанная неомыляемой фракцией, непосредственно смешивалась со своими клетками красной крови. Плазма и клетки красной крови встряхивались в течение пяти минут и оставлялись при комнатной температуре еще в течение десяти минут. Одна маленькая капля этой крови, полученная платиновой петлей или капиллярной пипеткой, смешивалась с двумя каплями физиологического раствора, помещалась на стекло, покрытое покровным стеклом, и изучалась под микроскопом. В то время как в контролях обнаруживалось несколько невысоких столбиков эритроцитов, в крови, обработанной неомыляемой фракцией, наблюдались разрозненные клетки. В крови, обработанной плацентарными жирными кислотами, почти все эритроциты образовывали столбики; в крови, обработанной жирными кислотами, почти все клетки формировали взвесь.

Глава 9, Заметка 3. Темный цвет крови при шоке

Были предприняты следующие эксперименты для выяснения причины темного окрашивания крови при шоке и роли жирных кислот

Венозная кровь пациентов, находящихся в состоянии тяжелого шока, забиралась и смешивалась с цитратным раствором (1/10 ее объема). Определялась величина гематокрита, добавлялся физиологический раствор для доведения его до величины, свойственной нормальной крови. Через указанные образцы крови в течение 5 минут пропускали кислород в количестве 50 см³ за минуту. В то же время, получалась кровь от нормальных субъектов и обрабатывалась подобным образом. Сравнивались изменения цвета двух образцов после прекращения оксигенации. В то время как для нормальной крови требовалось почти десять минут для возвращения своего предшествующего цвета, кровь пациента, страдающего шоком, возвращала себе интенсивно темный цвет менее чем через три минуты.

Кровь, полученная у больных с шоком, обрабатывалась in vitro неомыляемыми фракциями, а затем в течение 5 минут кислородом, в количестве 50 см³ за минуту. Поскольку цвет немедленно становился красным, время, необходимое для возврата цвета к прежнему, темному, совершенно отличалось от такового для контролей. Для контролей требовалось несколько минут, а для крови, обработанной неомыляемой фракцией - более 12 минут. Из указанных экспериментов следует, что темный цвет крови при шоке является результатом изменений в эритроцитах, а не следствием нарушенной циркуляции, и что эти изменения могут быть связаны с влиянием жирных кислот. Это было подтверждено фактом, согласно которому темная кровь пациентов, находящихся в состоянии шока, при ее обработке vitro неомыляемыми фракциями плаценты, к примеру, утрачивала свой характерный цвет.