14. Стрептококки. Морфология, культивирование, ферментативные свойства. Антигенная структура. Патогенез. Микробиологическая диагностика.

Патогенные стрептококки – возбудители гнойно-воспалительных процессов различной локализации (мыт лошадей, маститы у животных, стрептококковая септицемия птиц, кроликов, стрептококковый полиартрит), а также смешанных и вторичных инфекций (абсцесс, фурункул, нефрит, пиемия, сепсис и др.).

Фекальные стрептококки могут вызвать воспаление кишечника и мочеполовых путей.

Пищевые токсикозы (токсикоинфекции).

Классификация возбудителей:

Сем. Streptococcaceae

Род. Streptococсus, включает 17 серологических групп

Виды.

Str.pyogenes (гнойно-воспалительный процессые)

Str. Ebui (мыт у лошадей)

Str. Agalactiiae (мастит)

Str. Disgaiactiae (стрептококковый полиартрит ягнят)

Str. Sooepidemicus (стрептококковая септицемия птиц)

Патогенез и факторы вирулентности:

многие патогенные стрептококки относятся к нормальной микрофлоре кожи и слизистых оболочек и проявляют свою патогенность при снижении общей резистентности;

образуют экзотоксины – гемолизин, лейкоцидин, летальный некротоксин;

продуцируют ферменты – гиалуронидаза, фибринолизин, ДНК-азу, РНК-азу, нейрамидазу и др;

образуют термостабильные эндотоксины.

Методы диагностики

Бактериологический метод:

материал для исследования:

при жизни – гной, молоко, кровь, кал;

посмертно – пораженные органы.

микроскопия:

методы окраски:

простой метод по Граму;

микрокартина:

шаровидные клетки до 1 мкм, располагающиеся в короткие и длинные цепочки;

грамположительные;

спор не образуют;

капсулу не образуют;

неподвижны.

культивирование:

посев на питательные среды:

МПА и МПБ, с сывороткой крови, с сахаром, с кровью;

особенности выделения возбудителя:

факультативные анаэробы;

оптимальная температура 37oС;

срок культивирования 18-20 часов;

культуральные свойства:

на плотных средах – мелкие, прозрачные с ровным краем колонии;

на жидких средах – незначительное помутнение, крошковидный осадок.

биохимические свойства:

ферментируют углеводы – глюкозу, сахарозу и др. (без газа);

не обладает протеолитическими свойствами;

на кровяном МПА вызывают гемолиз.

биопроба:

заражают подкожно белых мышей, кроликов.

Серологические методы:

применяют реакцию преципитации для типизации выделенных культур.

орфология стрептококков- это неподвижные шаровидные или овальные кокки диаметром 0,8-1 мкм, образующие цепочки различной длины и положительно окрашиваются по Граму. Часть штаммов образует капсулу. Длина цепочек связана с условиями выращивания. В жидкой питательной среде они длиннее, на плотных средах нередко расположены в виде коротких цепей и пучков. Кокки перед делением могут быть овоидными. Деление происходит перпендикулярно по отношению к цепи. Каждый кокк делится на 2.

Биология стрептококков: культуральные свойства. На агаре с кровью стрептококк образует мелкие (1-2 мм в диаметре) полупрозрачные палочки, сероватые или бесцветные, которые хорошо снимаются петлей. Величина зоны гемолиза варьирует у разных штаммов: группа А образует зону гемолиза несколько превышающую диаметр колонии, группа B дают большую зону гемолиза. Стрептококки типа А образуют зеленоватую или зеленовато-коричневую зону гемолиза, мутноватую или прозрачную, варьирующую по величине и интенсивности окраски. В некоторых случая сама колония приобретает зеленоватое окрашивание. В жидких питательных средах для стрептококков характерен придонный часто поднимающийся по стенкам рост. При взбалтывании зернистая или хлопьевидная взвесь. Общепринятые среды для выращивания: мясопептонный агар с добавлением крови кролика или барана, полужидкий агар с сывороткой.

Хороший рост и токсинообразование могут быть обеспечены на "комбинированном бульоне" или на средах, содержащих казеиновый гидролизат и дрожжевой экстракт. Гемолитические стрептококки метаболизируют глюкозу с образованием молочной и других кислот, что является фактором, лимитирующим рост микробов в питательной среде. Устойчивость к физическим химическим факторам.

Гемолитические стрептококки группы А в течении длительного времени могут сохраняться на предметах, в пыли в высушенном состоянии. Однако эти культуры, сохраняя жизнеспособность, утрачивают вирулентность.

Стрептококк группы А высокочувствителен к пенициллину, который оказывает на него бактерицидное действие. Сульфаниламид действует на стрептококк А бактериостатически.

Для бактериологического исследования материал, собранный тампоном со слизистой зева и носа, засевают на чашку Петри с кровяным агаром, ставят в термостат на 3-4 ч при 37°С. При наличии стрептококков через сутки на агаре вырастают характерные палочки. Для микроскопического исследования изолированную колонию пересевают в жидкую питательную среду (мясопептонный бульон с сывороткой) и через 24 ч выращивания в термостате подвергают исследованию. Мазки окрашивают по Граму или метиленовым синим по Леффлеру. Затем изучают биохимические свойства культур и определяют тип стрептококка с помощью реакции агглютинации на стекле и реакции преципитации с типовыми сыворотками. Из серологических реакций применяют реакцию связывания комплемента (РСК) с сывороткой иммунизированного кролика.

15. Возбудитель мастита. Морфология, культивирование, биохимические свойства, факторы патогенности. Патогенез. Микробиологическая диагностика. Иммунитет. Биопрепараты.

Мастит- Str. Agalactiae

В лабораторию – молоко, гной из абсцессов, гнойные выделения из пораженных частей вымени.

Гр +, сп —, кп —, двж—.

Мелкий кок, цепи до 100 шт, извитые.

Аэроб

кров. МПА -  -выявление скрытой гемолитич акт-ти

МПБ, МПА с глюкозой

Биохим ;

желатина –

молоко –

лактоза +

глюкозу, лактозу, сахарозу, мальтозу, салицин до к-ты, камп-метод на кровяном агаре с β-гемолитическим стафилакокком, рядом доп. Гемолиз стрептококка. Среда Гиса с цветным рядом.

Биопроба – морск свинку внутрибрюшинно 0,3-0,5мл, гибель через 24-48 часов.

Препп:Мастицит, мастит-форте, синтомициновая и ихтиоловая мази, мазь Вишневского, бактериофаги.

Имм: Непрод, слаб, нестерильный

Факт пат: гемолизин, лейкоцидин, летальный, некротоксин, ферменты, тстаб эндотокс

Леч: А/б, с/а