12. Применение экспериментальных животных в микробиологии.

1. Используют:

1)для обнаружения вируса в ПМ

2)первичного выделения вируса из ПМ

3)накопления вирусной массы

4)поддержания вируса в лабе в активном сост.

5)титровании вируса

6)в качестве тест-объекта в РН

6)получение гипериммунных сывороток.

Использ. жив.: белые мыши, белые крысы, Мор. свинки Кролики

13. Стафилококки. Морфология, культивирование свойства. Факторы патогенности. Патогенез. Микробиологическая диагностика. Иммунитет. Биопрепараты.

Патогенные стафилококки - вызывает гнойно-воспалительные процессы различной локализации: местные – фу-рункулы, абсцессы и др.; в отдельных органах – маститы, эндометриты и др.; общее поражение – пиемия и септицемия.

пищевые токсикозы (токсикоинфекции)

Классификация:

род: Staphylococcus

виды:

S.aureus - наиболее патогенный

S.epidermidis – наименее патогенный

S.saprophyticus – очень редко вызывает болезни.

Восприимчивы все виды животных, включая человека и птиц.

АГ : пептидогликан, тейхоевые к-ты, протеин A

Патогенез и факторы вирулентности:

проникает в организм через поврежденную кожу и слизистые оболочки;

энтеротоксины – с пищевыми продуктами (мясо, молоко и др.);

образуют и выделяют экзотоксины: гематоксин, лейкоцидин, энтеротоксин, некротоксин;

образуют и выделяют ферменты: коагулазу, фибринолизин, гиалуронидазу, ДНК-азу.

Методы диагностики

Бактериологический метод:

материал для исследования:

раневой экссудат, гной абсцессов, ран, молоко при маститах, выделение из половых органов при эндометритах, кровь при септицемии;

микроскопия:

методы окраски:

простой метод и по Граму;

микрокартина:

шаровидные клетки располагаются беспорядочно, диаметр 0,5-1,5 мкм;

грамположительные;

спор не образуют;

капсулу не образуют.

культивирование:

посев на питательные среды:

МПА, МПБ, МПА с 15% хлорида натрия, кровяной МПА.

особенности выделения чистой культуры:

факультативные анаэробы;

оптимальная температура 370C;

срок культивирования 18-20 часов.

культуральные свойства:

на МПА – колонии округлые, диаметром 2-5 мм, с ровным краем, могут быть окрашены в золотистый цвет (S.aureus), белый (S. epidermidis), лимонно-желтый (S.saprophyticus).

на жидких средах: на МПБ – равномерное помутнение с выпадением рыхлого хлопьевидного осадка.

биохимические свойства (ферментативная активность):

ферментация маннита без газа (в анаэробных условиях);

гемолиз на кровяных средах;

ДНК – азная активность;

Рост на элективных средах;

Плазмокоагуляция.

Биопроба для определения свойств:

летальных – на кроликах;

дерматонекротических – на кроликах;

токсических – на котятах

Серологическая и аллергическая диагностика:

в ветеринарии не используется

Антигенное строение; серотины; фаготипы

Патогенные и непатогенные стафилококки могут быть также дифференцированы с помощью реакции адсорбации. С помощью адсорбированных сывороток пиогенные стафилококки были разделены на 7 специфических типов и 8 типов с менее специфическими реакциями. Большое значение имеет метод фаготипажа стафилококков. С помощью специфических стафилококковых фагов стафилококки отнесены к различным фаготипам.

Метод фаготипирования позволяет выявить патогенность штаммов стафилококка. Для фагодиагностики стафилококков с помощью специфического фага, применяются фаги, принадлежащие к пяти группам. Основными фагами удается пикетировать до 60 % выделяемых бактерий, процент пикетируемых фагами стафилококков достигает 73,7 %.

По степени патогенности и токсичности стафилококки могут быть разделены на 3 группы:

стафилококки первой группы дают значительный гемолиз на 5 % кровяном агаре с кровью кролика и барана в течение 1 - 2 ч. Стафилококков этой группы выделяют при фурункулезе, гидраденитах, остеомиелитах, флегмонах, сепсисе и при ряде других гнойных заболеваниях. Стафилококки, принадлежащие к первой группе считаются патогенными;

стафилококки второй группы вызывают незначительный гемолиз на 5 % кровяном агаре с кровью кролика и барана. Они считаются условно патогенными. Они встречаются часто на открытых поверхностях кожи, при фолликулитах, иногда на поверхности ран;

стафилококки третьей группы не вызывают гемолиза на 5 % кровяном агаре с кровью кролика или барана. Эти стафилококки следует считать сапрофитами, их часто выделяют с поверхности здоровой кожи, а также с различных предметов.

Для выделения стафилококков производят посев на чашку Петри с молочно-солевым агаром. Одновременно засевают чашки с 5 % кровяным агаром с кровью кролика или барана. Через 18 - 20 ч инкубации при 37 °С выросшие на чашках колонии микроскопируют, делают мазок и окрашивают по Граму. Колонии стафилококков затем пересевают на пробирки с питательной средой и помещают в термостат при 37 °С. Через 12 - 18 ч роста после микроскопирования мазков из выросшей культуры, окрашенных по Граму, ставят реакцию плазмокоагуляции, а из оставшейся культуры готовят взвесь и вводят кролику внутрикожно. Реакцию учитывают через 24 - 48 ч (появление некроза).