chebanov_m_s_galich_e_v_rukovodstvo_po_iskusstv
.pdf
60
МГК на основе изменений концентрации плазмы в стероидных половых гормонах и содержания жира. Согласно полученным результатам, метод ИК-Фурье может быть полезным инструментом оценки зрелости ооцитов у искусственно выращиваемых осетровых и сократит необходимость применения инвазивного метода биопсии для определения коэффициента поляризации (КП). Таким образом, согласно предварительным результатам, спектральный анализ плазмы с помощью ФП-ИС может быть использован вместо биопсии и расчета индекса поляризации ооцитов (Раздел 4.4.2.1).
Какуказановыше,данныйметодтребует,чтобывовремявзятияобразцов крови вся рыба было помечена. После получения результатов анализов, рыба должна быть повторно выловлена для отделения самок и самцов. Данная процедура требует больших трудозатрат и часто приводит к ошибкам во время мечения.
4.2.3.6 Коротковолноваяспектроскопиявближнейинфракраснойобласти
В последних исследованиях M. Вэбб и др. (Webb et al., 2009) и Лу и др. (Lu et al.,2010)былиописаныпотенциальныевозможностиметодакоротковолновой спектроскопиивближнейинфракраснойобласти(КВС-БИК)приопределении стадий зрелости осетровых с помощью спектров гонад. При проведении исследований на живых анестезированных особях белого осетра, датчик помещался на брюшную полость и перемещался на участках локализации яичника (Рисунок 45).
Рисунок45:Получениеспектровгонадбелогоосетраспомощьюнеинвазивного метода коротковолновой спектроскопии в ближней инфракрасной области
(Webb et al., 2009).
61
Спектры были получены с помощью спектрофотометра ProSpectra, оснащенного лампами с вольфрамовыми нитями и одним световодным жгутом. Получение спектров производилось в режиме рассеянного отражения волновом диапазоне от 600 до 1100 нм. Перед получением спектра образца, должны быть получены темный и стандартный спектры (Webb et al., 2009; Lu et al., 2010).Для сравнительного спектрального анализа, при взятии проб, у каждой самки хирургическим путем брали образец икры 30 см3 и помещали в тефлоновый контейнер для получения спектра (Рисунок 46).
Рисунок 46: Подготовка к КВС-БИК анализу образцов икры белого осетра
(Webb et al., 2009).
Согласно предварительным результатам (Webb et al., 2009; Lu et al., 2010), абдоминальные сканы, полученные с помощью КВС-БИК, могут быть эффективно использованы с помощью метода главных компонент для определения стадий половой зрелости самок осетровых, а также для диагностики атрезии фолликул.
4.2.3.7. Морфометрия
Метод морфометрии урогенитальной области описан в работах (Fuji et al., 1987 по Billard, 2002). Обнаружены отдельные морфометрические различия дляпоказателяЕвурогенитальнойобластимеждусамкамиисамцамибестера (гибрид H. Huso x A. ruthenus) (в возрасте от 3 лет). Основные отличия как видно из Рисунка 47 достоверны для показателя Е.
62
Рисунок 47: Метод морфометрии урогенитальной области (Fuji et al., 1987 по
Billard, 2002).
Вместе с тем, очевидно, что точность определения показателя Е, зависит от угла измерения, что существенно снижает возможность практического применения этого метода.
Возможностьраннегоопределенияполасиспользованиембиометрических методов показана на примере A. ruthenus (Рисунок 48) и A. gueldenstaedtii из маточного стада ЮФ ФСГЦР (Краснодар, Россия) (Мальцев, Меркулов, 2006). С помощью этого метода получены коэффициенты дискриминантного уравнения, позволяющего достаточно легко определить пол осетровых на основе краниологических измерений.
D2 = a + b1X1 + b2X2 + … + bpXp
где , D2 – оценка выборочного расстояния Махалонобиса; a– константа;
b1…bp – нестандартизированые коэффициенты; X1…Xp – переменные; p – число переменных.
63
Установлены наиболее информативные краниологические показатели осетровых (применяемые в уравнении).
Рисунок48:СхемакраниологическихизмеренийA. Ruthenus(МальцевиМеркулов, 2006).
Дискриминантное уравнение для определения пола A. gueldenstaedtii (формула приведена с исправлением опечатки, допущенной в вышеуказанной статье Мальцева и Меркулова):
D2 = - 36,7303 – 0,696098 I + 0,193362 Q + 101,344 I/Q + 12,5249 E/H
Однако, морфометрические методы не были разработаны в полной мере и их использование носит пока только экспериментальный характер. Поэтому, несмотря на простоту применения, они не могут быть рекомендованы для широкого использования в рыбоводной практике.
4.2.3.8. Выявление отдельных признаков полового диморфизма у взрослых рыб
Как и для других видов рыб, для осетровых неоднократно предпринимались попытки установить внешние половые признаки, но удалось это, частично только для взрослых особей. В практике осетроводства долгие годы использовали следующие морфологические критерии для отбора диких зрелых самок на осетровые заводы(Мильштейн, 1982):
•самки, близкие к овуляции, имеют тонкую тёшку (у менее зрелых рыб она более толстая и жирная);
•хвостовой стебель от заднего края спинного плавника до начала хвостового плавника имеет в поперечнике овальную форму, указывающую на похудение рыбы;
•рыло заострено за счёт похудения головы и всего тела;
•жучки менее острые, так как у самок, близких к овуляции, кожа больше покрыта густой слизью.
64
Впервые Владиковым (Vladikov, 1931) было отмечено, что парные плавники у самок стерляди длиннее, чем у самцов. Бийар (Billard, 2002) отмечает, что брюшная часть самцов адриатического (A. naccarii), сибирского
(A. baerii) и русского (A. gueldenstaedtii) осетров и белуги (H. huso) темнее,
чем у самок. Жучки (вентральные и анальные) самок зрелого белого осетра (A. transmontanus) становятся мягкими, вследствие минерализации в период вителлогенеза.
Сравнительный морфологический анализ взрослых особей североамериканских осетровых: белого A. transmontanus, атлантического A. oxyrinchus и короткорылого A. brevirostrum позволил установить некоторые внешние половые отличия (Vesceietal., 2003). Например, урогенитальное отверстие самцов напоминает латинскую букву «Y», в то время как половое отверстие самок имеет форму буквы «O» (Рисунок 49). Установлено, что точность половых различий по этому признаку была значительно выше у живых рыб (82%), чем у погибших (29%). Как и в случае других видов рыб, неоднократно предпринимались попытки выявить внешние признаки для осетровых, однако при определении пола у взрослых осетровых рыб были достигнуты лишь частичные успехи.
Рисунок 49: Различия формы урогенитального отверстия: А – самец, Б – самка (Vescei et al., 2003).
Половой диморфизм по форме и строению парных плавников, характерный для многих костистых рыб был установлен Подушкой (2008б) у производителей амурского осетра (A. schrenkii) выращенных в аквакультуре. Как видно из рисунка, более короткие и округлые грудные плавники наблюдаются у зрелых самок (Рисунок 50 A), а плавники самцов, отличаются большим размером и заострённой формой (Рисунок 50 Б). Эти различия, как отмечает автор, наблюдаются у домашних особей амурского осетра даже
65
со спины у рыб, плавающих в бассейне. Подобные различия отмечены и в строениибрюшныхплавниковпроизводителейэтоговида.Однаконеизвестно, связано ли проявление этого признака только с началом полового созревания амурского осетра или подобные различия имеются также у неполовозрелых особей. Не установлены также подобные различия и для дикого амурского осетра (Подушка, 2008б).
Рисунок 50: Форма грудных плавников домашних особей амурского осетра: А – самка, Б – самец (Подушка, 2008б).
Рассмотренные выше преимущества и недостатки различных методов определения пола и стадий зрелости гонад, должны учитываться при планировании и проведении осенней бонитировки осетровых рыб. Вместе с тем, многолетний опыт формирования маточных стад различных видов осетровых рыб показывает, что наиболее эффективным методом является неинвазионная ультразвуковая экспресс-диагностика (Chebanov and Galich, 2009). Детальное описание данного метода дано в Главе 14.
4.2.4. Документирование результатов бонитировки
В процессе бонитировки в каждой возрастной группе рыб определяют среднюю длину и массу рыб, оценивают их упитанность и физиологическое состояние. По итогам бонитировки рыб разделяют на группы по полу, стадиям зрелости гонад, при необходимости метят групповыми или индивидуальными метками и размещают в зимовальных водоемах. Рыб отобранных для участия
впредстоящей нерестовой кампании содержат в период зимовки отдельно.
Втечение всего периода бонитировки ведут рабочий журнал, в который записывают следующую информацию:
•наименование производственного участка;
•дата проведения операций с рыбой;
•вид и возраст рыбы, с которой производятся операции;
•производственныеномерабассейнов(водоемов,вкоторыхсодержится данная рыба);
•содержание операции;
•сведения о групповом мечении рыб.
66
По итогам проведения бонитировки составляются следующие отчетные документы: акты перемещения рыб между производственными участками, акты зарыбления водоемов (пруды, бассейны, лотки), бонитировочные ведомости.
4.3. Зимовка прОИЗВОДИТЕЛЕЙ 4.3.1. Условия проведения зимовки
Зимовка –содержание рыб при низкой (2–6оС) температуре в течение 2-3 месяцев. Данный элемент биотехники является обязательным при работе со всеми производителями осетровых, как с отловленными в естественных водоемах в период осенней заготовки, так и при использовании рыб из маточного стада. Зарыбление зимовальных водоемов проводят при среднесуточной температуре воды не выше 8оС.
Оптимальныйтемпературныйинтервалсодержаниярыбвовремязимовки составляет 4–5оС. При этом допускаются кратковременное повышение температуры до 7оС и её понижение до 2оС. Длительное пребывание рыбы за границами указанного оптимального интервала температур приводит к ухудшению физиологического состояния рыбы и, как следствие, к снижению качества половых продуктов.
4.3.2 Требования к зимовальным водоемам
В зимовальных водоемах (Рисунок 51) необходимо поддерживать постоянный расход воды, обеспечивающий 80–100% насыщения воды кислородом. Содержание кислорода менее чем 60% насыщения недопустимо.
Рисунок 51: Зимовальные пруды для маточного стада, выращиваемого в искусственных условиях.
67
Для проведения зимовки можно использовать пластиковые или бетонные бассейны и сетчатые садки, объемом более 40 м3 и глубиной не менее 1,5 м, а также садки куринского типа, длиной – 105 м и шириной – 17 м, или проточные бетонированные или земляные пруды площадью 1 000 – 4 000 м2, которые могут быть разделены на секции сетчатыми перегородками для содержания рыб разного вида и пола (Рисунок 52). В зимовальных водоемах должен быть обеспечен постоянный водообмен, с полной заменой воды в течение 8–10 суток.
Рисунок52: Бетонированныеразделённыепрудыдлязимовкиивыдерживания производителей с секциями для раздельного содержания.
4.3.3 Плотность посадки производителей на зимовку
Плотность посадки производителей на зимовку зависит от вида рыб:
-русский осетр – 20–25 кг/м3;
-севрюга – 20 кг/м3;
-белуга – 25–30 кг/м3.
Втечение всего периода зимовки в водоемах необходимо поддерживать оптимальные водообмен и проточность, постоянно осуществлять контроль за санитарным (накопление взвесей и пр.) и гидрохимическим (содержание кислорода, окислов железа, аммиака, окисляемость, pH) режимами в водоемах. Также, по возможности, необходимо контролировать состояние и поведение рыб. Кормление производителей осетровых рыб в период зимовки не производится, что является важным условием эффективного завершения дозревания гонад.
68
При получении половых продуктов в осенне-зимний период и ранней весной (до начала основного нерестового сезона) перевод на зимовальный режим и вывод из него производится искусственно. При этом следует придерживаться следующих рекомендаций (Chebanov, 1996б):
•перевод в режим зимовальных температур должен производиться постепенно с температурным градиентом 1–2оС в сутки – для самок и 2–3оС – для самцов;
•рыб с поврежденными кожными покровами следует содержать при температуре 8-10оС до полного выздоровления и только после этого понижать температуру;
•перевод в нерестовый режим должен быть постепенным: с суточным градиентом при повышении температуры не более 1,5оС и 2–3оС – для самок и самцов соответственно, с периодами содержания при постоянной температуре.
4.4Весенняя бОНИТИРОВКА
4.4.1 Отбор зрелых самцов
Если рыба содержится при естественной температуре, то весенняя бонитировка проводится до наступления нерестовых температур. Для использования в нерестовой кампании в процессе бонитировки отбирают только производителей, гонады которых достигли IV стадии зрелости.
При отборе зрелых самцов наиболее эффективен метод УЗИ-диагностики.
Зрелых самцов можно отбирать по внешним признакам. В выращенных маточных стадах у большинства видов (кроме севрюги и белуги) созревшие самцы имеют выраженный «брачный наряд» (Рисунок 53),
69
Рисунок 53: «Брачный наряд» самцов различных видов осетровых рыб: А – русский осетр; Б – сибирский осетр; В – шип; Г – стерлядь.
4.4.2 Отбор зрелых самок
Во время весенней бонитировки степень готовности к нересту самок, отобранных осенью, определяют с использованием метода биопсии гонад по значениям коэффициента поляризации ооцитов (Рисунок 54).
Рисунок 54: Биопсия гонад: А- русского осетра с боковой стороны, Б - атлантического осетра с брюшной стороны.
Во время бонитировки, самок, гонады которых не достигли за период зимовки IV стадии зрелости гонад, а также самок с резорбцией ооцитов, отбраковывают и отсаживают на нагул.