2 курс / Гистология / РУКОВОДСТВО_ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ_ММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ_МЕТОДЫ
.pdf
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ
МЕТОДЫ
George L. Kumar,
Lars Rudbeck
Перевод с английского под редакцией Г.А.Франка и П.Г.Малькова
Corporate Headquarters |
Australia |
Finland |
Japan |
Spain |
|||||
Denmark |
+61 |
3 9357 0892 |
+358 9 348 73 950 |
+81 |
3 5802 7211 |
+34 |
93 499 05 06 |
||
+45 44 85 95 00 |
Austria |
France |
The Nitherlands |
Sweden |
|||||
|
|||||||||
|
+43 |
1 408 4334 50 |
+33 |
1 30 50 00 50 |
+31 |
20 42 11 100 |
+46 |
556 20 600 |
|
|
Belgium |
Germany |
Norway |
Switzerland |
|||||
|
+32 |
(0) 16 38 72 20 |
+49 |
40 69 69 470 |
+47 |
23 14 05 40 |
+41 |
41 760 11 66 |
|
www.dako.com |
Canada |
Ireland |
Poland |
United Kingdom |
|||||
+1 905 858 8510 |
+353 1 479 0568 |
+48 |
58 661 1879 |
+44 |
(0)1 353 66 99 11 |
||||
|
|||||||||
Distributors in more |
Denmark |
Italy |
|
Russia |
United States of America |
||||
than 50 countries |
+45 |
44 85 97 56 |
+39 |
02 58 078 1 |
+7 495 9213578 |
+1 805 566 6655 |
|||
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
РУКОВОДСТВО
Edited by
George L. Kumar, Lars Rudbeck
Русское издание под редакцией
Г.А.Франка и П.Г.Малькова
Москва, 2011
УДК 616-091.3; 616-93; 616-71 ББК 28.3
Ф82
Ф82 Иммуногистохимические методы: Руководство / Ed. by George L. Kumar, Lars Rudbeck.: DAKO / Пер. с англ. под ред. Г.А.Франка и П.Г.Малькова. – М., 2011. – 224 с.
Издание предназначено для специалистов в области гистологической технологии и микро-
скопической техники, врачей-патологоанатомов. Может быть использовано в качестве учеб-
ного пособия для подготовки лаборантов патоморфологических лабораторий, ординаторов и
аспирантов.
ISBN 978-5-91366-295-8
Разрешено к изданию Dako North America Inc. (Carpinteria, CA USA) Издано при поддержке ЗАО АМТЕО-М (Москва, Россия)
научный редактор – Г.А.Франк общая редакция – П.Г. Мальков
редакторы перевода – Ю.Ю. Андреева, Л.Э.Завалишина перевод – Н.В.Данилова, Л.В. Москвина, Н.М.Гайфуллин
ISBN 978-5-91366-295-8
©Dako North America Inc., 2009.
©Г.А.Франк, П.Г.Мальков, Ю.Ю. Андреева, Л.Э.Завалишина, Н.В.Данилова, Л.В.Москвина, Н.М.Гайфуллин, 2011 (перевод на русский язык).
Оглавление
Предисловие к английскому изданию |
11 |
Предисловие к русскому изданию |
12 |
Обозначения |
14 |
Глава 1 | Антитела |
15 |
Thomas Boenisch MS |
|
Иммуноглобулины | IgG | IgM | поликлональные антитела | сравнение поликлональных и моноклональных антител | аффинность антител | перекрестная реактивность антител | скорости реакции антител | стабильность антител | обращение с антителами | получение | хранение |
контейнеры для хранения; температура хранения | использование и уход.
Глава 2 | Основы иммунохимии |
29 |
Thomas Boenisch MS
Титр антител | разведение антител | инкубация антител | время инкубации | температура инкубации.
Глава 3 | Основы энзимологии |
33 |
Thomas Boenisch MS
Ферменты | рекомендуемые процедуры для реактивов субстрат-хромоген.
Глава 4 | Стандартизация иммуногистохимических методов |
40 |
Clive R. Taylor MD, Dphll, FRCPath, FRCP (Ir)
Введение и история вопроса: возрастающее единодушие в вопросе стандартизации | готовые к использованию (RTU) реагенты | валидация качества реагента | первичные антитела, выбор, валидация и оптимизация | вторичные реагенты или реагенты для мечения: протоколы | контроли |
воздействие RTU реагентов на другие аспекты общего исследования | резюме.
Глава 5 | Фиксация и проводка материала |
53 |
A.J. Farmilo PhD, Ronald H. Stead PhD
Фиксация | манипуляции с образцами | фиксирующие реагенты на основе спирта | специализированная подготовка ткани | проводка ткани и стекол | детализованный протокол депарафинирование.
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ | 3
Оглавление
Глава 6 | Идентификация ткани при иммуногистохимии |
60 |
James F. Happel DLM (ASCP) HTL
Сбор и идентификация образцов | отслеживание образцов в месте забора | регистрация материала | вырезка | гистология – проводка ткани и микротомия | обзорная окраска и заключение под покровное стекло | сопоставление стекол и блоков с направлениями на гистологическое исследование | отслеживание активов лаборатории и управление рабочим процессом; что делать и не делать.
Глава 7 | Метод тканевых мульти-блоков |
69 |
Rashmil Saxena BFA, HT(ASCP)CM, Sunil Badve MD, FRCPath
Преимущества и недостатки | когда не нужно использовать ТМА | варианты метода тканевыхмульиблоков | персонал, необходимый для конструирования тканевых мультиблоков | этапы конструирования тканевых мульти-блоков | анализ ТМА | анализ данных.
Глава 8 | Демаскировка антигенов |
80 |
George L Kumar PhD, Lars Rudbeck PhD*
Методы с использованием водяной бани | использование ретривера | использование автоклава |
использование предварительной ферментативной обработки | комбинированная ферментативная обработка и HIER | комбинированная депарафинизация и демаскировка антигена.
Глава 9 | Иммуногистохимические методы окраски |
91 |
Marc Key PhD
Иммуногистохимия: вводные замечания | авидин-биотиновая методика | полимерные системы в иммуногистохимии | метод амплификации с тирамидом | циклическая амплификация с тирамидом | метод амплификации с тирамид-флюоресцилом | амплификация по методу «катящегося кольца» | заключение.
Глава 10 | Иммунофлюоресценция |
97 |
J. Paul Robinson PhD, Jennifer Sturgis BS, George L. Kumar PhD
Принцип флюоресценции | ограничения при иммунофлюоресценции | применение иммунофлю-
оресценции в патологии.
* Цит. по: Dako Education Guidebook – Demasking of Antigens (2008)
4 | ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Оглавление
Глава 11 | FISH-анализ на материале, фиксированном формалином
и залитом в парафин |
105 |
Sven Muller PhD, Steen H. Matthiesen PhD, Kirsten V. Nielsen MS
Конструирование смешанного зонда для анализа солидных опухолей | подготовка образца ткани | изготовление стекол FFPE | признаки субоптимальной обработки | гибридизация зондов и отмывка | заключение в гистологическую среду и визуализация | заключение.
Глава 12 | Фильтры для FISH |
115 |
Dan Osborn
Фильтры и флюоресцентная микроскопия | параметры фильтров | специализированные фильтры для FISH и mFISH | заключение.
Глава 13 | FISH визуализация |
124 |
George L. Kumar PhD, Robert M. Zucker PhD
Определение оптимальных характеристик микроскопа для получения качественных FISH изображений | числовая апертура (NA) объектива | освещение по Köehler или полевое освещение линзы |
покровное стекло | стабильность источника света | использование лазерного сканирующего электронного микроскопа для визуализации FISH | спектральное разделение | FISH колокализация | стандарты | XY и Z сдвиги | другие факторы | CCD камера как детектор для FISH визуализации | улучшение FISH изображений с помощью 3D конволюционной микроскопии | деконволюция | заключение | словарь и приложение | разрешение | частота | мощность источника света.
Глава 14 | Двухцветный CISH и конвертирование FISH в CISH |
142 |
Ulla Henriksen PhD, Sven Muller PhD, Andreas Schonau MS, EBA
Хромогенная гибридизация in situ (CISH) | принципы процедуры CISH и конверсия из FISH в CISH |
дополнительная важность CISH | применение DuoCISH™ | заключение и перспективы CISH.
Глава 15 | Множественное иммуногистохимические окрашивание 148
Nanna K. Christensen PhD, Lars Winther PhD
Преимущества множественного окрашивания; примеры множественных окрасок | техническое обеспечение | предварительная обработка | выбор метода окрашивания | одновременное окрашивание; автоматизация получения изображения и анализа множественных окрасок | заключение.
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ | 5
Оглавление
Глава 16 | Оптимизация иммуногистохимических исследований 157
Gale E. Pace
Обработка ткани протеолитическими ферментами | блокаторы эндогенных ферментов | протеиновый блок | растворители антител | важные моменты при выборе растворителя | промывочный буфер | раствор трис-буфера | раствор фосфатного буфера | советы по приготовлению и использованию промывочных буферов | усилители хромогенного сигнала для DAB.
Глава 17 | Фоновое окрашивание |
166 |
Helle Grann Wendelboe MS, Kristen Bisgaard BSc
Фоновое окрашивание вызванное системами детекции | двойное окрашивание | биотинстрептавидиновые методы иммунодетекции | полимерные системы иммунодетекции | демаскировка антигенов | общие факторы | естественные и контаминированные антитела |
перекрестные реакции | гидрофобные взаимодействия | белки ткани | антитела | ионные и электростатические взаимодействия | комплемент-обусловленное связывание | различные причины | общие положения.
Глава 18 |
| |
Пептидные нуклеиновые кислоты: |
|
|
|
надежные технологии гибридизации зонда |
177 |
David C. Spaulding PhD |
|
||
Глава 19 |
| |
Контроли |
183 |
Ole Feldballe Rasmussen PhD
Контроль реагентов | отрицательный контроль | контрольные образцы ткани | контроль обработки образца | контрольные линии клеток | программы контроля | перспективы развития.
Глава 20 | Виртуальная микроскопия и анализ изображений |
189 |
Kenneth J. Bloom MD (под редакцией Joachim Schmid PhD, Mark Verardo PhD)
История вопроса | сканирование микропрепарата | демонстрация виртуальных препаратов |
получение изображения для анализа | анализ изображения | использование анализа изображений в морфологии.
6 | ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
Оглавление
Глава 21 | Устранение неисправностей |
196 |
Karen N Atwood
Первый раздел: неадекватное окрашивание | общий фон | ограниченное фоновое окрашивание |
неожиданное специфическое окрашивание | разное. Второй раздел: фоновое окрашивание |
реагенты отрицательного контроля. Третий раздел: образец ткани | эндогенный блок | четвертый раздел: использование стандартных инструкций к IVD антителам .
Словарь |
217 |
Указатель |
222 |
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ | 7
Руководство | Имунногистохимические методы
Пятое издание, обновленное и расширенное
Редакторы
George L Kumar PhD
Managing Editor / Scientifi c Communications
Manager
Dako North America, Inc. | Carpinteria, CA 93013,
USA
Lars Rudbeck PhD
Scientifi c Editor
Dako Denmark A/S | Glostrup, Denmark
Авторы
Thomas Boenisch MS
Retired Dako Consultant | Santa Barbara, CA, USA
Clive R. Taylor MD, DPhil, FRCPath, FRCP (Ir)
Department of Pathology and Laboratory Medicine
University of Southern California | Los Angeles, CA,
USA
A.J. Farmilo PhD
Independent Consultant | Canada
(Formerly with Dako Canada)
Ronald H. Stead PhD
The Holburn Group of Companies
Bowmanville, Ontario, Canada
James F. Happel DLM (ASCP), HTL
Massachusetts General Hospital | Boston, MA,
USA
Rashmil Saxena BFA, HT (ASCP)CM and Sunil
Badve MD, FRCPath
Clarian Pathology Laboratory
Department of Pathology & Laboratory Medicine Indiana University | Indianapolis, IN, USA
Marc Key PhD
J. Paul Robinson PhD and Jennifer Sturgis BS
Purdue University Cytometry Laboratory
Purdue University | West Lafayette, IN, USA
Lars Rudbeck PhD, Henrik Winther PhD, Sussie Steen Jensen MS, Sven Müller PhD, Steen H. Matthiesen PhD, Kirsten V. Nielsen MS, Ulla Henriksen PhD, Andreas Schönau MS, EBA, Nanna K. Christensen PhD, Helle Grann Wendelboe MS and Ole Feldballe Rasmussen PhD
Dako Denmark A/S | Glostrup, Denmark
Lars Winther PhD
Independent consultant | Copenhagen Area, Denmark (Formerly with Dako Denmark)
Dan Osborn
Omega Optical, Inc | Brattleboro, VT, USA
Robert M. Zucker PhD
U.S. Environmental Protection Agency
National Health and Environmental Effects
Research Laboratory | Research Triangle Park, NC,
USA
Kirsten Bisgaard BSc
Statens Serum Institut | Copenhagen, Denmark (Formerly with Dako Denmark)
George L Kumar PhD, Gale E. Pace BS, Joachim Schmid PhD and Mark Verardo PhD,
Dako North America | Carpinteria, CA, USA
David C. Spaulding, PhD
Stellar Biotechnologies | Port Hueneme, CA, USA
Karen N. Atwood BS, MT (ASCP), CLS
Retired, Dako North America | Carpinteria, CA,
USA
Celerus Diagnostics, Inc. | Carpinteria, CA, USA (Formerly with Dako)
8 | ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ