Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

2 курс / Гистология / РУКОВОДСТВО_ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ_ММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ_МЕТОДЫ

.pdf
Скачиваний:
3
Добавлен:
23.03.2024
Размер:
5.3 Mб
Скачать

Словарь

Количественный продукт – оценка, насколько эффективно поглощенный флуорохромом свет преобразован в флуоресценцию. Это отношение количества испускаемых фотонов к количеству поглощенных.

Коэффициент поглощения (ε) – показатель эффективности поглощения света флуорохромом

и устойчивости в возбужденном состоянии.

Лиганд – молекула, атом или ион, который связан с центральным атомом (чаще, атом металла) в сложных соединениях или хитатных комплексах.

Меченные антитела – см. «вторичные антитела».

Моноклональные антитела – иммунохимические антитела, секретированные одной плазмати-

ческой клеткой, которая прореагировала со специфическим эпитопом на антигене. Производятся коммерчески с использованием гибридом.

Моноспецифичность – имеет эффект только на определенной группе клеток или тканей или взаимодействует с одним антигеном, как моноспецифическое антитело.

Неиммунизированная сыворотка – сыворотка не иммунизированного животного.

Отрицательный тканевой контроль – образец ткани того же органа, не содержащий целевого антигена, обработанный первичными антителами.

Первичные антитела – первые антитела, используемые в процессе окраски.

Перекрестные взаимодействия – возможность антител взаимодействовать с другими антителами, кроме иммуногена. Термин не применим для характеристики взаимодействия антител между собой и с компонентами другой клетки или ткани.

Поглощающее покрытие – тонкая оптическая пленка, позволяющая минимизировать рефлекс, возникающий при перемещении света.

Поликлональные антитела – иммунохимически разные антитела, секретированные разными плазматическими клетками и взаимодействующие с несколькими эпитопами антигена.

Положительный контроль ткани – образец ткани, доказано положительно окрашивающийся при использовании первичных антител. При этом неспецифическое фоновое окрашивание должно быть сведено к минимуму. Отметьте, что для некоторых антигенов (например, простатспецифиче-

ский антиген), важно оценить вариабельность окрашивания ткани, для чего интенсивность окраски должна быть немаксимальная.

Синглетное и триплетное состояние – состояние электронов большинства органических молекул может быть описано как синглетное и триплетное. Синглетные молекулы содержат электроны с анти-

параллельными спинами (обозначается как ↑↓). Триплетное состояние молекулы характеризуется

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ | 219

Словарь

наличием непарных электронов с параллельными спинами (↑↑). Молекула переходит в более возбужденное синглетное состояние под воздействием света. Достаточно часто времени жизни молекулы в таком состоянии хватает на то, чтобы спин одного из двух электронов, поменялся, молекула, таким образом, переходит в триплетное состояние.

Сканер – автоматизированный микроскоп, который сканирует препарат целиком и составляет цифровое изображение его в виде виртуального препарата.

Специфическое окрашивание – положительное окрашивание ткани или клеток при применении первичных антител. Может выявляться диффузно распределенный, абсорбированный или фагоцитированный антиген, что называют «нежелательным» окрашиванием. Окрашивание, полученное в результате взаимодействия ткани с загрязненными первичными антителами должно расцениваться как неспецифическое.

Срок годности – минимальный срок годности биологического материала, в том числе иммунореактивов.

Срок хранения продукта – термин, характеризующий ожидаемую стабильность/устойчивость биологического вещества, в том числе иммунореактивов, чаще всего установлен экспериментальным путем, наблюдениями и в результате обобщения данных. В результате ряда сравнений установлено, что в лаборатории жидкие реагенты лучше хранить при температуре -20° С. Срок хранения ограничен сроком годности.

Стандартизация – процедура стандартизации предполагает сравнение с известным стандартом. В количественной работе в сравнении помогают числа. Полуколичественные и качественные методы

анализа, к которым относится иммуногистохимия, которые часто оцениваются субъективно, могут быть стандартизованы по тщательному отбору тканей и реагентов.

Телепатология – использование электронных технологий для передачи информации о пациенте, в том числе изображений.

Титр – в иммуногистохимии, максимальное разведение иммунной сыворотки, обеспечивающее оптимальное специфическое окрашивание с минимальным фоном.

Тушение/охлаждение – инактивация химической активности из-за повышения концентрации реагентов. В энзимологии, избыток продукта или субстрата может ингибировать ферментативную активность.

Феномен прозоны – феномен агглютинации при разведении в 100 и 1000 раз, и ее отсутствия при использовании неразведенных или слабо разведенных антител. Феномен связан не только с избытком антител, но часто вовлекает специфические классы антител (блокирующие или неполные),

которые взаимодействуют с антигеном необычным образом. Связывание антитела не только препят-

220 | ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Словарь

ствует выявлению агглютинации, но активно ингибирует ее. Феномен может проявляться преципитацией или другой иммунной реакцией.

Фоновое окрашивание – под фоновым окрашиванием подразумевают любое неспецифическое артифициальное окрашивание. Фоновое окрашивание может включать «нежелательное» окраши-

вание, возникшее в результате диффузии антигена.

Хромоген – химическое соединение, которое может образовывать цветной осадок или может быть выявлено при помощи специфических реакций.

Эпитоп – структурный компонент антигена, взаимодействующий с антителом. Представлен группировками аминокислот глобулярных белков и боковыми цепями полисахаридов. Наиболее значимый участок называется иммунодоминантой.

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ | 221

Указатель

Аберрации сферические – 135 Автоматический анализ изображений – 155, 193 Антигены, демаскировка – 80

Антитела – 15, 173

Антитела моноклональные – 19 Антитела первичные – 43 Антитела поликлональные – 18

Антитела, афинность – 21

Антитела, инкубация – 31-32 Антитела, использование и уход – 27

Антитела, контаминация – 171

Антитела, обращение – 25

Антитела, перекрестная реактивность – 23

Антитела, получение – 25 Антитела, разведение – 29

Антитела, скорость реакции – 24

Антитела, стабильность – 24 Антитела, титр – 29

Антитела, хранение – 25-26

Аутофлуоресценция – 102, 109

Биннинг – 134

Блокаторы эндогенных ферментов – 159, 213 Буферные растворы – 162-164

Взаимодействия гидрофобные – 172 Взаимодействия ионные – 174 Взаимодействия электростатические – 174 Виртуальные препараты – 191 Вырезка – 64

Гибридизация зонда – 177

Гибридизация зондов – 111 Гибридизация флуоресцентная – 105 Гибридизация хромогенная – 142

Демаскировка – 82-89, 169 Депарафинация – 59, 106

Диапазон динамический – 134

Диффузия антигенов – 170

Идентификация ткани – 60

Иммуногистохимия, методы – 91

Иммуноглобулины – 15

Иммунофлуоресценция – 97 Иммунофлуоресценция, применение – 103 Иммунохимия, основы – 29 Контроли – 47, 183

Контроли, программы – 186

Контроль внутренний – 185

Контроль линии клеток – 186

Контроль обработки образца – 185

Контроль отрицательный – 183, 185, 211

Контроль положительный – 184 Контроль реагентов – 183

Контрольные образцы – 184

Красители флуоресцентные – 154

Метод авидин-биотиновый – 92

Метод биотин-стрептовидиновый – 168 Метод тканевых мульти-блоков – 69

Методы амплификации – 94-95

Микроскоп, конфокальный – 129, 138 Микроскоп, характеристики – 124

Микроскопия виртуальная – 189

Микротомия – 64-65

Мульти-блоки – 69

Мульти-блоки, конструирование – 73-78

Мульти-блоки, типы – 71

Нафтол AS MX фосфат – 37

Неисправности – 196 Обозначения – 13 Обработка ферментом – 107, 157

Образцы, контроль забора – 61-63 Образцы, манипуляции – 55 Образцы, подготовка – 57, 106, 212 Образцы, проводка – 58, 64

Образцы, регистрация –63

Образцы, сбор и идентификация – 60

Окраска DAPI – 109

Окраска обзорная – 65 Окрашивание множественное – 148

222 | ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Указатель

Окрашивание неадекватное – 197

Окрашивание специфическое – 205

Окрашивание фоновое – 166, 201, 203, 207 Оптимизация исследований – 157 Освещение по Koehler – 125

Оценка изображений – 189

Пептидные нуклеиновые кислоты – 177

Пероксидаза хрена – 34

Проводка материала – 53

Протеиновый блок – 160

Разрешение – 139

Растворители антител – 161 Реагенты RTU – 42, 48

Реагенты валидация качества – 43

Реагенты для демаскировки – 81 Реагенты для мечения – 45

Реакции перекрестные – 171

Связывание комплемент-обусловленное – 174

Сигнал, распределение – 111

Системы детекции – 166 Системы полимерные – 93, 169

Сканирование микропрепарата – 190

Скорость считывания – 134

Спектральное совмещение – 130 Стабильность источника света – 128 Стандартизация – 40

Стекло покровное – 128

Субстрат-хромоген – 38-39 Субстраты – 36

Технологический процесс, управление – 66

Усиление хромогенного сигнала – 164

Фаза аналитическая – 41 Фаза постаналитическая – 40

Фаза преаналитическая – 40

Ферменты – 33

Фиксаторы ртутные – 56

Фиксаторы спиртовые – 57

Фиксация материала – 53

Фильтры возбуждающие – 135

Фильтры эмиссионные – 135 Флуоресценция, перекрытие – 102 Флуоресценция, принцип метода – 98 Формалин – 55

Фосфатаза щелочная – 35

Фотообесцвечивание – 101 Фуксин новый – 37 Функция рассеивания точки – 139

Хромогены – 36

Частота дискретизации – 140

Числовая апертура – 125

Энзимология, основы – 33

CISH, анализ – 142

CISH, двухцветный – 142

FISH, анализ – 105

FISH, визуализация – 113, 124

FISH, конвертация в CISH – 142 FISH, смешанный зонд – 105 FISH, фильтры – 115

FISH, колокализация – 130

FISH, детекция – 133

FISH, деконволюция – 135-136

IgG – 16

IgM – 17

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ | 223

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

РУКОВОДСТВО

Edited by

George L. Kumar, Lars Rudbeck

Русское издание под редакцией

Г.А.Франка и П.Г.Малькова

Типография Издательско-Полиграфического объединения «У Никитских ворот»

121069, Москва, Большая Никитская ул., д. 50А/5, стр. 1 (тел. 495-6906719)

Сдано в набор

02.03.2011

Формат

70 х 100

1/

 

 

 

 

16

Подписано к печати

24.06.2011

Печ.л.

14,0

 

Заказ

147

Усл.печ.л

18,2

 

Тираж

1000 экз.

Уч.-изд.л.

17,45

 

Гарнитура

Helvetica LT Std

Бумага

мелованная

Оформление и верстка

ИПО «У Никитских ворот»

Печать

офсетная

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Система гистологического окрашивания Dako CoverStainer

НАГРЕВАНИЕ

ДЕПАРАФИ-

ОКРАСКА

ДЕГИДРАТАЦИЯ ЗАКЛЮЧЕНИЕ ВЫСУШИВАНИЕ

НИЗАЦИЯ

 

 

 

- Встроенный модуль заключения под покровное стекло

- Сенсорный дисплей для управления и контроля - Модуль высушивания препаратов

- 36 станций для реагентов в 18 емкостях (по 2 станции на емкость)

- емкости с реагентами

- Желоб для загрузки штативов с препаратами - Нагревательная камера для подогрева

120 препаратов одновременно

- Отсек выгрузки препаратов по мере их готовности

Реагенты

поставляются в готовом виде

Высококачественная воспроизводимость окрашивания:

Тел./факс:

+7 (495) 921-35-78 e-mail: ab@amteo.ru www.amteo.ru

РУКОВОДСТВО ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

© Г.А.Франк, П.Г.Мальков, Ю.Ю.Андреева, Л.Э.Завалишина, Н.В.Данилова, Л.В.Москвина, Н.М.Гайфуллин

Рекомендовано к покупке и изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/