- •Содержание
- •I. Спектроскопические методы анализа Фотометрический метод анализа сточных и природных вод
- •Сущность фотоколориметрического метода анализа
- •Лабораторная работа № 1 Определение железа в природных водах с сульфосалициловой кислотой
- •Порядок выполнения работы
- •Обработка результатов и оформление работы
- •Лабораторная работа № 2 Определение хрома в сточных водах
- •Лабораторная работа № 3 Определение меди в сточных и природных водах аммиачным методом
- •II. Спектрофотометрия
- •Теоретическая часть
- •Лабораторная работа № 4 Определение остаточного мономера в полимерах, используемых для изготовления контактных линз
- •Порядок выполнения работы
- •1. Назначение органов управления и индикации
- •2. Включение спектрофотометра
- •2.1. Закрыть фотоэлемент, установив рукоятку 49 переключения шторки в положение закр и переключателем 21 установить ширину щели 0,15 нм.
- •2.5. Выключение спектрофотометра производить нажатием кнопки сеть.
- •II. Порядок работы
- •1. Подготовка к измерению
- •1.5. Перед каждым новым измерением, когда неизвестна величина выходного напряжения, следует устанавливать ширину щели 0,15 нм во избежание засвечивания фотоэлементов.
- •1.6. Снимать показания следует при плотно закрытой крышке кюветного отделения.
- •2. Измерение оптической плотности
- •2.1. Установить рукоятку 49 в положение закр.
- •III. Электрохимические методы анализа Ионоселективные электроды и их применение
- •Лабораторная работа № 5
- •Опыт 2. Определение рН вытяжки из почвы
- •Опыт 3. Ионометрическое определение содержания нитрата в вытяжке из почвы (или в водном растворе)
- •1.1. Сорбенты, применяемые в тсх.
- •1.2. Аналитическая тсх
- •1.2.2. Условия проведения эксперимента
- •1.2.3. Материалы и приборы
- •1.2.5. Количественное определение методом тсх
- •1.2.5.1. Полуколичественный анализ
- •1. Корень квадратный из площади пятна анализируемого вещества;
- •2. Lg концентрации анализируемого вещества;
- •3. Опорные точки на калибровочном графике
- •1.3. Распределительная хроматография на бумаге
- •2.2. Лабораторная работа № 7. Разделение железа (III) и меди (II) с помощью хроматографии на бумаге
- •Список литературы
- •Методы и приборы контроля окружающей среды
- •450078, Г. Уфа, ул. Чернышевского, 145; тел. (347) 278-69-85.
1.2.2. Условия проведения эксперимента
Воспроизводимость результатов зависит от условий проявления. Разделение проводят в атмосфере, насыщенной парами элюента (в этом случае стенки камеры обкладывают фильтровальной бумагой, которую незадолго до эксперимента пропитывают растворителем), или в отсутствие паров элюента. В последнем случае значение Rf больше, поскольку на фронте элюента происходит постепенное испарение растворителя за счет теплоты адсорбции. Поэтому процесс проявления занимает больше времени, а величины пробега разделяемых веществ несколько увеличиваются. Этот метод применяется в том случае, когда вещества в камере, насыщенной парами элюента, имеют очень низкие показатели Rf.
1.2.3. Материалы и приборы
Самыми распространенными являются пластинки размером 20x20, 10x20, 5x20 и 5x10 см. Пластинки дня ТСХ выпускаются размером 10x10 и 20x10 см. На пластинках размером 20x10 см разделение проводят в поперечном направлении, они предназначены для одновременного анализа множества проб. Синтетические плёнки со слоем сорбента выпускаются в виде пластинок квадратной формы и в виде рулонов шириной 20 см.
В зависимости от назначения (анализ или препаративное разделение) применяют пластинки со слоями различной толщины. Плёнки для анализа имеют слой толщиной 0.1 и 0,3 мм, плёнки для препаративных целей – 0,5 и 2 мм. Для обнаружения веществ, поглощающих в УФ-области спектра, в состав сорбента включают люминофоры. Для нанесения образцов используют тонкие капилляры (с внутренним диаметром 0,5 мм); микрошприцы объемом 5-10 мкл; дозирующие шприцы с фиксированным объемом; аппликаторы.
Элюирование проводят в камерах. Они просты в изготовлении, дешевы и удобны в работе. Иногда используются сэндвич-камеры, которые представляют собой рабочую и покровную пластинки, отделенные промежуточной рамкой и помещенные в обычную камеру или специальную кювету. Результаты воспроизводятся лучше, чем в обычных камерах. Иногда используются камеры для радиальной хроматографии.
При обнаружении анализируемых веществ используют пульверизаторы.
:1.2.4. Порядок выполнения операций
1. Нанесение пробы и проявление пластинки. Для отбора необходимого объема пробы (1-5 мкл) капилляр погружают в раствор образца, который под действием капиллярных сил заполняет часть капилляра. Избыток раствора отбирают при помощи фильтровальной бумаги; более точно необходимый объем можно отмерить с помощью шприца.
Капилляром осторожно касаются слоя сорбента на стартовой линии, при контакте образуется круглое пятно, диаметр которого не должен превышать 2 мм. Остаток раствора из капилляра отбирают фильтровальной бумагой.
В камеру, выложенную по стенкам фильтровальной бумагой, помещают элюент (высота слоя 1 см) и. покачивая камеру, смачивают листы бумаги. В случае легколетучих растворителей время насыщения составляет 10-15 мин. В камеру помещают пластинку, причем стартовая линия не должна быть погружена в растворитель.
Если растворимость пробы недостаточно высокая, то ее растворяют в большем объеме, разбавленный раствор наносят порциями по 1-2 мкл, высушивая каждый раз стартовое пятно при помощи фена.
По достижении фронтом растворителя высоты 10-15 см пластинку извлекают, отмечают положение фронта и высушивают.
2. Обнаружение. Наряду с ранее упомянутыми физико-химическими методами для обнаружения применяются разнообразные реагенты, образующие с анализируемыми веществами окрашенные продукты. Пластинку равномерно опрыскивают раствором реагента, а потом выдерживают при комнатной или повышенной температуре. Опрыскивание хроматограмм проводят в хорошо вентилируемом шкафу. При этом исключается попадание токсичных или канцерогенных аэрозолей в дыхательные пути или на кожу. При количественном анализе методом ТСХ необходимо обеспечивать равномерное распределение реагента по поверхности пластинки. Для этого готовые пластинки с надежно закрепленным слоем можно погружать в раствор реагента. Часто реакция окрашивания протекает лишь при повышенной температуре. При качественном анализе пластинку нагревают в сушильном шкафу; при количественном анализе нагрев проводят в строго контролируемых условиях, на специальных нагревателях. За изменением окраски следят визуально и по достижении оптимальной интенсивности прекращают нагрев.
3. Идентификация анализируемых веществ. Уже на основании собственной флуоресценции веществ в УФ-свете можно сделать предварительное заключение о классе веществ. Дополнительные сведения о типе функциональных групп получают при обработке пластинки специфическими реагентами. Иногда связующие компоненты уменьшают интенсивность окраски. В этом случае рекомендуется использовать другой тип пластинок.