Работа № 3. Определение группы крови

Введение непосредственно в кровь, минуя пищеварительный тракт, чужерод­ных тел - антигенов (молоко, растительная пыльца, куриный белок, растительные белки, микроорганизмы и т.д.) вызывает образование в крови защитных элементов -антител. Они нейтрализуют, осаждают и разрушают чужеродные белки.

Видовые различия крови распространяются как на форменные элементы, так и на химический состав плазмы. Введение крови животного одного вида в кровяное русло животного другого вида приводит к нарушению физиологических функций ор­ганизма и образованию антител (антитоксинов, преципитинов, цитолизинов, бакте­риолизинов, гемолизинов и др.). Наиболее важной группой антител являются агглютинины, которые вырабатываются в ответ на введение в кровь чужеродных кровяных элементов - агглютиногенов. Агглютинины вызывают склеивание эритро­цитов чужой крови (реакция гемоагглютинации), а преципитины их осаждают (реакция преципитации).

Агглютинины, как и другие антитела, обладают специфичностью, т.е. спо­собны склеивать только определенные эритроциты, содержащие соответствующий агглютиноген. Внутривидовые биологические различия крови легли в основу учения о кровяных группах, исследование которых необходимо для практики переливания крови.

Мембрана эритроцитов человека является носителем более 300 антигенов, обладающих способностью вызывать против себя образование иммунных антител.

ть этих антигенов объединена в 20 генетически контролируемых систем групп зи (АВО, К1>, Дафи, М, N,3, Леви, Диего). Система антигенов эритроцитов АВО лчается от других групп крови тем, что содержит в сыворотке крови естественные 1тела (агглютинины) - а и р Таким образом существует два рода агглютининов -р, которые содержатся в плазме крови, и два рода агглютиногенов - А и В, >рые содержатся в эритроцитах. В крови одного человека никогда не сочетаются эинации А и а или вир, так как агглютинин а вызывает склеивание эритроцитов, >ржащих агглютиноген А, а агглютинин р - эритроцитов, содержащих агглюти-н В. В зависимости от наличия в крови тех или других веществ различают 4 1ы крови.

Группа крови сохраняется у человека в течение всей жизни. Классифи-ются группы по номенклатуре 0, А, В, АВ или по Янскому -1, II, III, IV (табл. 14).

Человек, у которого берут кровь для переливания, называется донором, а чатель крови - реципиентом. При смешивании крови донора и реципиента этинация наступает в том случае, если встречаются факторы А и а, в и р.

При переливании крови учитывают лишь свойства эритроцитов донора и ггва плазмы реципиента, пренебрегая агглютинирующими свойствами плазмы эа, так как она вводится в малом количестве и, разводясь в крови реципиента, я свои агглютинирующие свойства.

Таблица 14

Группы крови человека

именование группы	Агглютинины (антитела) в сыворотке	Агтлютиногены (антигены) в эритроцитах
0(0	<х,Р	-
А (II)	Р	А
В(1И)	а	В
АВ (IV)	-	АВ

При определении группы крови применяют готовые и стандартные сыворотки рупп, которые позволяют установить свойства эритроцитов.

Объект исследования: кровь.

Оборудование: стандартная сыворотка II и III групп, две пипетки, две стек-з палочки, предметные стекла, скарификатор, спирт, эфир, йод, вата.

Код работы: 1. На два конца чистого предметного стекла палочкой нанесите пе сыворотки: на один конец - сыворотку II группы, на другой - III группы, избежать ошибки, на стекле возле каждой капли напишите восковым каранда->мер группы сыворотки. Сыворотку берите из ампул стеклянными палочками, е, чтобы не спутать палочки для взятия сыворотки II и III групп.

2. В каждую из них добврьте по капле исследуемой крови. Тщательно пере­мешайте кровь в калте одррггки. Для смешивания крови с каждой из сывороток используйте отделылдашй^очки. Реакция агглютинации наступает через 1-5 мин.

3. Через %осле смешивания крови с сыворотками установите группу исследуемой *рйви в зависимости от наличия или отсутствия агглютинации.

I

II (В)

Рис. 11. Определение группы крови

Если агглютинации не происходит, капля представляет собой равномерную мутную взвесь эритроцитов. В случае агглютинации ясно видно (невооруженным глазом) образование хлопьев из эритроцитов среди прозрачной жидкости (рис. 11).

Рекомендации к оформлению результатов работы: 1. Зарисуйте кар­тину, лолучившуюся на стекле при определении групп крови.

2. Отметьте наличие или отсутствие агглютинации в каплях сыворотки.

3. Проанализируйте полученные результаты по схеме (табл. 15):

Таблица 15

Схема определения групповой принадлежности крови

Группы крови	Агглютинация эритроцитов
	Сыворотка II группы + кровь	Сыворотка III группы + кровь
I	нет	нет
и	нет	есть
III	есть	нет
IV	есть	есть

Выводы и обсуждение результатов работы: укажите, какие агглютино-гены и агглютинины содержатся в исследуемой крови и какой она группы крови. Объясните механизм агглютинации эритроцитов.

Работа № 4. Определение резус-фактора крови

В эритроцитах 85% людей помимо агглютиногенов А и В содержится особый антиген - резус-фактор (КИ-фактор), открытый в 1940 г. К. Ландштейнером и Р. Винтером. Такая кровь называется резус-положительной. У 15% людей нет резус-фактора {резус-отрицательная кровь). Сыворотка крови людей не содержит соответствующих резус-фактору готовых агглютининов. Однако они могут образо­вываться при определенных условиях, например после того как субъекту с резус-отрицательной кровью перельют резус-положительную кровь. При последующем переливании совместимой, но резус-положительной крови у ранее иммунизиро­ванного реципиента может наступить гемотрансфузионный шок в результате реак­ции меиоду резус-положительными эритроцитами и образовавшимися анти-резус агглютининами.

Определение КИ-фактора так же необходимо, как и определение группы крови людей.

Объект исследования: донорская кровь.

Оборудование; пробирки, вата, стандартная сыворотка, стерильный 10%-ный раствор желатины, обработанный альбуцидом (из расчета 10 мг альбуцида на 1 мл желатины), физиологический раствор.

Ход работы: 1. На дно пробирки, используя разные пипетки, поместите каплю стандартной сыворотки, каплю желатина и каплю крови.

2. Пробирку поставьте на 5 мин в водяную баню, температура 47-49°С.

3. Через 5 мин в пробирку добавьте 3 мл физиологического раствора, пере­мешайте содержимое пробирки, зажав ее между большим и средним пальцами правой руки.

4. Рассмотрите пробирку на свет, установите, произошла ли агглютинация. В случае положительной реакции в растворе появляются мелкие хлопья. При отрицательной реакции содержимое пробирки гомогенно. В сомнительных случаях рекомендуется каплю раствора поместить на предметное стекло и рассмотреть положение эритроцитов под микроскопом при малом увеличении. При агглютинации они расположены группами, в противном случае равномерно распределены в плазме.

Рекомендации к оформлению результатов работы: отметьте наличие или отсутствие агглютинации в пробирке.

Выводы и обсуждение результатов работы: укажите резус-принад­лежность исследуемой крови.

САМОКОНТРОЛЬ УСВОЕНИЯ ЗНАНИЙ