Специфическая индикация микроорганизмов и бактериальных токсинов Организация и порядок проведения специфической индикации

Специфическая индикация представляет собой комплекс специальных лабораторных и организационных мероприятий, проводимых медицинской и ветеринарной службами для подтверждения факта применения БО или аварийного обсе­менения БА окружающей среды, а также определения (иден­тификации) при этом видов и поражающих свойств этих агентов.

Основу специфической индикации составляют лаборатор­ные методы экспресс-анализа, которыми в настоящее время являются:

- прямой метод флуоресцирующих антител (МФА) с контрастированием неспецифического свечения альбумином, меченным производными родамина;

- реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) с эритро­цитарными иммуноглобулиновыми диагностикумами (МФА и РНГА - не единственные методы в экспресс-анализе, т. к. имеются и другие, достаточно перспективные методы микробиологического анализа, в том числе иммуноферментный, радиоиммунный и др. Однако эти методы еще нуждаются в доработке и их применение при индикации БА взамен обязательных (т.е. МФА и РНГА) пока преждевременно. До их официального утверждения их можно использовать в ходе анализа проб лишь в качестве дополнительных тестов параллельно с основными методами).

В зависимости от заданной специфичности диагностиче­ских препаратов МФА и РНГА позволяют определить род, группу, вид бактерий, риккетсий, вирусов, грибов и токсинов по таким характерным признакам, как антигенные свойства, морфология и локализация возбудителя в культурах клеток, в органах и тканях животных. В большинстве случаев эти свойства возбудителей могут быть выявлены с помощью МФА и РНГА в течение нескольких часов, а в результате предварительного обогащения - через 1-2 сут. Применяют­ся эти методы для специфической индикации в лабораториях медицинской и ветеринарной служб по единой схеме, пред­усматривающей два взаимодополняющих этапа исследова­ния:

- непосредственный анализ нативных материалов проб, для исследования с помощью экспресс-мето­дов;

- доставка;

- исследование этими же методами материалов тех же проб после их предварительного биологического обогащения.

Принципиальная схема анализа проб

Единая схема специфической индикации БА предполага­ет выявление и идентификацию в полном объеме различных видов бактерий, риккетсий, вирусов, хламидий, грибов и бак­териальных токсинов. Практически возможность выявления тех или иных видов микроорганизмов определяется наличи­ем в лаборатории соответствующих диагностических препа­ратов (люминесцирующих иммуноглобулинов, эритроцитар­ных иммуноглобулиновых диагностикумов и др.) и условий для проведения анализа как нативных проб, так и материа­лов после биологического обогащения на питательных сре­дах, в культуре клеток и других биологических системах.

При отсутствии условий для специфической индикации БА в полном объеме проводится исследование материалов в сокращенном объеме, предусматривающем экспресс-анализ доставленной пробы без ее биологического обогащения, т. е. исследования образца только на первом этапе схемы инди­кации.

Принято считать, что результаты специфической индика­ции, проводимой в полном объеме, выдаются в соответствии с этапами исследования в два срока: первый ответ - пред­варительный (или предупредительный) выдается при поло­жительном результате анализа после первого этапа исследо­вания через 2-3, максимум спустя 3-5 ч после начала ин­дикации. Предварительный отрицательный ответ - не вы­дается. Второй ответ окончательный. Он выдается через 48-72 ч после окончания второго этапа анализа. При поло­жительном окончательном ответе сообщается о наличии и видах в пробах БА. В отрицательном - указывается, на ка­ком сроке он выдан.

Результаты индикации, проводимой в сокращенном объ­еме, ограничивается, как правило, только предварительным положительным ответом. Окончательный ответ обычно не выдается. Сообщается лишь о продолжении исследований в лаборатории вышестоящего звена медицинской (ветеринар­ной) службы, где будет проведен полный объем индикации пробы. Организуют специфическую индикацию в Вооружен­ных Силах начальники медицинской (ветеринарной) служ­бы, а осуществляют ее микробиологические лаборатории са­нитарно-эпидемиологических учреждений военных округов и различных звеньев медицинской службы действующей ар­мии. К проведению специфической индикации БА могут прив­лекаться также отдельные лаборатории инфекционных и не­которых других госпиталей фронта и военных округов.

Микробиологические лаборатории санитарно-эпидемиоло­гических отрядов армии, фронта, военных округов и флотов, как правило, проводят индикацию БС в полном объеме, т. е. в два этапа.

СЭЛ дивизии, подвижные лаборатории, ОСЭР, а также гарнизонные лаборатории округов и им равные лаборатор­ные подразделения, имеющие ограниченные штатно-органи­зационные возможности, участвуют в сборе и сортировке проб и обеспечивают их пересылку соответственно в СЭО военных округов или армии и фронта для проведения инди­кации в полном объеме. Одновременно с этим они обязаны осуществлять индикацию проб в сокращенном объеме, т.е. проводить экспресс-анализ на первом этапе исследования пробы без ее биологического обогащения.

Объем индикационных исследований, равно как и их це­левая направленность, устанавливаются начальником меди­цинской службы объединения. Одновременно с этим опреде­ляется и порядок пересылки пробы в соответствующие сани­тарно-эпидемиологические учреждения, где анализ этих проб может быть продолжен по единой схеме в полном объеме.

Изменения объема исследований в зависимости от кон­кретной обстановки могут касаться как перечня подлежа­щих выявлению видов БА, так и этапов анализа проб. На­пример, в армейских и фронтовых лабораториях исследова­ния могут при необходимости ограничиться выявлением в пробах только контагиозных инфекций или возбудителей с коротким инкубационным периодом и т. п. В то же время при усилении силами и средствами войсковые и им равные лабораторные подразделения армии, фронта или военных округов могут расширить объем индикации и, кроме иссле­дования нативных материалов проб воздуха и содержимого ББП, обязательных для анализа по схеме в сокращенном объеме, они могут:

- проводить индикацию возбудителей контагиозных и природно-очаговых бактериальных инфекций в различных ма­териалах проб до и после их биологического обогащения;

- исследовать в полном объеме пробы на наличие в них ботулинического или других токсинов.

Анализ материалов, доставленных от больных людей и животных с отметкой о предполагаемом диагнозе, проводят целенаправленно экспрессными и (или) классическими мик­робиологическими методами исследования; во всех осталь­ных случаях материалы от больных подлежат исследованию по единой схеме специфической индикации БА.

При необходимости окончательного подтверждения отри­цательных результатов индикации БА, а также во всех слу­чаях, вызывающих сомнение или требующих контрольной проверки и выделения возбудителя в чистой культуре, проба подлежит дальнейшему исследованию с помощью общепри­нятых методов полного (классического) микробиологическо­го анализа в специализированных (бактериологических, ви­русологических или других) отделениях СЭО фронта и воен­ных округов или в соответствующих НИИ гражданского здравоохранения,

Организация специфической индикации в мирное, и осо­бенно в военное, время предусматривает строгое соблюдение принципа преемственности в работе лабораторий, который предполагает:

- единые способы отбора проб, а также единую схему и методы анализа;

- общую унифицированную (сквозную) нумерацию и обозначение материалов проб в зависимости от стадии их обработки и исследования;

- обязательную для лабораторий, проводящих специфи­ческую индикацию БА в сокращенном объеме, пересылку в кратчайшие сроки около 2/3 каждой пробы в вышестоящие учреждения, обеспечивающие исследование проб в полном объеме в соответствии с единой схемой;

- усиление лабораторий войскового звена и им равных, вынужденных проводить индикацию в полном объеме за счет дополнительных сил и средств;

- замену лабораторий, подлежащих передислокации вслед за войсками, новыми подразделениями с передачей им проб для продолжения индикации;

- организацию обязательной, четкой взаимной информа­ции между лабораториями различных звеньев медицинской и ветеринарной служб о ходе и результатах индикации.

При соблюдении принципа преемственности в работе ла­бораторий исчезает вынужденная необходимость в повторе­нии исследований, выполненных на более ранних этапах ана­лиза.

Специфическая индикация любых биологических агентов, проводимая в соответствии с единой схемой экспресс-анализа в два вышеперечисленных этапа, всегда предусматривает следующий порядок исследования:

- прием, сортировку и регистрацию проб;

- подготовку проб к исследованию и их первичную об­работку;

- концентрирование (при необходимости) возбудителей в пробе с помощью физических или иммуносорбционных спо­собов;

- исследование нативных материалов, пробы с помощью экспресс-методов анализа;

- биологическое обогащение пробы на питательных сре­дах в организме белых мышей и в культуре клеток;

- постановку биопробы на ботулинический и другие ток­сины;

- исследование с помощью экспресс-методов биологи­чески обогащенных материалов пробы.