Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
М.конт.пр. МУ лаб.раб..doc
Скачиваний:
15
Добавлен:
01.05.2019
Размер:
341.5 Кб
Скачать

2. Определение наличия сульфитредуцирующих клостридий

Метод определения сульфитредуцирующих клостридий базируется на их способности вызывать почернение железосульфитной среды Вильсона-Блера в результате восстановления сернистокислого натрия с образованием сернистого железа.

Ход определения

  1. Использовать приготовленные разведения предыдущих определений.

  2. Среду Вильсона-Блера расплавить на водяной бане и охладить до температуры 40-450С.

  3. Внести по 1 см3 1-го и 2-го разведений в пробирки со средой Вильсона-Блера. Для посева 1 г материала внести 10 см3 1-го разведения в среду Вильсона-Блера в большой пробирке. Посевы поместить в термостат при 370С.

  4. Посевы инкубировать не более 72 ч, ежедневно просматривать, отмечая появление черных или коричневых колоний или потемнения среды.

  5. Из материала пробирок с наличием роста изготовить мазки, окрасить их по Граму, микроскопировать с иммерсией.

  6. Определить наличие бактериальных спор в исследуемом материале. Для этого изготовить мазок, нанести на него 5%-ный раствор малахитового зеленого и нагреть в пламени спиртовки в течение 1 мин до появления паров, затем мазок охладить, промыть водой, нанести 0,5%-ный спиртовой раствор основного фуксина на 30 с, снова промыть водой. Мазок микроскопировать с иммерсией, учитывая, что бактериальные споры приобретают зеленую окраску, вегетативные клетки - красную.

  7. Определить каталазную активность исследуемых микроорганизмов. Для этого на поверхность обезжиренного предметного стекла наносят бактериологической петлей колонию, снятую с поверхности питательного агара, выдерживают на воздухе в течение 30 мин, а затем наносят каплю 3%-ного Н2О2. Если в течение 30-60 с пузырьки газа не образуются, то каталаза отсутствует.

  8. Наблюдаемые при микроскопировании препаратов картины зарисовать и описать, отметив увеличение микроскопа.

  9. Полученные результаты оформить в таблицу:

Таблица 4. Наличие сульфитредуцирующих клостридий в пресервах

Наименование

продукта

Исследуемое

количество, г

Рост на

среде Вильсона-Блера

Окраска по Граму

Наличие

спор

Каталаза

Полученное

значение

Нормативное

значение

Заключение

Вывод. Сделать общий вывод о качестве рыбных пресервов по исследованным микробиологическим показателям.

Контрольные вопросы. 1.С какой периодичностью осуществляют микробиологический контроль рыбных пресервов? 2. По каким микробиологическим показателям контролируют пресервы? 3. Как производится отбор проб пресервов и подготовка их к микробиологическим анализам? 4. Какие среды и реактивы используют для определения осмотолерантных плесневых грибов и дрожжей в пресервах? 5.Как изготовляют и микроскопируют препарат "раздавленная капля"? 6. Какая микроскопическая картина характерна для плесневых грибов и для дрожжей? 7. Какие среды и реактивы используют для определения сульфитредуцирующих клостридий. 8. Каким методом производится выявление бактериальных спор? 9. Как производится определение каталазной активности? 10. Какие меры предпринимают на предприятии, если выпускаемые пресервы по микробиологическим показателям не удовлетворяют нормативным требованиям?

Лабораторная работа № 4