Иммунные сыворотки и иммуноглобулины

Иммунные сыворотки подразделяют на лечебно-профилактические и диагностические. Лечебно-профилактические сыворотки получают из крови гипериммунизированных лошадей или других животных, у которых можно взять сравнительно большое количество крови. Диагностические сыворотки обычно получают из крови иммунизированных кроликов.

Гетерологичные антитоксические лечебно-профилактические сыворотки получают путем многократной подкожной или внутривенной иммунизации животных (обычно лошадей) анатоксинами или микроорганизмами, вырабатывающими токсин в возрастающих дозах. После окончания иммунизации у животного стерильно берут кровь, из которой получают сыворотку. Сыворотку проверяют на активность (титр антител), стерильность, безвредность, количество белка, прозрачность. Нативные сыворотки содержат балластные белки, которые при введении человеку могут вызвать осложнения, поэтому их готовят в очищенном и концентрированном виде. Для этого полученные нативные сыворотки осаждают сульфатом аммония, подвергают очистке от балластных веществ путем ферментирования и диализа (метод «Диаферм-3»), концентрируют и титруют на наличие антитоксических антител. Активность антитоксических сывороток выражают в антитоксических или международных единицах (АЕ, МЕ) по ее способности нейтрализовать определенное количество токсина в опытах на животных. Например, для противодифтерийной сыворотки антитоксическая единица — это наименьшее количество сыворотки, которое нейтрализует 100 DLM дифтерийного токсина для морской свинки; 1 DLM — наименьшее количество токсина, которое вызывает гибель морской свинки массой 250 г при подкожном введении.

В настоящее время выпускаются противодифтерийная, противогангренозная, противостолбнячная, противоботулинистическая антитоксические лечебно-профилактические сыворотки.

Сыворотку вводят чаще внутримышечно или внутривенно. Перед употреблением ее подогревают на водяной бане до температуры 36—37⁰С. Введение чужеродного белка может вызвать тяжелые реакции. Поэтому сыворотку вводят по методу Безредки с проверкой индивидуальной чувствительности больного к белку данной сыворотки. Для этого 0,1 мл сыворотки лошади, разведенной 1:100, вводят внутрикожно в ладонную поверхность предплечья. У людей с повышенной чувствительностью возникает аллергическая реакция, которая выражается в появлении папулы и гиперемии на месте введения через 20 мин после инъекции. При отрицательной реакции с целью десенсибилизации вводят 0,1 мл неразведенной сыворотки, а через 30—60 мин при отсутствии аллергических явлений — всю назначенную дозу.

Иммуноглобулины. Эти препараты представляют собой иммунологически активные белковые фракции сыворотки крови (иммуноглобулины класса G – около 95%, класса М – около 3-5%), выделенные путем фракционирования сывороточных белков спиртом на холоду. Иммуноглобулины получают из сыворотки крови неиммунизированных доноров (нормальный донорский или противокоревой иммуноглобулин), иммунизированных доноров (гомологичные специфические иммуноглобулины), а также из сыворотки крови иммунизированных животных (гетерологичные специфические иммуноглобулины). Период полувыведения иммуноглобулинов из организма человека составляет около 4 недель, а максимальный уровень антител в крови после внутримышечного введения достигается через 24-48 часов. Иммуноглобулины человека относятся к слабореактогенным препаратам, используются для экстренной профилактики и лечения инфекционных болезней.

Нормальный донорский иммуноглобулин получают из крови не менее чем 1000 человек, концентрируя препарат в процессе производства. В препарате содержится высокий уровень антител к возбудителям многих заболеваний (корь, коклюш, грипп, полиомиелит, гепатит и т.д.) в результате предшествующих инфекций или прививок.

Из сыворотки крови иммунизированных доноров изготавливают специфические иммуноглобулины против гепатита В, гриппа, клещевого энцефалита, стафилококковых инфекций, столбняка, бешенства (антирабический), против коклюша, а также иммуноглобулин, обогащенный IgM для орального применения при кишечных инфекциях.

Выпускаются также препараты крови и иммуноглобулины человека для внутривенного введения, предназначенные для лечения инфекционных болезней (антистафилококковая плазма, антипротейная плазма, антисинегнойная плазма, иммуноглобулин человека нормальный, иммуноглобулин для внутривенного введения, иммуноглобулин человека антистафилококковый, иммуноглобулин человека противоботулинистический, иммуноглобулин человека противодифтерийный).

К гетерологичным иммуноглобулинов относятся препараты против бешенства, венесуэльского энцефаломиелита лошадей, клещевого энцефалита, лептоспироза, лихорадки Эбола, японского энцефалита, сибирской язвы.

Сыворотки и иммуноглобулины создают кратковременный искусственный пассивный иммунитет и применяются для экстренной профилактики и лечения инфекционных болезней.

Аллергены.В практике здравоохранения инфекционные и неинфекционные аллергены используют как для специфической диагностики заболеваний, так и для их специфической иммунотерапии.Аллергены применяют с целью выявления иммунологической перестройки организма в результате вакцинации или заболевания, а также для определения чувствительности больного к определенным лекарственным средствам. Основные требования к аллергенам — высокая чувствительность и специфичность. Микробные аллергены готовят из фильтратов бульонных культур (туберкулин, бруцеллин, гистоплазмин) или из клеток микроорганизмов аналогично химическим вакци­нам. Их контролируют и хранят аналогично другим бактериальным препаратам.

Инфекционные аллергены представлены аллергенами грибов, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов.

Аллергодиагностика инфекционных болезней основана на способности кожи человека, сенсибилизированного к аллергену определенного микроорганизма, реагировать на его внутрикожное введение развитием аллергической реакции. Аллергены наиболее часто вводят накожно (проба Пирке), внутрикожно (проба Манту) в объеме 0,1 мл в ладонную поверхность предплечья или методом укола - прик-тесты, а также провокационные тесты. При положительной реакции на месте нанесения аллергена на­блюдается покраснение и припухлость. В последние годы в практику внедрены препараты для сухого прик-теста, представляющие собой металлические ланцеты с фиксированным на них сухим стандартизованным аллергеном. Все диагностические кожные аллергические реакции учитываются через 20 минут (реакция немедленного типа) и через 24-48 часов (реакция замедленного типа).

Диагностика аллергии может осуществляться также с помощью реакций in vitro (радиоаллергосорбентный, радиоиммунный тесты, иммуноблотинг, иммуноферментный анализ, реакция торможения миграции лейкоцитов - РТМЛ, тест ППН - показатель повреждения нейтрофилов).

Бактериальные аллергены, как правило, используются для диагностики, реже – для специфической иммунотерапии различных хронических и рецидивирующих инфекционно-аллергических заболеваний (инфекционно-аллергическая форма бронхиальной астмы, хроническая пневмония, хронические тонзиллит, отит, синусит, бронхоэктатическая болезнь, полиартриты, энтериты, гастриты и т.д.).

Бактериальные аллергены представляют собой белковые термостабильные фракции бульонных культур соответствующих видов микроорганизмов, полученные путем осаждения уксусной кислотой с последующим растворением осадка боратно-солевым буфером. Аллергены стандартизуются по белковому азоту. С целью диагностики бактериальные аллергены вводят внутрикожно. В практических целях наибольшую значимость имеет применение аллергенов с целью постановки кожных аллергических проб для диагностики туберкулеза, бруцеллеза, туляремии, сибирской язвы.

Грибковые аллергены представляют собой водно-солевые растворы гликопротеидов мицелия грибов. Стандартизуются эти препараты по белковому азоту и применяются в диагностических целях для постановки внутрикожных аллергических проб при кандидамикозах, плесневых и некоторых других микозах.

Диагностические иммунобиологические препараты

Диагностикумыпредставляют собой взвесь убитых бактерий стандартной концентрации в физиологическом растворе, применяемые в качестве корпускулярного антигена в реакции агглютинации с целью определения наличия и титра антител в крови больного. В настоящее время выпускается широкий спектр диагностикумов - брюшнотифозные O и H, паратифозные A и B, бруцеллез­ный, туляремийный и др.

Эритроцитарные диагностикумы - это взвесь эритроцитов барана в физиологическом растворе, на которых адсорбированы антигены, полученные из бактерий, риккетсий, вирусов (или сами вирусы). Применяется в РНГА для выявления антител при дизентерии Флекснера и Зонне, сыпном тифе, различных вирусных инфекциях и др.

Имеются также различные антигены для РСК-растворы молекулярных антигенов из бледных трепонем, из риккетсий Провачека, из бактерий коклюша и др., применяемые для установления титра антител в крови у больных соответствующими инфекциями.

Диагностические сывороткиполучают обычно путем иммунизации кроликов соответствующими микроорганизмами, антигенами из них или токсинами.

Агглютинирующие сыворотки (например, против сальмонелл, шигелл разных видов и других микроорганизмов) применяются для идентификации микроорганизма по антигенным свойствам с помощью реакции агглютинации.

Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка применяется для идентификации полисахаридного антигена бацилл сибирской язвы с помощью реакции преципитации.

Люминесцирующие сыворотки представляют собой меченые флюорохромом (обычно изотиоцианатом флюоресцеина) антитела против возбудителей различных инфекций (чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллеза, холеры, вирусов гриппа, парагриппа, аденовирусов и др.). Применяются в реакции иммунофлюоресценции для выявления возбудителей инфекции или их антигенов в материале от больного.