Лабораторная диагностика подкожных (субкутанных) микозов Споротрихоз

Встречается почти во всех странах мира (чаще во Франции и США), возбудитель - Sporotrichum schenckii обладает диморфизмом, относится к нитчатым грибам, гифомицетам. Споротрихоз регистрируется преимущественно в странах с тропическим и субтро­пическим климатом, а в зонах с умеренным климатом - в теплое время года. Гриб обитает в почве, вегетирует на растениях.

Грибы проникают чаще всего в кожу конечностей при травме, реже - через слизистые оболочки дыхательных путей или желудочно-кишечного тракта. Как правило, заболевают лица, работающие с растения­ми и древесиной. В месте поражения грибом развивается поражение в виде пустулы, абсцесса или язвы, лимфатические сосуды утолщаются и уплотняются. Заболевание характери­зуется поражением подкожной клетчатки и лимфатических узлов, образованием гумм в глотке, гортани, мышцах, синови­альных оболочках, костях, суставах, возникновением абсцессов в мышцах и внутренних органах, развитием пневмонии, пиелонеф­рита. Иногда может происходить диссеминация возбудителя с поражением внутренних органов и костей.

Материалом для исследования служат гной из свищей и язвен­ных поражений, соскобы с краев язв, пунктаты закрытых воспа­лительных очагов, биоптаты пораженных тканей.

Микроскопический метод. Тканевые формы в виде мелких грамположительных почкующихся клеток округлой или сигарообразной формы, напоминающих челнок, размерами 2—5мкм и покрытых слоем слизи, обнаруживают обычно внутри макрофагов. Однако эти находки в срезах тканей и в патологическом материале встречаются сравнительно редко. Иногда встречаются дрожжеподобные почкующиеся клетки, диаметром 2-8мкм, и так называемые «астроидные» тела — грибковые клетки, окруженные эозинофильными комплексами антиген-антитело.

При микроскопическом исследовании обнару­живают также септированный мицелий, размером 10-50 мкм, с харак­терными конидиями споротриксов в виде гроздей, напоминающих цветки мар­гаритки, а также не­большие (2-5 мкм), заостренные на концах, овоидные или сигароподобные конидии, расположен­ные попарно или в виде розеток на кон­цах мицелия.

Для экспресс-диагностики споротрихоза также применяется РИФ.

Микологическое исследование. Для выделения чистой культуры посевы про­изводят на плотные и жидкие питательные среды, которые инкубируют при температуре 25⁰ С или 37⁰ С.

В культурах споротрихум встречается в мицелиальной и дрожжевой формах.

Дрожжевые формы вырастают при температуре 37⁰ С на 4-6 день в виде гладких колоний желтого цвета, в которых при микроскопическом исследовании обнаруживают овальные и удлиненные толстостенные клетки, размером 1-2х4-8мкм; могут встречаться также круглые почкующиеся клетки, иногда связанные друг с другом длинной клеткой. Позднее колонии медленно увеличиваются в размерах, становятся серыми, складчатыми, редко сливаются.

Колонии гриба вырастают на 20 —25-е сутки. При бактериоскопии обнаружива­ют ветвистый, септированный мицелий шириной 2 — 6 мкм коричневого цвета и овальные споры, расположенные на стеригмах размером 2 — 5 мкм. При 37⁰ С споротрихумы ра­стут в дрожжевой форме — в виде еди­ничных овальных клеток.

Мицелиальная форма гриба растет при температуре 25⁰ С в течение 20-25 дней. Встречаются складчатые, крупнобугристые, многопетлистые, возвышающиеся колонии, окрашенные водонерастворимым пигментом сначала в кремовый, затем в желтый, коричневый и чер­ный цвет. Мицелий гриба ветвистый, септированный, диаметром 1,0-2,5х10-30 мкм. Конидии овальные, круглые, грушевидные или цилиндрические, часть из них имеют заостренные концы, размеры конидий 2-8х1,5-З,0 мкм мкм. Конидии располагаются обычно попарно одна против другой по бокам мицелия или группами по 5-10 спор на конце, иногда в виде розетки. Встречаются также коремии - анастомозирующие нити мицелия в виде тонких усиков или завитков с микроконидиями на воздушных концах. В старых культурах обнаруживаются хламидоспоры.

Биопроба – интратестикулярное заражение белых мышей. При микроскопии пораженных тканей отмечается трансформация мицелиальной формы гриба в дрожжевую. Мышей, крыс, морских свинок можно заражать также внутрикожно. Хоро­ший результат дают аллергические пробы со споротрихином.

Серологический метод - выявление антител в сыво­ротке крови больных к антигенам возбудителя споротрихоза с помощью РА, РСК и ИФА.

Аллергический метод – постановка внутрикожной аллергической пробы с аллергеном гриба - споротрихином