Перечень конкретных учебно-целевых вопросов

1. Характеристика и классификация вирусов – возбудителей острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ).

2. Аденовирусы (семейство Adenoviridae). Общая характеристика и классификация. Структура вириона, антигены, методы культивирования. Резистентность к действию физических и химических факторов. Патогенез заболеваний. Персистенция аденовирусов. Онкогенные се­ротипы аденовирусов. Лабораторная диагностика.

3. Ортомиксовирусы (семейство Orthomyxoviridae). Общая характеристика и классификация. Вирусы гриппа человека, их классификация и биологические свойства (структура, химический состав вириона, особенности генома, характеристика антигенов, виды и механизмы антигенной изменчивости,, методы культиви­рования, чувствительность к физическим и химическим факторам; гемагглютинин, нейраминидаза, их локализация, строение, классификация, функциональная активность). Роль персистенции вирусов гриппа в организме человека и животных в сохранении эпидемиологически значимых штаммов. Особенности иммунитета, лабораторная диагностика, специфическая профилактика и лечение гриппа. Вирус парагриппа.

4. Вирус эпидемического паротита, его роль в патологии человека, особенности иммунитета; методы специфической профилактики эпидемического паротита.

5. Вирус кори и его биологические свойства. Патогенез заболевания. Иммунитет и специфическая профилактика кори. Респираторно-синцитиальный вирус. Биологичес­кие свойства, классификация. Патогенез заболевания. Иммунитет. Специфическая профилактика.

6. Герпесвирусы (семейство Herpesviridae). Общая характеристика и классификация, структура вириона, антигены, методы культивирования. Резистентность к физическим и химическим фак­торам. Вирусы герпеса, патогенные для человека, их биологические свойства. Механизмы персистенции герпесвирусов. Лабораторная диагностика, спе­цифическая профилактика и лечение герпетических инфекций.

Вопросы для самостоятельного изучения

1. Поксвирусы (семейство Poxviridae). Общая характеристика и классификация. Вирус натуральной оспы, его структура, антигены, методы культивирования. Чувствительность к дей­ствию химических и физических факторов. Патогенетические особеннос­ти заболевания. Лабораторная диагностика. Внутриклеточные включения (тельца Гварниери). Специфическая профилактика оспы и ее роль в глобальной ликвидации инфекции. Вирус осповакцины, его происхождение и использование в генной инженерии.

2. Коронавирусы (семейство Coronaviridae). Общая характеристика. Роль в патологии человека. Лабораторная диагностика.

Вирусологическая диагностика острых респираторных вирусных инфекций и гриппа

Грипп – это острое инфекционное заболевание, протекающее с выраженной общей интоксикацией и поражением респираторного тракта, возбудителями которого являются РНК-содержащие вирусы семейства Ortho-myxoviridae (род Influenzavirus, типы А, В и С).

Возбудителями ОРВИ являются разнообразные многочисленные вирусы (более 200), вызывающие у людей катар верхних дыхательных путей с различной степенью интоксикации. Наиболее часто ОРВИ вы­зывают вирусы парагриппа, аденовирусы, реовирусы, коронавирусы, риновирусы, энтеровирусы,.

Лабораторная диагностика гриппа и ОРВИ состоит из экспресс-методов, выделения вируса, серологического исследования и метода генодиагностики (ПЦР) - схема 19.

Материалами для исследования при гриппе служат смывы из носоглотки, отде­ляемое слизистой оболочки носа, кро­вь, спинномозговая жидкость, трупный материал. При ОРВИ, вызванных вирусами парагриппа, РС вирусом, корона-, рео- и аденовирусами, исследуемым материалом являются носоглоточные смывы и отделяемое слизис­той оболочки задней стенки глотки, взятое ватным тампоном. Адено-, энтеро- и реовирусы удается обнаружить в крови, моче, фекалиях, трупном материале, а энтеровирусы в спин­номозговой жидкости.

Схема 19. Вирусологическая диагностика гриппа и ОРВИ

Материал для исследования:смывы из носоглотки, отде­ляемое слизистой оболочки носа, кро­вь, спинномозговая жидкость, трупный материал

Вирусологический метод: заражение РКЭ, культур клеток. Индикация вирусов: РГА, ЦПД, РИФ, Р.гемадсорбции. Идентификация:РТГА, РСК, РН, ИФА, РТГадс

Серологический метод: определение антител в парных сыворотках крови больных гриппом с помощью РСК, РТГА, ИФА, РРГ, РН.

Генодиагностика: ПЦР.

Экспресс-диагностика: РИФ, РНОГА, ИФА – выявление вирусных антигенов в исследуемом материале

Экспресс-диагностика направлена на выявление в исследуемом материале антигенов вирусов

Экспресс-диагностика гриппа и ОРВИ основана на выявлении антигенов вирусов с помощью прямой и непрямой РИФ. Положительная реакция характеризуется наличием в клетках эпителия скоплений антигена вируса с ярким зеленым свечением. Реже применяются РОНГА и ИФА.

Выделение вируса при гриппе проводится на РКЭ или на культуре клеток (почек обезьян, фибробластов эмбриона человека или кур; в последние годы используется культура клеток легких собаки - MDSK, обладающая высокой чувствительностью к вирусу гриппа). Поскольку с 4 дня болезни содержание вируса гриппа в организме резко снижается, вирусологическое исследование необходимо выполнять в первые дни инфекции.

Исследуемый материал, обработанный антибиотиками, вводят по 0,2 мл 10—11-днев­ным куриным эмбрионам в полость амниона и аллантоиса. После инкубации эмбрионов в течение 3-4 дней при температуре 37⁰ С, их вскрывают и аллантоисную жидкость отсасывают шприцем или пастеровской пипеткой, амниотическую — шприцем с короткой иглой. Индикацию вируса гриппа в указанных жидкостях проводят с помощью РГА с 1% взвесью куриных эритроцитов. Индикацию вируса в культуре клеток осуществляют по ЦПД, а также с помощью РИФ и РГадс с эритроцитами морской свинки.

При ОРВИ выделение вирусов обычно проводится на первично-трипсинизированных и перевиваемых культурах ткани различного происхождения. Наличие вируса в клетках культуры ткани определяют по его цитопатическому действию, которое у вируса парагриппа и РС вируса проявляется образованием синцития, а у аденовирусов и реовирусов - появлением зернистости и включений в цитоплазме.

Идентификацию вирусов гриппа и ОРВИ выполняют с помощью РТГА, РСК, РН, ИФА, РТГадс.

Серологический метод заключается в определении антител в парных сыворотках крови больных гриппом с помощью РСК, РТГА, ИФА, РРГ, РН. Нарастание титра антител в 4 и более раз подтверждает диагноз гриппа.

Генодиагностика. Для диагностики гриппа разработана ПЦР.