Реакция нейтрализации вирусов

Сероиндикация Серодиагностика

Сыворотка иммунизированного животного Сыворотка больного

видовая (типовая)

+ +

Исследуемый материал с Аллантоисная или культуральная жид-

предполагаемым наличием вируса кость с вирусом определенного вида

Введение в куриный эмбрион, культуру тканей, организм лабораторного

животного адекватно свойствам вирусного возбудителя

Учет реакции по прямой гемагглютинации, ЦПД или гибели животного

Обнаружение вируса в исследуемом материале Обнаружение антител к вирусу

10. Антитела (иммуноглобулины)

Антитела – специфические белки, образуемые активированными В-лимфоидными клетками в ответ на введение в организм антигена и способные вступать с ним в специфическую связь. Антитела появляются в сыворотке крови животных и людей после перенесения скрытой или явной инфекции, после иммунизации живыми (с ослабленной вирулентностью) или убитыми бактериями, риккетсиями, вирусами, токсинами, анатоксинами и другими антигенными веществами. В настоящее время установлено, что антитела представляют собой иммуноглобулины (Ig) сыворотки крови человека или животного. Иммуноглобулины могут быть мономерами либо полимерами, построенными из нескольких субъединиц. Каждая субъединица состоит из двух тяжелых (Н) и двух легких (L) полипептидных цепей. У каждого мономера или субъединицы имеются два антигенсвязывающих центра, Н- и L-цепи построены из нескольких доменов, каждый из которых состоит более, чем из 100 аминокислотных остатков.L-цепи построены из двух доменов. С-концевые домены уL-цепей одного типа одинаковы по строению. Это постоянная (константная) область (С).V-концевой домен уL-цепей варьирует у разных антител. Имен­но этот домен ответственен за построение уча стка связывания молекулы антитела. Ввиду разнообразия структуры его называют вариабельным (V) доменом. Вариабельность этого домена сосредоточена в основном в трех его участках, называемых гипервариабельными и определяющими комплементарность.

Валентности для взаимодействия с АГ

Fc-фрагмент

В этих участках содержатся аминокислоты, из которых строится антигенсвязывающий участок антитела. Три гипервариабельных участка перемежаются со значительно менее вариабельными участками, называемыми каркасными. Таких участков четыре.

Н-цепи молекул иммуноглобулина построены из одного концевогоV-домена и нескольких (обычно трех или четырех) С-доменов. В состав Н-цепей входит шарнирный участок, который, отделяя первый С-домен от второго, обуславливает гибкость молекулы.V-областьH-цепи аналогична V-областиL-цепи. Таким образом, антигенсвязывающий участок отдельной молекулы антитела (активный центр) образуют специализированные сегментыV-областей как Н-цепей, так иL-цепей. По своей структуре эти участки гомологичны антигенной детерминанте. Количество активных центров в молекуле иммуноглобулина определяет его валентность.

Н-цепи молекул иммуноглобулина делятся на несколько классов: μ, α, γ, ε и т.д. Полная молекула иммуноглобулина состоит из двух Н- и двух L-цепей. Обозначается молекула иммуноглобулина в зависимости от того, какую Н-цепь она содержит. Таким образом, существуют Ig M, IgG, Ig A, Ig E , Ig D – антитела.

Константные области Н-цепей, будучи различными у разных классов иммуноглобулинов, определяют особые биологические функции каждого класса антител.

Ig M – пентамер. Это самый активный иммуноглобулин, так как содержит 10 активных центров. Его молекулярная масса значительно превышает таковую других классов иммуноглобулинов.IgMобеспечивает первичный иммунный ответ; первым синтезируется в организме плода и первым появляется в сыворотке крови при инфекции и после иммунизации людей большинством антигенов; способствует фагоцитозу (увеличивает).

Ig G - классические антитела, имеют два активных центра. Они составляют основное количество (около 80 %) сывороточных иммуноглобулинов, образуются на высоте первичного иммунного ответа и при повторном введении антигена, то есть обеспечивают вторичный иммунный ответ; обладают высокой скоростью связывания с антигеном, особенно бактериальной или вирусной природы, нейтрализуют токсины, активируют фагоцитоз; участвуют в патогенезе сывороточной болезни и аутоиммунных заболеваний.IgGявляются единственным классом антител, проникающим через плаценту в организм плода.

Ig A– секреторные антитела, валентность от 4 до 6. В секретахIgAобычно содержатся в виде димеров. СекреторныеIgAвырабатываются лимфоидными клетками слизистых оболочек дыхательных путей, полости рта, кишечника, мочевыводящих путей, содержатся в молозиве, слюне, слезах, слизи кишечника, поте. Секреторные антитела имеют существенное значение при местном иммунитете.

Ig E– реагины, имеют два активных центра, обладают способ­ностью фиксироваться на клетках различных органов и тканей, несут основную ответственность за аллергические реакции (гиперчувствительность немедленного типа - ГНТ).

Ig D – антитела, функционирующие исключительно в качестве мем­бранных антигенных рецепторов В-лимфоцитов.

Молекулы каждого класса иммуноглобулинов могут существовать как в виде антител, так и в виде молекул, прикрепленных к клеточной мембране. В последнем случае они служат рецепторами В-лимфоцитов. Рецепторы подавляющего большинства В-лимфоцитов относятся к IgMиIgDклассам. Способность иммуноглобулинов функционировать в виде секретируемых белков и стабильных мембранных рецепторов обеспечивается структурными различиями в концевых участках этих молекул. В мембранной форме имеется гидрофобный участок, встроенный в мембрану, и короткий цитоплазматический участок. Именно эти химические особенности и обеспечивают сродство между рецепторами В-клетки и продуктом секреции тех антителообразующих клеток, которые из нее дифференцируются.