Сборник тезисов VI MMMK

VI Международный молодежный медицинский конгресс

ГЕНЫ СЕМЕЙСТВА HSM КОНТРОЛИРУЮТ ПРОЦЕССЫ МОДИФИКАЦИИ СТРУКТУРЫ ХРОМАТИНА

(научный руководитель - д.б.н. В.Г. Королев)

Петербургский институт ядерной физики им. Б.П. Константинова Гатчина, Российская Федерация

Введение. Обнаружение зависимости между эффективностью работы систем репарации, механизмами генетического контроля мутагенеза и чекпойнта и изменениями структуры хроматина позволяет максимально эффективно реализовать диагностику и лечение наследственных заболеваний человека. Модельным объектом в экспериментах выступают клетки дрожжей Saccharomyces cerevisiae.

Цель. Экспериментальным путем показать роль генов семейства HSM в процессах модификации и ремоделирования структуры хроматина.

Материалы и методы. Полный комплекс методов классической и молекулярной генетики, включая ПЦР и real-time ПЦР, получение, клонирование и секвенирование мутантных аллелей генов, создание векторов, флуоресцентных меток, использование антител.

Результаты. Гены HSM2, HSM3, HSM6 и HIM1 картированы и показано их участие в контроле механизмов пострепликативной и рекомбинационной репарации. Показана принадлежность белка Hsm2 к классу HMG-белков. Установлена аллельность гена HSM6 гену PSY4, кодирующему субъединицу комплекса PPH3 ядерной фосфатазы III, отвечающей за фосфорилирование гистона H2A и Rad53p – ключевого белка, регулирующего пул свободных дезоксирибонуклеотидов в клетке. Установлена шаперонная функция белка Hsm3 в сборке протеасомы, участие в качестве субъединицы в работе гистон ацетилтрансферазного комплекса HAT-B/NuB4, ацетилирующего гистоны H3 и H4, а также показано взаимодействие с Asf1p – основным белком, ответственным за чекпойнт и сборку хроматина после репарации ДНК. Установлено, что Him1p является субъединицей гистондеацетилазного комплекса SIN3 – функционального антагониста HAT-B/NuB4 – осуществляющего деацетилирование гистонов H3 и H4 по аналогичному паттерну.

Выводы. Понимание фундаментальных основ репарации ДНК и модификации структуры хроматина у низших эукариот позволяет более четко и комплексно вы-явить закономерности генетической стабильности ДНК человека.

В.Д. Назаров СИНТЕЗ БЕЛКА МЕТОДАМИ КЛАССИЧЕСКОГО И СОВРЕМЕННОГО КЛОНИРОВАНИЯ

(научный руководитель - к.м.н. Лапин С.В.)

Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова Санкт-Петербург, Российская Федерация

Введение. Рекомбинантные белковые молекулы нашли широкое применение в области медицины. Они активно используются не только в качестве фармакологических препаратов, но и в области лабораторной диагностики аутоиммунных заболеваний. Для синтеза белковых молекул используются различные методики клонирования.

Цель. Используя методы классического и современного клонирования, синтезировать рекомбинантные белки, пригодные для использования при диагностики аутоиммунных заболеваний

Материалы и методы. для синтеза рекомбинантных белков были использованы следующие системы: Gateway® Technology with Clonase® II - универсальная система клонирования, основанная на сайт-специфичной системе рекомбинации бактериофага λ, метод классического клонирования рестрикции и легирования, Gibson assembly.

Результаты. . С использованием системы Gateway® Technology with Clonase® II было синтезировано и очищено две белковые молекулы – snRPA и snRPC. Используя методы классического клонирования и Gibson assembly, были синтезированы два типа глиадина – полностью деамидированный и нативный.

Выводы. Использование данных методик позволяет в короткие сроки получать рекомбинантные белковые молекулы.

191

«Санкт-Петербургские научные чтения – 2015»

В.П. Величко, А.И. Шпичка

ИССЛЕДОВАНИЕ ВОЗМОЖНОСТЕЙ БИОТЕСТИРОВАНИЯ IN VITRO РОЗОВОГО И ЭРЕМОТЕЦЕВОГО МАСЕЛ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КУЛЬТУРЫ PARAMECIUM

CAUDATUM

(научный руководитель - проф. Е.Ф. Семёнова)

Пензенский государственный университет Медицинский институт Пенза,Российская Федерация

Введение. Розовое эфирное масло применяется в пищевой, химико-фармацевтической, парфюмернокосметической промышленности. В настоящее время разработана биотехнология эфирного масла на основе штаммов Eremothecium ashbyi Guilliermond 1935 и E. gossypii Kurtzman 1995, сходного по составу с розовым маслом.

Цель. Показать возможность сравнительного анализа биологического действия эфирных масел розы и эремотеция с помощью протозоотестирования in vitro.

Материалы и методы. Был проведен тест на токсичность с использованием культуры Paramecium caudatum, находящейся в фазе стационарного равновесия; проанализированы данные изменения подвижности и жизнеспособности инфузорий под воздействием эфирных масел, полученных из цветков розы и культуральной жидкости микромицета.

Результаты. При наблюдении поведения клеток P. caudatum в двукратных серийных разведениях масел было установлено, что мгновенная гибель инфузорий наступала при добавлении образцов в разведениях, меньших 1: 128 (концентрация эфирного масла в среде культивирования составляла более 1720 мкг/мл). Выявлено, что действие эремотецевого масла в отношении тест-культуры было сильно выраженным: гибель инфузорий по прошествии одной минуты составляла 100%. Жизнеспособность клеток тестируемого организма в разведениях масла розы болгарской была больше, чем в соответствующих разведениях масла розы крымской.

Выводы. Наибольшая токсичность эремотецевого масла в отношении P. caudatum отмечена в концентрациях, превышающих 860 мкг/мл и вызывающих гибель тест-культуры в течение 1 минуты; наименьшая - у болгарского масла в концентрациях, превышающих 930 мкг/мл и вызывающих 100% гибель инфузорий в течение часа.

Д.М. Бузанаков, А.А. Куликова ВЛИЯНИЕ ЛЕЧЕНИЯ МЕТФОРМИНОМ НА АКТИВНОСТЬ АДЕНИЛАТЦИКЛАЗЫ

В ГИПОТАЛАМУСЕ КРЫС С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2-ГО ТИПА

(научные руководители - д.б.н. А.О. Шпаков, к.б.н. К.В. Деркач)

Санкт-Петербургский государственный университет Санкт-Петербург, Российская Федерация

Введение. Метформин (МФ) является одним из основных препаратов для лечения сахарного диабета 2- го типа (СД2). В основе действия МФ лежит регуляция АМФ-зависимой протеинкиназы, которая связана с аденилатциклазой (АЦ), каталитическим компонентом аденилатциклазной сигнальной системы. Однако в настоящее время влияние МФ на АЦ почти не изучено.

Цель. Изучить влияние длительной терапии МФ самцов крыс с неонатальной моделью СД2 на активность чувствительной к моноаминам и пептидным гормонам аденилатциклазной системы в гипоталамусе.

Материалы и методы. Неонатальную модель СД2 вызывали обработкой пятисуточных крысят стрептозотоцином (75 мг/кг). Исследовали 3 группы крыс – диабетических животных (Д, n=6), диабетических животных, получавших в течение 2 месяцев МФ (200 мг/кг/день, Д+МФ, n=6), контроль (К, n=6). Активность АЦ определяли во фракциях плазматических мембран гипоталамуса крыс с помощью радиоизотопного метода и выражали в пмоль цАМФ/мин на мг белка.

Результаты. В плазматических мембранах, выделенных из гипоталамуса крыс группы Д, были снижены стимулирующие АЦ эффекты агонистов меланокортиновых рецепторов 3-го и 4-го типов и серотонина, а также ослаблены ингибирующие АЦ эффекты D2-агониста бромокриптина и агониста серотониновых рецепторов 1-го типа 5-нонилокситриптамина. В группе Д+МФ восстанавливались стимулирующие АЦ эффекты агонистов меланокортиновых рецепторов и ингибирующий эффект бромокриптина.

Выводы. Обнаруженный нами восстанавливающий эффект МФ на регуляцию АЦ агонистами меланокортиновых и D2-дофаминовых рецепторов в гипоталамусе крыс с СД2 может рассматриваться как один из центральных механизмов его антидиабетического действия.

Е.Б. Бойцова, В.А. Рузаева

192

VI Международный молодежный медицинский конгресс

МОДЕЛЬ ВОСПАЛЕНИЯ КЛЕТОК ГЕМАТОЭНЦЕФАЛИЧЕСКОГО БАРЬЕРА IN

VITRO

(научные руководители - проф. А.Б. Салмина, проф. Г.П. Мартынова, асс. А.В. Моргун)

НИИ молекулярной медицины и патобиохимии Красноярского государственного медицинского университета им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого Красноярск, Российская Федерация

Введение. Гематоэнцефалический барьер препятствует проникновению в мозг крупных молекул, клеток и метаболитов. При развитии нейровоспаления функция ГЭБ нарушается. Все изменения происходящие в пределах нейроваскулярной единицы (НВЕ).

Изучение нейровоспаления требует адекватной и воспроизводимой модели ГЭБ.

Цель. Разработать способ моделирования воспаления клеток ЦНС с использованием бактериального липополисахарида.

Материалы и методы. Модель нейровоспаления создана на основе трехклеточной модели нейроваскулярной единицы in vitro. Источник клеток - головной мозг 14-16 дневных эмбрионов крыс. Выделяли прогениторные клетки с дифференцировкой их в астроциты и нейроны, а также эндотелиоциты. Для моделирования нейровоспаления (опытная группа) клетки НВЕ подвергали воздействию липополисахарида (50 нг/мл, 48 часов). Контрольная группа - клетки, находившиеся в физиологических условиях. Чистота модели подтверждена иммуногистохимически.

Результаты. При определении экспрессии изучаемых маркеров установлено статистически значимое увеличение экспрессии GFAP (астроглиоз) и ИЛ -1b в опытной группе (за счет астроцитов). Зафиксирована разница пролиферативной активности клеток контрольной и опытной групп при влиянии ЛПС (p<0,05).Полученные результаты соответствуют литературным данным о нейровоспалении (World J Virol. 2015).

Выводы. Таким образом, предложенная нами модель может быть использована для изучения межклеточных коммуникаций, метаболического сопряжения, особенностей репарации, особенностей воздействия лекарственных препаратов на клетки нейроваскулярной единицы как основного структурнофункционального звена нейровоспаления.

Е.В. Чекалова ОНТОГЕНЕЗ ЛЁГКИХ

(научные руководители - доц., М.А. Корженевская, доц. А.В. Безденежных)

Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова Санкт-Петербург, Российская Федерация

Введение. В настоящее время болезни органов дыхания и пороки их развития широко распространены и часто имеют высокую летальность. Врожденные пороки органов дыхания обусловлены нарушением онтогенеза, поэтому формируя представление об особенностях их развития, можно судить о причинах возникновения заболеваний дыхательных путей.

Цель. Изучить закономерности и особенности развития легких в онтогенезе человека. Материалы и методы. Объекты исследования - фиксированные препараты легких, не дифференцированных по полу и возрасту, разделенные на две подгруппы: легкие 12 взрослых людей и 6

недышавших плодов. Проводились измерения линейных параметров легких: ширины, высоты, периметра и длины краёв легких.

Результаты. Отношения ширины легких к периметру имеют сходные значения у взрослых = 0,35 и у плодов = 0,30. Близкие значения также имеют соотношения высоты легких к ширине основания, равные 2,2 и 1,8. При соотношении длины переднего края легкого к ширине основания = 1 наблюдалась форма легкого, похожая на квадрат, а если соотношение > 1, то овал.

Выводы. Полученные результаты измерения линейных параметров органов дыхания взрослых и плодов свидетельствуют о том, что онтогенетическое развитие легких соответствует норме и у плодов не наблюдались врожденные пороки развития. Форма вентилируемых легких взрослых и невентилируемых легких плодов принципиально различна (овал и квадрат соответственно).

193

«Санкт-Петербургские научные чтения – 2015»

К.А. Погосян ИЗУЧЕНИЕ БИОКОНЦЕНТРИРОВАНИЯ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ РАСТЕНИЯМИ

ЭЙХОРНИИ – ВОДНОГО ГИАЦИНТА КАК МЕТОДА БИОЛОГИЧЕСКОЙ ОЧИСТКИ ВОДЫ

(научные руководители - доц. М.А. Корженевская, Л.Г. Тимофеева)

Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова Санкт-Петербург, Российская Федерация

Введение. Повышенные концентрации Zn, Pb, Cu оказывают негативное воздействие на организм человека. Основным источником поступления этих металлов в организм является недостаточно очищенная питьевая вода, в которой могут содержаться ионы тяжелых металлов в количествах, превышающих допустимые значения.

Цель. Изучение биоконцентрирования ряда тяжелых металлов (медь, цинк, свинец) растением эйхорнией как биологического метода очистки воды. Оценка жизнеспособности растений водного гиацинта в модельных условиях.

Материалы и методы. В работе смоделированы биосистемы с концентрациями солей тяжелых металлов в 20 раз превышающими значения ПДК ионов Zn2+, Pb2+, Cu2+ для водоемов культурно-бытового назначения. Концентрации тяжелых металлов (ТМ) в исследуемых растворах и в образцах листьев и корней каждого растения эйхорнии были измерены методом атомно-абсорбционной спектрометрии на 7, 14, 30 сутки эксперимента. С помощью колориметра Дюбоска фиксировали изменение содержания хлорофилла для выявления влияния ТМ на его количество. Методом Винклера определяли содержание растворенного кислорода в модельных системах.

Результаты. В модельных растворах наблюдалось снижение концентрации ТМ от двадцатикратного избытка до уровня ПДК за 14 суток для Pb и за 30 суток для Zn. Установлено, что губительными для эйхорнии оказались ионы Cu2+ в концентрации 20 мг/л, а угнетающе воздействовали ионы Zn2+ в такой же концентрации 20 мг/л. Эйхорния легко переносила меньшие концентрации Cu2+ -2 мг/л, а ионы Pb2+ в концентрации 0,2 мг/л не оказали практически никакого вредного воздействия на растение.

Выводы. В ходе данного эксперимента была подтверждена способность эйхорнии к биоконцентрированию тяжелых металлов как в своих листьях, так и в корнях. Содержание ТМ в органах растения значительно превышало концентрации этих металлов в водном субстрате. Оказалось, что динамика биоконцентрирования ТМ зависит от параметров исходного содержания ТМ в модельных условиях. При оценке жизнеспособности эйхорнии показано, что на физиологические параметры растений влияют только высокие концентрации металлов.

Л.Ф. Шарипова, О.В. Кочетова, Д.Ш. Авзалетдинова

АНАЛИЗ АССОЦИАЦИЙ ПОЛИМОРФНОГО ЛОКУСА RS17782313 ГЕНА MC4R

(научные руководители - проф. Т.В. Моругова, д.б.н. О.Е. Мустафина)

Башкирский государственный медицинский университет, Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук Уфа, Российская Федерация

Введение. В патогенезе сахарного диабета 2 типа (СД2) играют роль множество генетических факторов, а также особенности образа жизни индивидуума. Данные об ассоциации вариабельного участка rs17782313 гена рецептора меланокортина 4-го типа MC4R с СД2 в мировой литературе неоднозначны.

Цель. Провести анализ ассоциаций полиморфного маркера rs17782313 гена MC4R с сахарным диабетом 2 типа в Башкортостане.

Материалы и методы. В исследование было включено 626 человек. Из них 294 пациента с СД2 и 332 лица без клинических и лабораторных признаков диабета. ДНК выделяли из венозной крови методом фенольнохлороформной экстракции. Амплификацию участков ДНК проводили с помощью полимеразной цепной реакции. Статистическая обработка данных проводилась с использованием программы SNPStats. Показатель соотношения шансов (OR – odds ratio) и 95% доверительный интервал OR (95% ДИ) рассчитывали по J. Bland et al. (2000).

Результаты. Среди пациентов с СД2 по сравнению с группой контроля была выше частота генотипа C/T (42,5% и 21,7% соответственно, Р менее 0,0001), но ниже – частота генотипа Т/Т (53,4% и 72,9% соответственно, Р менее 0,0001). Частота генотипа С/С была одинакова в обеих группах (4,1% среди пациентов и 5,4% у здоровых лиц, Р=0,5512).

Выводы. Полиморфный участок rs17782313 гена MC4R ассоциирован с СД2 у жителей Башкортостана. Генотип С/Т маркирует повышенный риск СД2 (OR=2,68; 95% ДИ 1,88-3,81). Генотип Т/Т является протективным в отношении развития СД2 (OR=0,43; 95% ДИ 0,31-0,69).

Н.Г. Бухтуева

194

VI Международный молодежный медицинский конгресс

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ДИФФЕРЕНЦИРОВАННОГО РАКА ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И ЕГО МЕТАСТАЗОВ

(научные руководители - проф. С.П.Шевченко, к.б.н. В.А.Трифонов)

Новосибирский национальный исследовательский государственный университет Новосибирск, Российская Федерация

Введение. Рак щитовидной железы (РЩЖ) – наиболее часто встречающаяся злокачественная опухоль эндокринных органов, а в последние годы заболеваемость РЩЖ лидирует по ежегодным темпам прироста, который в последнее время составляет в среднем 3,5% в год.

Цель. Разработка методов определения генетической нестабильности в метастазирующих опухолях дифференцированного рака щитовидной железы.

Материалы и методы. На базе VI онкологического отделения ГБУЗ ГКБ № 1 был сформирован банк образцов пациентов (n=24), которым была проведена модифицированно-радикальная шейная диссекция. Полученные образцы были изучены на наличие мутации в гене BRAF (V600E) методом Real-Time ПЦР. Получены культуры клеток (n=4) из дифференцированного рака щитовидной железы, а также доброкачественных образований.

Результаты. В изученной выборке пациентов с папиллярной карциномой и распространенным метастатическим процессом частота соматической мутации BRAF составляет 40%. Проведено кариотипирование клеточных линий с использованием различных цитогенетических методов.

Выводы. В 55% случаев мутация BRAF была обнаружена у женщин в возрасте 28-35 лет, что может служить показанием для проведения диссекции центральной клетчатки шеи у данной возрастной категории. На полученных культурах клеток обнаружен феномен нарушения клеточного деления, что приводит к перестройкам, связанным с нарушением числа хромосом (анеуплоидия, полиплоидия).

О.А. Ганьжа АССОЦИАЦИЯ ПОЛИМОРФНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ, ОТВЕТСТВЕННЫХ ЗА

ЭНДОТЕЛИАЛЬНУЮ ДИСФУНКЦИЮ И ГИПЕРКОАГУЛЯЦИЮ, В РАЗВИТИИ ПРИВЫЧНОГО НЕВЫНАШИВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ

(научный руководитель - к.м.н. Е.А. Трифонова)

Научно-исследовательский институт медицинской генетики Томск, Российская Федерация

Введение. Привычное невынашивание беременности (ПНБ) является актуальной проблемой современного акушерства. В последнее время в качестве важнейших факторов ПНБ рассматривают генетически детерминированные эндотелиальные повреждения и тромбофилические состояния.

Цель. Оценить вклад наследственной вариабельности генов системы гемостаза и эндотелиальной дисфункции в развитие ПНБ у русских г. Томска.

Материалы и методы. Обследовано 253 пациентки с ПНБ и 339 женщин с благоприятным акушерским анамнезом (контрольная группа). У обследуемых была выделена ДНК и изучены частоты аллелей и генотипов 10-ти полиморфных вариантов (SNP) генов дисфункции эндотелия (ACE, AGT, PAI-1, NOS3), факторов свертывания крови (F5, F2), фолатного обмена (MTHFR) и факторов роста (VEGF, TP53). Генотипирование проводили методами ПЦР-ПДРФ и Real-time PCR. Для статистической обработки результатов использовали критерий Пирсона с поправкой Йетса, вычисляли отношение шансов (OR) и доверительные интервалы (95% CI).

Результаты. Из всех изученных SNP ассоциация с ПНБ была установлена для полиморфных вариантов гена VEGF: rs2010963 (p<0,001) и rs3025039 (p<0,001). В группе пациенток с ПНБ отмечались статистически значимое повышение частоты генотипа CC rs2010963 гена VEGF по сравнению с контрольной группой (OR=3.01;CI:1.47-6.18), а также генотипа CC rs3025039 (OR=1.74;CI:1.12-2.71). Таким образом, данные генотипы являются рисковыми в отношении развития ПНБ.

Выводы. По результатам исследования аллельные варианты rs2010963 и rs3025039 гена VEGF вносят вклад в развитие ПНБ в русской популяции г. Томска и могут быть учтены при проведении предгравидарной подготовки.

195

«Санкт-Петербургские научные чтения – 2015»

О.М. Арлашкина, Ф.Н. Филиппов, М.В. Лукиянов, С.И. Васильев МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЛИМФОИДНОГО ОКРУЖЕНИЯ СЕЛЕЗЕНКИ КРЫС С ВРОЖДЕННЫМ ИММУНОДЕФИЦИТОМ ПРИ ФОРМИРОВАНИИ ОПУХОЛИ ТОЛСТОЙ КИШКИ

(научные руководители - проф. Л.М. Меркулова, доц. М.Н. Михайлова)

Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова Чебоксары, Российская Федерация

Введение. Одними из главных факторов, участвующих в возникновении злокачественных опухолей, являются канцерогены. При этом иммунная система и растущая опухоль вступают в сложные, до конца не изученные взаимоотношения.

Цель. Основываясь на том, что риск развития злокачественных опухолей существенно возрастает на фоне иммунодефицитных состояний, целью исследования явилось изучение морфофункциональных изменений в селезенке потомства крыс с иммунодефицитной беременностью после введения канцерогена (1,2- диметилгидразина).

Материалы и методы. В качестве экспериментальной модели врожденного иммунодефицита была выбрана спленэктомия. Потомству интактных и спленэктомированных крыс вводили 1,2-диметилгидразин. Через 1 и 4 месяца после его введения с помощью иммуногистохимических и морфологических методов изучен клеточный состав лимфоидного окружения и структурные компоненты селезенки крыс.

Результаты. На фоне канцерогенеза у крыс обеих групп уменьшается площадь герминативных центров лимфоидных узелков селезенки, увеличивается число CD68+-, CD79a+-, S100+- и PCNA+-клеток. При этом у иммунодефицитного потомства изменения происходят уже через 1 месяц после введения канцерогена и более выражены.

Выводы. Таким образом, введение канцерогена на фоне врожденного иммунодефицита приводит к более выраженным изменениям морфологии и клеточного состава селезенки.

С.Н. Васильева, П.И. Гурьева, В.С. Каймонов ГЕНЕТИЧЕСКИЙ СКРИНИНГ НА НОСИТЕЛЬСТВО 3-М СИНДРОМА В ЯКУТСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ

(научный руководитель - д.м.н. Н.Р. Максимова)

Северо-Восточный федеральный университет им. М.К. Аммосова, Медицинский институт Якутск, Российская Федерация

Введение. 3-М синдром редкое аутосомно-рецессивное заболевание, сопровождающееся низкорослостью. Причиной является мутация в гене CUL7. Распространенность 3-М синдрома в Республики Саха (Якутии) составляет 5,79 на 100 тыс. населения.

Цель. Провести генетический скрининг на носительство З-М синдрома в якутской популяции. Материалы и методы. Материалом для исследования послужили образцы ДНК (N=246) популяции

якутов, взятые из банка ДНК УНЛ «Геномная медицина» Клиники МИ СВФУ с письменного информированного согласия пациентов. Амплификация областей генов, содержащих мутантные аллели, осуществлялась методом ПЦР с последующей рестрикцией Hinf I (Fermentas). Результаты амплификации оценивали в гельдокументирующей системе, в 3% агарозном геле.

Результаты. Всего было исследовано 246 образцов ДНК. В результате из 246 обследованных было выявлено 9 гетерозиготных носителей гена 3-М синдрома. Частота мутантного аллеля в якутской популяции составила 1,8%. Из них 3 мужчин (1.21%), 6 женщин (2,43%).

Выводы. Таким образом, частота мутантного аллеля в якутской популяции, ответственном за возникновение 3- М синдрома, составила 1,8%, что показывает высокий процент носительства 3-М синдрома среди якутской популяции.

С.Р. Каграманова СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИММУНОФЕРМЕНТНОГО И

НЕИНВАЗИВНОГО МЕТОДОВ ВЫЯВЛЕНИЯ ПИЩЕВОЙ АЛЛЕРГИИ У ДЕТЕЙ

(научный руководитель - доц. Е.П. Колеватых)

Кировская государственная медицинская академия Киров, Российская Федерация

Введение. В диагностике аллергических реакций важно выявить аллерген, причинную связь с клиническими проявлениями.

196

VI Международный молодежный медицинский конгресс

Цель. Оценка достоверности неинвазивного метода выявления пищевой аллергии у детей. Материалы и методы. Объектом исследования были 36 детей в возрасте 5 лет. Первую группу

составили дети с аллергической реакцией на овальбумин (16 человек). Группу сравнения представили ребята без клинических проявлений аллергических реакций (20 человек). Методом иммуноферментного анализа (ИФА) в крови устанавливали уровень общего и специфического иммуноглобулина Е. Разработанным нами иммунохроматографическим методом (ИХМ) определяли антитела в ротовой жидкости. Основу предполагаемого метода составляет реакция гидрозольной агглютинации, основанная на взаимодействии «антиген-антитело», выполняемая на хроматографическом носителе.

Результаты. У детей 1 группы в крови повышено содержание общего (80 – 140 кЕД/л) и специфического IgE. Показатели специфического IgE к аллергенам яичного белка в 1 группе: 17, 50 – 52, 49; во 2 группе: 0,35 кЕД/л. Предлагаемым нами методом подтверждено наличие аллергической реакции в 68,75% случаев (11 человек) по сравнению с результатами ИФА (100%).

Выводы. В сыворотке крови детей с аллергическими заболеваниями ИФА методом выявлен общий и специфический иммуноглобулин Е к аллергену куриного белка в 100% случаев; неинвазивным методом определены антитела к овальбумину (68,75%); в ротовой жидкости установлено наличие антител иммунохроматографическим методом у 9 детей (56,25%). Для скрининговых исследований пищевой аллергии возможно применение неинвазивного метода иммунохроматографии.

Т.И. Петрова БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ФУНКЦИИ ПЕЧЕНИ ПРИ НОРМАЛЬНОЙ И

ОСЛОЖНЕННОЙ БЕРЕМЕННОСТИ

(научные руководители - доц. М.А. Корженевская, д.м.н. И.Е. Зазерская, к.м.н. Н.А. Осипова)

Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова Санкт-Петербург, Российская Федерация

Введение. При поражении органов ферменты, аминотрансферазы, выходят из клеток в кровь. Уровень содержания трансфераз в крови можно использовать для лабораторной диагностики заболеваний и прослеживать эффективность лечения. В данной работе показано, что эффективность лечения холестатического гепатоза беременных разными способами определяется уровнем содержания трансаминаз в крови.

Цель. Провести сравнительную оценку разных методов лечения по определению уровня трансаминаз. Материалы и методы. В исследование были включены 20 женщин с холестатическим гепатозом

беременных средней степени. Контрольную группу составили 10 здоровых беременных женщин. В основной группе уровень трансаминаз и общего биллирубина определяли до начала терапии и после окончания курса лечения, беременные контрольной группы обследовались однократно. Беременные с ХГБ получали медикаментозную терапию -первая группа (n=10) или медикаментозную терапию в сочетании с эфферентной вторая группа (n=10).

Результаты. При физиологически протекающей беременности уровень трансаминаз не выходит за рамки референтных значений. При беременности, осложненной гепатозом, уровень АЛТ составил 329±34 Ед/л, АСТ-164±23 Ед/л, что превышало показатели у здоровых беременных в 10-20 раз (р<0.001). Во второй группе отмечалось более значимое снижение уровня трансаминаз чем в первой.

Выводы. Измерение трансаминаз в крови у женщин с холестатическим гепатозом средней степени тяжести является достоверным методом оценки эффективности лечения: комбинация медикаментозной терапии с эфферентными методами лечения является более эффективной, чем применение только медикаментозной терапии.

Т.П. Макалиш ОСОБЕННОСТИ СТРОЕНИЯ СЕЛЕЗЕНКИ КРЫС ПЕРИОДА ПРЕДСТАРЧЕСКИХ

ИЗМЕНЕНИЙ ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ КСЕНОГЕННОЙ ЦЕРЕБРОСПИНАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ

(научный руководитель - д.м.н., проф. В.С. Пикалюк)

Медицинская академия им. С.И. Георгиевского Симферополь, Российская Федерация

Введение. Изучение иммунодепрессивных состояний актуально в медицине в настоящее время. Среди возможных источников сырья для получения иммунотропных препаратов рассматривают цереброспинальную жидкость.

Цель. Выяснить структурные особенности белой пульпы селезенки крыс периода предстарческих изменений после введения им ксеногенной цереброспинальной жидкости.

197

«Санкт-Петербургские научные чтения – 2015»

Материалы и методы. Эксперимент проведен на крысах линии Wistar обоих полов возрастом 18 мес. Животным контрольной группы вводили физраствор, экспериментальной – ликвор каждые третьи сутки в дозировке 2 мл/кг живого веса.

Результаты. На поперечных срезах селезенки крыс предстарческого возраста обнаружено разрастание стромы за счет трабекул и стенок сосудов. В 52% лимфатических узелков (ЛУ) герминативные центры имеют слабое просветление, в остальных отсутствуют вовсе. Некоторые ЛУ рассасываются, четко определить в них можно только центральную артерию и периартериальную зону. После 3-хкратного введения ликвора в 54% ЛУ содержат центры размножения. Все зоны узелка хорошо определяются. Площадь ЛУ в контрольной группе составила 0,198±0,011мм2. После введения ликвора это значение уменьшилось до 0,147±0,011* мм2. После многократного введения ликвора крысам предстарческого возраста размеры ЛУ несколько увеличились, в основном за счет разрастания маргинальной зоны (площадь ЛУ выросла с 0,173±0,007 мм2 до 0,197±0,017* мм2). Относительные площади зон ЛУ оказались ниже контрольных значений, за исключением маргинальной зоны.

Выводы. Трехкратное введение ликвора приводит к незначительной активации иммунных функций селезенки. Многократное введение ликвора способствует угнетению белой пульпы селезенки.

Ф.Н. Филиппов АНГИОМАТИН- И ЭНДОСТАТИН-ПОЗИТИВНЫЕ СТРУКТУРЫ В КОЖЕ ЛЮДЕЙ В ОНТОГЕНЕЗЕ

(научный руководитель - доц. Н.Н. Голубцова)

Чувашский государственный университет им. И.Н. Ульянова Чебоксары, Российская Федерация

Введение. На протяжении жизни человека постоянно происходят процессы ангиогенеза. Известно, что такие функции эндотелиальных клеток, как пролиферация и миграция определяются ангиомотином, который рассматривается в качестве фактора, усиливающего ангиогенез. Эндостатин ингибирует пролиферацию эндотелиальных клеток, ангиогенез и рост опухолей.

Цель. Учитывая фундаментальное значение ангиомотина и эндостатина для ангиогенеза, исследование было посвящено изучению содержания этих веществ в кровеносных сосудах.

Материалы и методы. Ангиомотин- и эндостатин-позитивные структуры изучались непрямым иммуногистохимическим методом в коже плодов человека, умерших от различных причин антенатально на сроке 20-40 недель беременности и в образцах кожи, извлеченных при аутопсии у людей, умерших от различных причин в возрасте до 85 лет.

Результаты. Положительную реакцию на ангиомотин и эндостатин в коже имели клетки эпидермиса, фибробласты, потовые и сальные железы дермы, кровеносные сосуды. Ангиомотин-позитивные кровеносные сосуды выявлялись в образцах кожи всех возрастов и имели характерное коричневое окрашивание эндотелиальных клеток. Установлено возрастзависимое снижение содержания ангиомотина в кровеносных сосудах дермы при старении. Эндостатин-позитивные кровеносные сосуды выявлялись в образцах кожи всех возрастов. Установлено возрастзависимое увеличение содержания эндостатина в кровеносных сосудах дермы.

Выводы. Вероятно, изменение содержания ангиомотина, эндостатина и баланса между этими веществами оказывает негативное влияние на процессы ангиогенеза в коже человека в процессе старения.

Ю.В. Карпейчик, С.П. Козловская РАЗРАБОТКА ТЕСТА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЕДИНИЧНЫХ ОПУХОЛЕВЫХ

КЛЕТОК В КОСТНОМ МОЗГЕ ПРИ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

(научный руководитель - д.м.н. Н.Н. Антоненкова)

Республиканский научно-практический центр онкологии и медицинской радиологии им. Н.Н. Александрова Минск, Республика Беларусь

Введение. В структуре онкологической заболеваемости женщин рак молочной железы (РМЖ) устойчиво занимает первое место. Основной причиной смерти пациенток РМЖ являются отдаленные метастазы, поэтому неслучайно диагностика гематогенного распространения эпителиальных опухолей на ранних стадиях является одной из главных проблем онкологии.

Цель. Разработка тест-системы для диагностики единичных опухолевых клеток в костном мозге у пациенток РМЖ.

Материалы и методы. Опухолевая ткань и костный мозг 200 операбельных пациенток РМЖ, получивших специальное лечение в ГУ «РНПЦ онкологии и медицинской радиологии им. Н.Н. Александрова». Методом ПЦР в режиме реального времени в костном мозге определяли уровень экспрессии генов цитокератина 19 и маммоглобина с использованием реагентов фирмы AppliedBiosystems, США.

198

VI Международный молодежный медицинский конгресс

Результаты. Первый этап разработки теста был направлен на определение пороговой концентрации экспрессии генов цитокератин 19 и маммоглобина в костном мозге. Количество мРНК СК-19 и MAM анализировалось в триплетах с использованием среднего значения Сt. Результаты нормировали на эндогенный контроль (β-актин) и выражали по отношению к пороговому значению. Пороговые значения Ct определялись по результатам, полученным в ходе исследования косного мозга лиц, не имеющих опухолей молочной железы и других опухолей эпителиального происхождения.

Результаты проведенного исследования позволили установить, что до начала лекарственного лечения частота поражения костного мозга опухолевыми клетками пациенток РМЖ составила 27%.

Выводы. Таким образом, разработанный метод ОТ-ПЦР в режиме реального времени может быть использован для диагностики единичных опухолевых клеток в костном мозге у пациенток РМЖ.

199

«Санкт-Петербургские научные чтения – 2015»

Неврология

200