6. Якісне визначення кров'яних пігментів (бензидинова проба).

Бензидинова проба на гем гемоглобіну.

Принцип методу. Гемоглобін складається з 4-ох субодиниць, кожна з яких містить білок глобін і простетичну групу - гем, який надає крові червоного забарвлення. Виявлення гемінової групи грунтується на її здатності окислювати бензидин за допомогою перекису водню, утворюючи сполуку синього кольору, що поступово може переходоти в червоний. Ця дуже чутлива реакція використовується для виявлення навіть мінімальних кількостей крові в біологічних рідинах і широко застосовується в клінічній та судовій медицині.

Хід роботи. В пробірку вміщують 5 крапель 1% розчину крові, 5 крапель розчину бензидину, 2-3 краплі пероксиду водню і спостерігають за появою синього забарвлення.

7.Якісна реакція на фенілпіровиноградну кислоту (проба Фелінга).

Принцип методу. Фенілпіровиноградна кислота утворює з іонами трьохвалентного заліза комплексну сполуку, забарвлену в синьо-зелений колір.

Хід роботи. До 2 мл свіжовідфільтрованої сечі наливають 8-10 крапель 10 % розчину FeCl_3. При наявності в сечі фенілпіровиноградної кислоти через 30 - 60 секунд з'являється синьо-зелене забарвлення, яке поступово блідне і вицвітає через 5 - 30 хвилин в залежності від концентрації фенілпіровиноградної кислоти в сечі.

Цю пробу можна робити на фільтрувальному папері і на дитячій пеленці: смужку фільтрувального паперу змочують сечею, висушують на повітрі і наносять краплю 10% розчину хлорного заліза. Позитивна проба дає синьо-зелене забарвлення. Аналогічну пробу проробляють з сухою або мокрою пеленкою.

Література

1. Гонський Я.І., Максимчук Т.П. Біохімія людини. Тернопіль: Укрмедкнига, 2001. – 736с.

2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – 508с.

3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини. Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – 744с.

Заняття № 23

Тема: Загальний аналіз сечі.

Актуальність: Дослідження біохімічного складу біологічних рідин, зокрема сечі, має важливе значення для діагностики і корекції патологічних станів.

Навчальні цілі

Знати: Біохімічний склад сечі за умов норми та порушення його при захворюваннях різних органів.

Вміти: визначати фізико-хімічні властивості і біохімічні компоненти сечі та інтерпретувати одержані результати.

Самостійна позааудиторна робота

І. В зошитах для протоколів:

1. Дайте тлумачення понять: „поліурія”, „олігурія”, „анурія”, „гіперстенурія”, „гіпостенурія”,

„ ізостенурія”, „аміноацидурія”.

2. Охарактеризуйте аналіз сечі при наступних захворюваннях: цукровий діабет, нецукровий діабет, ревматизмі, ураженні паренхіми печінки, діареї, м'язовій дистрофії, нефритах.

ІІ. Підготуйте вихідні дані для оформлення протоколу: контрольна робота „Загальний аналіз сечі”.

Контрольні питання

1. Фізико-хімічні властивості сечі за умов норми та при патології.

2. Біохімічний склад сечі за умов норми та при патології.

3. Методи досліджень фізико-хімічних властивостей і біохімічного складу сечі.

4. Клініко-діагностичне значення загального аналізу сечі.

Самостійна аудиторна робота

Кожен студент самостійно проводить аналіз сечі і оформляє протокол за схемою:

Загальний аналіз сечі№ :

І. Фізико-хімічні властивості:

1. колір-

2. прозорість-

3. реакція сечі –

(визначають за допомогою лакмусового паперу).

ІІ. Визначення наявності білку, цукру, кетонових тіл, кров'яних пігментів, жовчних пігментів, фенілпіровиноградної кислоти (див. попередній протокол).

1. Визначення білка (з сульфосаліциловою кислотою).

Результат -

2. Визначення глюкози (реакції Тромера, Фелінга).

Результат –

3. Визначення кетонових тіл (проба Легаля).

Результат –

4. Кількісне визначення глюкози (за методом Альтгаузена).

Результат –

5. Визначення жовчних пігментів (проба Розіна).

Результат –

6. Визначення кров'яних пігментів (бензидинова проба).

Результат -

7. Якісна реакція на фенілпіровиноградну кислоту (проба Фелінга).

Результат-

Висновок