Вопрос 7. Близнецы. Механизм возникновения близнецов.

ОТВЕТ. Близнецы – это дети одной беременности. Они бывают однояйцовые и двуяйцовые.

Однояйцовые близнецы или монозиготные развиваются из одной зиготы. Зигота дробится на два бластомера и из каждого развивается самостоятельный организм. Эти организмы идентичны между собой (обладают одинаковыми генотипами), потому что

• дробление происходит по типу митоза,

• биологический смысл митоза: дочерние клетки идентичны по наследственной информации между собой и материнской клеткой.

	I.Зародышевые оболочки у эмбрионов отделены.
	II.Общий только хорион.
	III.Общая амниотическая полость

Рис. 2.Схематический рисунок, иллюстрирующий зависимость между временем разделения зародыша человека, образованием монозиготных близнецов и их взаимоотношениями с зародышевыми оболочками (Гилберт, 1991).

Особую группу среди монозиготных близнецов составляют необычные типы близнецов:

• двухголовые (обычно летальные случаи),

• каспофаги («сиамские близнецы»), связанные тканевой перемычкой шириной около 10 см, простирающиеся от конца грудины почти до пупка, и другие аномалии.

Рождение однояйцовых близнецов часто передается по женской линии.

Двуяйцовые или дизиготные близнецы развиваются из двух зигот. В результате оплодотворения двух разных яйцеклеток разными сперматозоидами, которые развиваются в матке одновременно. С генетической точки зрения они сходны между собой как обычные братья и сестры.

Рождение двуяйцовых близнецов часто встречается:

• у поздно родящих матерей;

• очень молодых матерей;

• принимавших долгое время химические противозачаточные средства.

Возможно, нарушение гормонального баланса у женщин этих трех групп может приводить к овуляции единовременно нескольких овоцитов II – порядка.

оплодотворение }зиготы Два близнеца в матке

Рис. 2. Образование моно- (1) и дизиготных близнецов (2).

Общая частота рождения близнецов составляет 1%, приблизительно 1/3 их приходится на монозиготных близнецов.

Вопрос 8. Биохимический метод.

ОТВЕТ. Биохимическим методом изучаются наследственные болезни обмена. Эти заболевания возникают в результате генных (точечных) мутаций, поэтому часто такие заболевания обмена называют генными болезнями. Для диагностики у больных изучают биологические жидкости: кровь, лимфу, мочу, околоплодную (амниотическую) жидкость.

Метод позволяет выявить:

• наследственные болезни обмена веществ,

• гетерозиготных носителей рецессивных генов.

Биохимические методы основаны на изучении активности ферментных систем (либо по активности самого фермента, либо по количеству конечных продуктов реакции, катализируемой данным ферментом). Они позволяют выявлять генные мутации – причины болезней обмена веществ (например, фенилкетонурия, серповидно-клеточная анемия).

С помощью биохимических нагрузочных тестов можно выявлять гетерозиготных носителей патологических генов, например, фенилкетонурии. Исследуемому человеку вводят внутривенно определенное количество аминокислоты фенилаланина и через равные промежутки времени определяют его концентрацию в крови. Если человек гомозиготен по доминантному гену (АА), то концентрация фенилаланина в крови довольно быстро возвращается к контрольному уровню (определяется до введения фенилаланина), а если он гетерозиготен (Аа), то снижение концентрации фенилаланина идет вдвое медленнее. Аналогично проводят тесты, выявления предрасположенности к сахарному диабету, гипертонии и др. болезням.

Показания к исследованию биохимическим методом наследственных болезней обмена:

1. непереносимость некоторых продуктов питания, лекарственных препаратов;

2. нарушение пищеварения;

3. рвота после приема пищи;

4. нарушение умственного развития;

5. нарушение психического статуса;

6. нарушение физического развития;

7. судороги, мышечная гипо- или гипертония, нарушение походки и координации движений;

8. нарушение пигментации покровов тела, желтуха, гипо- или гиперпигментация.

Принципы диагностики болезней обмена веществ:

• молекулярный:

  • массовый скрининг,

  • селективный скрининг;

• клеточный;

• организменный.

Массовый скрининг – выявление лиц с наиболее часто встречающимися наследственными заболеваниями среди здоровых людей (ФКУ, аномалии развития нервной трубки, болезнь Дауна, врожденный гипотиреоз, адреногенитальный синдром).

Селективный скрининг – проверка биохимических аномалий обмена у пациентов, у которых подозревают генные наследственные болезни.

Например, в районах с повышенной частотой встречаемости фенилкетонурии всем новорожденным проводят массовый скрининг для предварительной диагностики фенилкетонурии. Всем новорожденным в пеленки заворачивают полоску фильтровальной бумаги, смоченной 10% раствором FeCl ₃ т.е. химический экспресс метод. При положительной реакции от мочи (в ней присутствует фенилпировиноградная кислота) фильтровальная бумага окрашивается в зеленый цвет. Для окончательного подтверждения этого диагноза используют хроматографический анализ крови (селективный скрининг) для новорожденных с положительной реакцией на 10% раствором FeCl _3, дающий более точные результаты. Таким образом, скрининг программа предусматривает двухэтапное обследование.

Начиная с 70-х годов, скрининг тесты для выявления некоторых наследственных болезней обмена введены в ряде стран, в том числе и у нас в стране.

Условия для проведения скрининг программ:

1. заболевание часто встречается;

2. есть методы для коррекции этого наследственного дефекта;

3. качественные тесты массового скрининга должны быть недорогими, доступными, не давать ложноотрицательных ответов.

Массовый скрининг у нас обычно проводят для фенилкетонурии (частота в популяции 1/10000), галактоземии (частота в популяции 1/16000), муковисцедозу (1/2,5 – 3 тысячи), гипотиреозу (1/2000).

СКРИНИНГ - ТЕСТЫ.

1. Проба Фелинга (на фенилкетонурию). К 2-м мл мочи приливают 6 капель 10% раствора хлорного железа (FeCl). Наличие сине-зелёной окраски говорит о положительном результате пробы. Реакция положительная, если уровень фенилаланина больше 15 мл.

2. Проба Селиванова (на фруктозурию). Несколько кристаллов резорцина растворяют в 3 мл концентрированной HCl (реактив Селиванова). К 1 объёму реактива прибавляют 2 объёма мочи, смесь подогревают на водяной бане. При наличии фруктозы смесь быстро приобретает интенсивное окрашивание, которое оценивается как положительный результат, однако, при более длительном нагревании положительную реакцию может дать и глюкоза.

3. Проба на галактозу и лактозу. К 1 мл мочи добавляют 0,5 мл концентрированного раствора аммиака и 3 капли 10% раствора NaOH. Пробу нагревают до кипения. Проба считается положительной при проявлении ярко-желтой окраски.

4. Проба Сулковича (на кальций). К 1мл мочи добавляют 0,5 мл реактива. Состав реактива: 10,5 мл уксусной кислоты; 8,3 г щавелевой кислоты; 8,3 г сернокислого аммония на 500 мл воды. О количестве кальция судят по помутнению мочи (через 1-2 минуты).

5. Проба на мукополисахариды. 1-5 капель мочи наносят на фильтрованную бумагу. Высушивают. Полоска бумаги опускается в раствор толуидинового синего. Затем бумагу отмывают 10% раствором уксусной кислоты. Пурпурная окраска означает положительную реакцию. Реактив: 0,5 красителя растворяют в смеси из 200 мл ацетона и 50 мл дистиллированной воды.