Билет 42: Техника проведения исследования фекалий на трематодозы жвачных животных (метод последовательных смывов).

Метод последовательных смывов (метод осаждения, или седиментации) является основным методом диагностики трематодозов (фасциолез, дикроцелиоз, парамфистоматоз), возбудители которых паразитируют в желчных ходах печени и преджелудках. Метод основан на разности удельного веса яиц трематод (которые тяжелее воды) и органических остатков фекалий, что позволяет с помощью многократного отстаивания и смыва легких фракций получить чистый осадок с яйцами для микроскопии.

Основан на разностях плотностей яиц трематод и воды (яйца тяжелые -> тонут в воде)

Техника проведения: 5-10 гр фекалий, помещают в фарфоровую ступку, добавляют немного воды и с помощью фарфорового пестика растирают. Добавляют еще воды в 10-кратном объеме от объема фекалий. Перемешивают и процеживают в чистый лабораторный стакан через металическое сито. Оставляют на 10-15 минут. За это время формируется осадок и надосадочная жидкость (последнюю сливают). К осадку добавляют чистую воду. Такую процедуру выполняют столько раз, пока надрсадочная жидкость не станет чистой. Для исследования отбирают пробу с помощью пипетки с острым носиком со дна лабораторного стакана. Переносят воду на предметное стекло

Яйца фасциол (Fasciola hepatica) крупные (130-150 мкм), овальные, желтовато-коричневые, с крышечкой на одном полюсе. Яйца дикроцелиев (Dicrocoelium lanceatum) меньшего размера, асимметричные, темно-коричневые, полностью сформированные (с мирацидием внутри). Парамфистоматоз - Похожи на яйца фасциол - овальные с двухслойной оболочкой (Отличие в цвете - серые, желточные клетки располагаются в яйце рыхло).

Билет 43: Техника проведения исследования фекалий на цестодозы и нематодозы животных (метод флотации Фюллеборна).

Метод Фюллеборна — метод флотации с использованием насыщенного раствора хлорида натрия — предназначен для обнаружения яиц цестод и нематод, а также ооцист кокцидий, имеющих удельный вес меньше удельного веса насыщенного солевого раствора (1,18-1,20 г/см³). Принцип метода основан на всплывании легких гельминтологических элементов на поверхность жидкости после центрифугирования или отстаивания. Для приготовления раствора необходимо 400 гр соли на 1 л воды

Техника проведения метода: 5-10 гр фекалий, помещают в фарфоровую ступку, добавляют небольшое количество насыщенного раствора соли. Растираем Добавляем 100-200 мл раствора. Перемешиваем. Процеживаем через металическое сито в лабораторный стакан. Оставляем на 10-15 минут. За это время яйца всплывают на поверхность. С помощью проволочной петельки снимают пленку с поверхности из 3-5 разных мест, переносим на предметное стекло и микроскопируем

В препарате обнаруживают яйца стронгилят желудочно-кишечного тракта (овоидные, с тонкой оболочкой), яйца аскаридат (круглые, с толстой бугристой оболочкой), яйца цестод рода Moniezia (треугольной или квадратной формы с пирвителлярным аппаратом внутри), ооцисты эймерий. Для дифференциации яиц стронгилят часто требуется их культивирование до инвазионной личинки.

Билет 44: Техника проведения исследования фекалий на легочные стронгилятозы (метод Бермана-Орлова).

Метод Бермана-Орлова — специальный копроскопический метод, основанный на положительном термо- и гидротропизме личинок первой стадии (L1) легочных стронгилят. Принцип метода заключается в миграции живых личинок из фекалий, помещенных на сетку или марлю, в теплую воду, где они активно перемещаются и скапливаются в нижней части жидкости.

Фекалии отбирают только из прямой кишки, чтобы не попали в пробу личинки свободно живущих нематод

Применяется для диагностики стронгилоидозов ЖКТ и органов дыхания

Для проведения метода необходима конструкция Бермана-Орлова: штатив на который крепится стеклянная воронка, к ней - резиновая трубка с зажимом и к трубке - пробирка

Техника проведения: 5-10 гр фекалий, заворачивают их в марлевый мешок, погружают в воронку, заливают теплой водой (35-37 градусов). Оставляют 10-12 часов (КРС и лошади); 5-6 часов (МРС и мелкие домашние). В течении этого времени под действием тепла и влаги личинки выходят из фекалий, скапливаются в резиновой трубке. Зажим ослабевают и содержимое стекает в пробирку. С помощью пипетки из пробирки берут пробы

Упрощенная модификация метода Бермана-Орлова (по Щербовичу и Шильникову). Суть метода такая же, только мешочек с фекалиями либо подвешивают над лабораторным стаканом, либо погружают на дно, заливают теплой водой и оставляют на аналогичный период времени. После мешочек с фекалиями удаляют и с помощью пипетки набирают содержимое со дна стакана

Личинки диктиокаулид (Dictyocaulus) крупные, длиной 0,3-0,6 мм, имеют темный пищеварительный канал и светлый кишечник, активно двигаются. Личинки протостронгилид (Muellerius, Protostrongylus) мельче, имеют характерный дорсальный изгиб на хвостовом конце и стилет.