Билет 37: Определение вида чесоточного клеща.

Чесотка (акароз) у крупного рогатого скота вызывается тремя основными видами клещей: Sarcoptes scabiei var. bovis (саркоптоз), Psoroptes ovis (псороптоз) и Chorioptes bovis (хориоптоз). Определение вида основано на микроскопическом исследовании морфологии клеща, извлеченного из глубокого соскоба кожи или с поверхности кожи в очагах поражения, с использованием микроскопа при увеличениях (х40, х100, х400).

Диагностика начинается с макроскопической оценки клинической картины. Для саркоптоза характерны поражения на голове, шее, с последующим распространением; сильнейший зуд, образование корок и утолщение кожи. Псороптоз чаще начинается с мест с длинной шерстью (холка, спина, крестец); образуются мокнущие папулы, корки; зуд выраженный. Хориоптоз поражает дистальные части конечностей (пясть, плюсну, кожу вымени); зуд слабый или умеренный, наблюдаются корочки и шелушение.

Лабораторная диагностика: Отбирают поверхностные соскобы на границе здоровой и пораженной кожи (саркоптез - глубокие). Соскобы помещают на предметное стекло. 2 Группы методов исследования соскобов: Витальные - клещи в соскоке живые - К со скобу добавляют 2-3 капли керосина (обесцвечивание и размягчение кожных чешуек; метод Приселковой)/вазелинового масла/глицерина. Мортальные - клещи мертвые - К соскобу добавляют несколько капель 10% щелочи NaOH/KOH, соскоб подогревают, перемешивают, оставляют на 30-40 минут и исследуют под малым увеличением микроскопа.

Дифференциальная диагностика видов основана на ключевых морфологических признаках взрослых особей. Первый критерий — длина тела и форма: Sarcoptes scabiei имеет округлое тело длиной 0.2-0.5 мм, сероватого цвета; Psoroptes ovis — овальное тело длиной 0.5-0.8 мм; Chorioptes bovis — овальное тело длиной 0.3-0.5 мм. Второй критически важный критерий — строение конечностей. У всех видов четыре пары ног. У самок Sarcoptes две пары ног (передние) выходят за контур тела и оканчиваются длинными нечленистыми стерженьками с присосками на концах, а две задние пары ног короткие и оканчиваются длинными щетинками. У Psoroptes все четыре пары длинных ног выходят за контур тела, причем первые три пары у самок и все четыре у самцов оканчиваются трехчленистыми присосками (амбулакрами) на длинных членистых стерженьках. У Chorioptes ноги короткие, не выступают или слабо выступают за контур тела; присоски у самок имеются только на первой и второй парах ног, стерженьки присосков нечленистые.

Третий критерий — строение ротового аппарата. Sarcoptes имеет грызущий ротовой аппарат в виде подковообразных хелицер. Psoroptes и Chorioptes обладают колюще-сосущим ротовым аппаратом. Четвертый признак — локализация паразита: Sarcoptes обитает в толще эпидермиса, прокладывая ходы; Psoroptes и Chorioptes — на поверхности кожи, питаясь тканевой жидкостью.

Билет 38: Методика взятия глубокого соскоба кожи на саркоптоидозы.

Взятие глубокого соскоба кожи — основной диагностический метод при подозрении на саркоптоз и другие инвазии, вызываемые клещами, обитающими в толще эпидермиса (Sarcoptes, Notoedres).

Первый этап — подготовка. Необходимо выбрать свежий, не покрытый толстыми корками участок поражения, обычно на границе здоровой и поврежденной кожи. Классические места: края ушных раковин, локтевые складки, шея. Подготавливают стерильные инструменты: острый скальпель или лезвие, предметные и покровные стекла, пробирки, пипетку, 10% раствор едкого натра или калия, глицерин, микроскоп.

Второй этап — техника взятия соскоба. Левой рукой плотно сжимают кожную складку на выбранном участке для выдавливания клещей из глубоких ходов ближе к поверхности. Правой рукой берут скальпель, смоченный стерильным вазелиновым или глицериновым маслом (для лучшей адгезии материала), и производят энергичные соскабливающие движения до появления капиллярной крови или серозного экссудата. Соскоб должен быть глубоким и достаточно обширным (площадью около 1-2 см²). Собранный материал (эпидермис, кровь, лимфа) переносят скальпелем на предметное стекло или в пробирку с небольшим количеством физиологического раствора или 10% раствора едкого натра.

Третий этап — подготовка препарата для микроскопии. Материал с предметного стекла помещают в центр нового стекла. Добавляют 1-2 капли 10% раствора едкого натра или калия для мацерации и просветления органических остатков. Препарат осторожно подогревают над пламенем спиртовки 1-2 минуты, не доводя до кипения. Затем накрывают покровным стеклом и слегка придавливают для равномерного распределения материала. Альтернативный метод: материал из пробирки центрифугируют 5 минут, осадок переносят на стекло в капле глицерина и исследуют.

Четвертый этап — микроскопическое исследование. У самок Sarcoptes две пары ног (передние) выходят за контур тела и оканчиваются длинными нечленистыми стерженьками с присосками на концах, а две задние пары ног короткие и оканчиваются длинными щетинками. Sarcoptes имеет грызущий ротовой аппарат в виде подковообразных хелицер.

Билет 39: Методика исследования соскобов кожи на саркоптоидозы.

Билет 40: Методика взятия поверхностного соскоба кожи на саркоптоидозы.

Билет 41: Методика отбора проб фекалий для исследования на легочные гельминтозы жвачных животных.

Диагностика легочных гельминтозов (диктиокаулез, протостронгилез, мюллериоз и др.) основана на обнаружении личинок первой стадии (L1) в фекалиях животных с помощью специальных методов обогащения. Качество исследования напрямую зависит от правильности отбора, хранения и транспортировки пробы. Прижизненная диагностика проводится копроскопическими методами, преимущественно методом Бермана-Орлова. Основа метода — активный выход личинок из фекалий в теплую воду благодаря их положительному термотропизму и способности мигрировать.

Отбор пробы проводится от животных с клиническими признаками бронхопневмонии (кашель, истечения из носа, истощение) или выборочно от 20-30% поголовья для мониторинга. Проба берется индивидуально от каждого животного. У крупного рогатого скота и овец забор фекалий осуществляется непосредственно из прямой кишки ветеринарной перчаткой или с чистого пола, кормушки сразу после дефекации, избегая контакта с подстилкой, землей или водой.

Требования к пробе: объем не менее 10-15 граммов для КРС и 3-5 граммов для МРС. Консистенция должна быть нормальной, без признаков диареи или запора, так как это влияет на выход личинок. Собирают пробу в чистый, сухой, герметично закрывающийся пластиковый контейнер или целлофановый пакет с застежкой.

Условия хранения и транспортировки критичны. Идеально исследовать пробу в течение первых 2-3 часов после сбора. При необходимости хранения более 3 часов пробу помещают в холодильник при температуре +4...+6°C, но не более чем на 24 часа. Замораживание недопустимо, так как приводит к гибели личинок. Транспортировка осуществляется в термоконтейнере со хладагентами, избегая перегрева выше +25°C и прямого солнечного света.