Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Разработка способов приготовления биологических стимуляторов и эффективность их действия на продуктивность, интерьерные показатели и качество мяса сви

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
08.09.2026
Размер:
2 Мб
Скачать
51
после их идентификации методом J. O. Bartlet, J. L. Jwerson (1966).
Определение общей токсичности мышечной и жировой тканей проводили на приборе «Биотестер – 2» по реакции инфу­зорий, с использованием в качестве тест-объекта Paramecium caudatum. Оценку токсичности пробы проводили по относитель­ной разнице количества клеток в верхних зонах кювет в кон­трольной и анализируемой пробе.
Индекс токсичности определяли по формуле
:
Т = (Iср. контроль – Iср. опыт) : Iср. Контроль, где Iср. контроль, Iср. опыт – средние показания прибора для контрольных и анализируемых проб соответственно.
По величине индекса анализируемые пробы классифициро-
вались по степени их токсичности на три группы:
I – допустимая степень токсичности (0,00 < Т < 0,40); II – умеренная степень токсичности (0,41 < Т < 0,70); III – высокая степень токсичности (Т > 0,71). Экономическую эффективность
применения биологических
стимуляторов СИТР и СТ в свиноводстве определяли исходя из стоимости полученной продукции и всех затрат на её производ­ство.
Полученные экспериментальные данные были обработаны математическим методом вариационной статистики (Плохин­ский Н.А., 1969, 1978).
4.1. Способ приготовления биогенных стимуляторов из личинок трутневого расплода пчел (СИТР)
и взрослых трутней (СТ)
Биогенные стимуляторы СИТР и СТ относятся к лекарст­венным препаратам для повышения общей и специфической ре­зистентности организма животных, обладающих регуляторным влиянием на иммунную систему – иммуномодуляторам.
Одной из задач наших исследований явилось создание биогенного препарата на основе личинок трутневого расплода
52
пчел (СИТР), который способствует повышению гормонального фона, увеличению среднесуточного и абсолютного прироста жи­вой массы, лучшими показателями роста и развития, значитель­ному снижению количества павших животных. Обеспечивает приготовление эффективного биостимулятора, в который в каче­стве субстрата входит личинки трутневого расплода пчел. При этом использованы рациональные приемы, направленные как на снижение аллергенных
свойств субстрата с одновременным со­хранением его исходных свойств, и на получение целого ряда биологически активных веществ.
Технический результат, который может быть достигнут с помощью применения предлагаемого препарата, сводится к по­вышению общей и специфической резистентности организма, получению нового и доступного биостимулятора. Достижение технического результата осуществляется применением нового вида сырья –
личинок трутневого расплода пчел. Измельчение личинок, охлаждения их при температуре 2 – 4ºC в течение 4–6 дней, разбавление, термическую обработку (автоклавирование), фильтрацию, фасовку в стерильные флаконы и заключительную стерилизацию.
Для приготовления препарата соты с живым здоровым трутневым расплодом пчел выдерживались в холодильнике при температуре 2–4°С в течении 4–6 дней, в этот период происходила медленная гибель расплода
в соответствии с учением В.П. Филатова. Затем соты с расплодом вскрывали и отбирали личинки трутней одинакового размера, светло–серого цвета. Затем личинок трутней измельчали в стерильной лабораторной мельнице, разводили стерильным физиоло­гическим раствором хлорида натрия с концентрацией 0,9% в пропорции 1:1 и автоклавировали при температуре внутри котла
120°С и давлении
пара в рубашке 4 атмосферы в течении 1 часа. Затем массу отфильтровывали через 2 слоя марли затем через фильтровальную бумагу в стерильную мерную посуду, доводили физиологическим раствором до первоначального объема, расфасовывали при соблюдении правил асептики и антисептики в подготовленные стерильные флаконы и герметично закупоривали их, затем выдерживали в автоклаве при
53
температуре внутри котла 120°С и давлении пара в рубашке 4 атмосферы в течении в течении 20 минут.
Способ приготовления препарата из взрослых трутней состоит в следующем, взрослых трутней отлавливали через трутнеуловители в ульях затем помещали в холодильник при температуре 2–4
о
С в течение 2-х суток Затем трутней измельчали в стерильной лабораторной мельнице, разводили стерильным физиологическим раствором хлорида натрия с концентрацией 0,9% в пропорции 1:1 и автоклавировали при
температуре внутри котла 120°С и давлении пара в рубашке 4 атмосферы в течение 1 часа.
Затем массу отфильтровывали через 2 слоя марли затем
через фильтровальную бумагу в стерильную
мерную посуду, доводили физиологическим раствором до первоначального объема, расфасовывали при соблюдении правил асептики и антисептики в подготовленные стерильные флаконы и герметично закупоривали их, затем выдерживали в автоклаве
при температуре внутри котла 120°С и давлении пара в рубашке
4 атмосферы в течении в течении 20 минут.
4.2. Количественный и качественный состав
биогенных
стимуляторов СИТР и СТ
В 100 мл препаратов входит:
18–22 мл биологически активной массы;
78–82 мл раствора хлорида натрия 0,9%.
Биохимический анализ препарата имеет важное значение как показатель его качества. По данным многих ученых целый ряд соединений обладает высоким биологическим потенциалом, и могут обуславливать основную биостимулирующую функцию препарата. К таким
веществам, прежде всего, относятся амино­кислоты. Аминокислотный состав стимулятора СИТР показан в таблице 7.
54
Таблица 7 – Аминокислотный состав стимулятора СИТР
Аминокислоты мг%
Заменимые Аспарагиновая кислота 16 Серин 8 Глютаминовая кислота 41 Аланин 12 Тиразин 6 Всего 83
Незаменимые Трианин 7 Глицин 13 Валин 9 Метианин 1 Изолейцин 11 Лейцин 11 Фенилаланин 4 Гистидин 6 Лизин 10 Аргинин 6 Всего 78
Для характеристики биологической ценности данного пре­парата, пользуются таким понятием как аминокислотный ин­декс, который характеризует аминокислотную полноценность, он равен соотношению незаменимых аминокислот к заменимым.
В биологически полноценных веществах этот показатель колеблется в пределах 1, аминокислотный индекс стимулятора СИТР = 78/83=0,94. В препарате СИТР содержится следующие гормоны (таб­лица 8).
55
Таблица 8 – Содержание гормонов в препарате СИТР
Наименование гормонов Количество Ат к ТГ, Мед/мл 0,09 ФСГ (фолликулостимулирующий гормон), мМЕ/мл
1,7
Свободный Т4 (L-тироксин), пмоль/л 0,1 ЛГ (лютенизирующий гормон), мМЕ/мл 2,5 Прогестерон, нмоль/л 9,5 Тестостерон, нмоль/л 14,5 Корнизол, нмоль/л 0,01 Пролактин, мМЕ/мл 75,0 СТГ (соматотропный гормон), мМЕд/л 12,0 ДГЭАс (дегидроэпиандростерон), мкг/мл 0,1 АКТГ (адренокортикотропный гормон), пг/мг 1,0
Содержание ферментов, микроэлементов и витаминов в биологических стимуляторах СТ и СИТР представлено в табли­це 9.
Исследования показали что в стимуляторе СИТР содержит­ся на 5,0 г/л больше общего белка, чем в стимуляторе СТ. По ак­тивности ферментов переаменирования стимулятор СТ превос­ходит препарат СИТР: по АЛТ – на 12 ИЕ/л, а по АСТ – на 24 ИЕ/л. По содержанию микроэлементов и витаминов существен­ных различий между препаратами не наблюдается.
Интерес к различным биогенным стимуляторам проявлялся всегда и не снижается он и в настоящее время.
Нами разработаны способы приготовления новых биологи­ческих стимуляторов на основе личинок трутневого расплода пчел (СИТР) и на основе взрослых
трутней (СТ).
Одной из задач наших исследований явилось изучение ко­личественного и качественного состава этих стимуляторов.
56
Таблица 9 – Содержание ферментов, микроэлементов, витаминов в биологических стимуляторах СТ и СИТР
Показатель
Наименование
биостимулятора
СТ СИТР
Общий белок, г/л 16,2 21,2
Ферменты
АЛТ (аланинаминотрансфераза),
ИЕ
26 14
ГГТ (γ-глутамилтрансфераза), ИЕ/л 10 11
АСТ (аспартатаминотрансфераза),
ИЕ
255 231
Микроэлементы
Кальций, ммоль/л 9,58 11,38
Фосфор, ммоль/л 8,24 7,21 Магний, ммоль/л 3,69 2,35
Витамины А (ретинол), мкг/г 0,024 0,031 В1 (тиамин), мкг/г 0,84 0,112
В2 (рибофлавин), мкг/г 1,44 1,23
D (холикальциферол), мкг 0,0156 0,0121
При масс-спектрометрическом исследовании химического состава препаратов CИTР и CT было установлено, что основная доля компонентов приходится на высшие жирные кислоты и их эфиры, многоатомные спирты и гетероциклические соединения.
Перечень соединений, обнаруженных в обоих препаратах СИТР и CT, представлен в таблицах 10 и 11.
57
Таблица 10 – Результаты качественного и количественного масс­cпектрометрического анализа стимулятора СИТР
п/
п
Название химического
соединения
Класс соедине-
ния
Количест­во, %
1
(3
метил–оксиран–2–ил)
метанол
Спирты
0,26
2 3–метилгексанол–2 Спирты 0,76
3
(2
метоксиэтокси)–этен Произв.
неп
р
ед.УВ
0,77
4
1
метоксиоктан Произв.
п
р
ед.УВ
2,25
5
3
этокси–1,2–пропандиол Многоатомный
спи
р
т
1,93
6
Глицерин Многоатомный
спи
р
т
10,24
7
2,5
диметил–4–гидрокси
3(2Н
)
– фур
анон
Гетероцикл
2,56
8
1
нитрозо–2
азетидинкарбоксиловая ки-
слота
Гетероцикл
1,21
9
2,3
дигидро–3,5
дигидрокси–6–метил–4Н–
пи
р
ан–4–он
Гетероцикл
13,44
10
Формилтриметилмочевина Амид угольной
кислоты
11 Тиофен 1,1 12 3–метокси–1–пропанамин Амины 1,7
13
Бутандиовая кислота Карбоновые
кислоты
1,21
14 N,N–диметилпропанамид Амиды 3,67 15 2–этилхинолин Гетероцикл 1,08
16
Цис(+)
–2–
(1,1
диметилентил)–3–окса–1–
азабицикло[3.2.0]гептан–4–
он
Гетероцикл
0,68
58
Продолжение таблицы 10
20
Цис
–3–
децен Непредельный
УВ
1,4
21
1
пипериденилокси–4
амино–2,26,6–тетрометил
Гетероцикл
3,35
22
Тетрадекановая кислота Карбоновая
(жирная) кисло-
та
0,43
23
2,2,3
триметил–3
циклопентен–1–
ацетальдегид
Производные
уксусного аль-
дегида
1,21
24
(Z)
–2–
этил–3
метилдиметиловый1 эфи
р
Липид
2,53
25
Гексагидро
–3–(2–
метилпропил)–пироло[1.2–
a]пи
р
озин–1,4–дион
Гетероцикл
2,7
26
5
изопропилиден–3,3
диметилдигидро
фур
ан–2–он
Гетероцикл
1,34
27
пирроло[1.2
a]пирозин–1,4
дионгексогидро–3–(2–
метилп
р
опил
)
Гетероцикл
2,7
28
5,10
диэтокси–2,3,7,8
тетрогидро–1–Н,6–Н дипи-
р
оло[1.2–a, 1', 2'
d
]пиразин
Гетероцикл
2,0
29
n гексадекановая кислота
(пальмитиновая)
Карбоновая
(жирная) кисло-
та
5,11
30
Этиловый эфир гексадекано-
вой кислоты
липиды
1,0
17 2
ацетоксиимидазол Гетероцикл 0,36
18
Метил
–β–D–
рибопиронозид Гетероцикл 5,9
19
Эфир 5
этил–L
глутаминовой кислоты
Производное
аминокислоты
1,33
59
Окончание таблицы 10
31
Олеиновая кислота Карбоновая
(жирная) ки-
слота
7,32
32 Этил олеат Липиды 3,3
33
4
метил–5–(5–m–этил–1Н–пиразол
3–ил
)
–1Н
1,2,3–триазол
Гетероцикл
0,8
34
7
этил–3.7–дигидро–1,3–диметил
1Н–пурин–2,6–дион
Гетероцикл
1,65
35
4α, 5
цикло–А–омо–5α–холестан–6
он
Стероид
0,68
36 Стигмастан–3,5–диен Стероид 1,19
Таблица 11 – Результаты качественного и количественного Масс-cпектрометрического анализа стимулятора СТ
п/п
Название химического
соединения
Класс соединения Количе-
ство, %
1 Циклогексилизогексило-
вый эфир щавелевой ки-
слоты
Сложные эфиры
двухосновных орг.
кислот
1,28
2 Триметилпирозин Гетероцикл 1,54 3 Тетраметилтиомочевина Метильное произ-
водное серосодер-
жащего амида
у
гольной кислоты
2,74
4 2,6–диметилоктадиен–2,7
диол–1,6
Спирты много-
атомные (непре-
дельные
)
3,67
5 3–пирролидин–2
илпропионовая кислота
Гетероцикл 4,84
6 Пирроло [1.2–a] пирозин
1,4–дионгексогидро–3–(2–
метилп
р
опил
)
Гетероцикл 27,51
7 Диэтилдитиофосфиновая
кислота
Фосфорорг. соеди-
нения
3,19
8 L–лейци–N
циклопропилкарбонил–
метиловый э
фир
Гетероцикл
12,41
60
Окончание таблицы 11
Содержание пальмитиновой, олеиновой, стеариновой ки­слот (основные компоненты жиров) и их этиловых сложных эфиров составляет более 17% от общей массы препарата (СИТР), а в препарате (СТ) на их долю приходится не более 3%.
Содержание гетероциклических соединений, которые ис­пользуются в дочерних клетках для синтеза ДНК и РНК, состав­ляют почти 27%
в препарате (СИТР). В то же время содержание гетероциклических соединений в препарате (СТ) составляет бо­лее 72 %.
В состав препаратов также входит большое количество различных химических соединений, которые могут представлять интерес в плане синтеза белков, липидов, стероидов.
Ряд стероидов, обнаруженных в препаратах (СИТР) и (СТ), как например, стигмастан–3,5–диен и 4α,5–
цикло–А– омо–5α–холестан–6–он, содержание которых в препарате со­ставляет около 2%мас. и содержащийся в препарате (СТ) пир­роло[1.2–a]пиразин–1,4–дион,гексагидро–3–(фенилметил) – бо­лее 12 %, являются основой синтеза холестерина, холановых ки­слот (диспергируют липиды в кишечнике), половых и стероид­ных гормонов.
Следует отметить, что содержание химических ингреди-
ентов в
препарате (СИТР) составляет 36 наименований (с веро­ятностью совпадения более 35 % с имеющимися в каталоге при­бора и в международном каталоге соединениями), что значи­тельно больше, чем в препарате (CT), в котором всего 11 наиме­нований, что, вероятно, связано с не вполне свершившимися метаболическими процессами в личинках, по сравнению с
9 5,10
диэтокси–2,3,7,8
тетрогидро–1Н,6Н–
дипироло дипироло [1.2–a,
1', 2'
d
]пиразин
Гетероцикл 26,19
10 n– гексадекановая кислота
(
пальмитиновая
)
Карбоновая (жир-
ная
)
кислота
3,37
11 Пирроло [1.2–a] пирозин
1,4–дионгексогидро–3–
(ф
енил–метил
)
Стероиды 13,26
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]