Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Разработка способов приготовления биологических стимуляторов и эффективность их действия на продуктивность, интерьерные показатели и качество мяса сви
.pdf
51
после их идентификации методом J. O. Bartlet, J. L. Jwerson
(1966).
Определение общей токсичности мышечной и жировой
тканей проводили на приборе «Биотестер – 2» по реакции инфузорий, с использованием в качестве тест-объекта Paramecium
caudatum. Оценку токсичности пробы проводили по относительной разнице количества клеток в верхних зонах кювет в контрольной и анализируемой пробе.
Индекс токсичности определяли по формуле
:
Т = (Iср. контроль – Iср. опыт) : Iср. Контроль,
где Iср. контроль, Iср. опыт – средние показания прибора для
контрольных и анализируемых проб соответственно.
По величине индекса анализируемые пробы классифициро-
вались по степени их токсичности на три группы:
I – допустимая степень токсичности (0,00 < Т < 0,40);
II – умеренная степень токсичности (0,41 < Т < 0,70);
III – высокая степень токсичности (Т > 0,71).
Экономическую эффективность
применения биологических
стимуляторов СИТР и СТ в свиноводстве определяли исходя из
стоимости полученной продукции и всех затрат на её производство.
Полученные экспериментальные данные были обработаны
математическим методом вариационной статистики (Плохинский Н.А., 1969, 1978).
4.1. Способ приготовления биогенных стимуляторов
из личинок трутневого расплода пчел (СИТР)
и взрослых трутней (СТ)
Биогенные стимуляторы СИТР и СТ относятся к лекарственным препаратам для повышения общей и специфической резистентности организма животных, обладающих регуляторным
влиянием на иммунную систему – иммуномодуляторам.
Одной из задач наших исследований явилось создание
биогенного препарата на основе личинок трутневого расплода

52
пчел (СИТР), который способствует повышению гормонального
фона, увеличению среднесуточного и абсолютного прироста живой массы, лучшими показателями роста и развития, значительному снижению количества павших животных. Обеспечивает
приготовление эффективного биостимулятора, в который в качестве субстрата входит личинки трутневого расплода пчел. При
этом использованы рациональные приемы, направленные как на
снижение аллергенных
свойств субстрата с одновременным сохранением его исходных свойств, и на получение целого ряда
биологически активных веществ.
Технический результат, который может быть достигнут с
помощью применения предлагаемого препарата, сводится к повышению общей и специфической резистентности организма,
получению нового и доступного биостимулятора. Достижение
технического результата осуществляется применением нового
вида сырья –
личинок трутневого расплода пчел. Измельчение
личинок, охлаждения их при температуре 2 – 4ºC в течение 4–6
дней, разбавление, термическую обработку (автоклавирование),
фильтрацию, фасовку в стерильные флаконы и заключительную
стерилизацию.
Для приготовления препарата соты с живым здоровым
трутневым расплодом пчел выдерживались в холодильнике при
температуре 2–4°С в течении 4–6 дней, в этот период
происходила медленная гибель расплода
в соответствии с
учением В.П. Филатова. Затем соты с расплодом вскрывали и
отбирали личинки трутней одинакового размера, светло–серого
цвета. Затем личинок трутней измельчали в стерильной
лабораторной мельнице, разводили стерильным физиологическим раствором хлорида натрия с концентрацией 0,9% в
пропорции 1:1 и автоклавировали при температуре внутри котла
120°С и давлении
пара в рубашке 4 атмосферы в течении 1 часа.
Затем массу отфильтровывали через 2 слоя марли затем через
фильтровальную бумагу в стерильную мерную посуду, доводили
физиологическим раствором до первоначального объема,
расфасовывали при соблюдении правил асептики и антисептики
в подготовленные стерильные флаконы и герметично
закупоривали их, затем выдерживали в автоклаве при

53
температуре внутри котла 120°С и давлении пара в рубашке 4
атмосферы в течении в течении 20 минут.
Способ приготовления препарата из взрослых трутней
состоит в следующем, взрослых трутней отлавливали через
трутнеуловители в ульях затем помещали в холодильник при
температуре 2–4
о
С в течение 2-х суток Затем трутней
измельчали в стерильной лабораторной мельнице, разводили
стерильным физиологическим раствором хлорида натрия с
концентрацией 0,9% в пропорции 1:1 и автоклавировали при
температуре внутри котла 120°С и давлении пара в рубашке 4
атмосферы в течение 1 часа.
Затем массу отфильтровывали через 2 слоя марли затем
через фильтровальную бумагу в стерильную
мерную посуду,
доводили физиологическим раствором до первоначального
объема, расфасовывали при соблюдении правил асептики и
антисептики в подготовленные стерильные флаконы и
герметично закупоривали их, затем выдерживали в автоклаве
при температуре внутри котла 120°С и давлении пара в рубашке
4 атмосферы в течении в течении 20 минут.
4.2. Количественный и качественный состав
биогенных
стимуляторов СИТР и СТ
В 100 мл препаратов входит:
− 18–22 мл биологически активной массы;
− 78–82 мл раствора хлорида натрия 0,9%.
Биохимический анализ препарата имеет важное значение
как показатель его качества. По данным многих ученых целый
ряд соединений обладает высоким биологическим потенциалом,
и могут обуславливать основную биостимулирующую функцию
препарата. К таким
веществам, прежде всего, относятся аминокислоты. Аминокислотный состав стимулятора СИТР показан в
таблице 7.

54
Таблица 7 – Аминокислотный состав стимулятора СИТР
Аминокислоты мг%
Заменимые
Аспарагиновая кислота 16
Серин 8
Глютаминовая кислота 41
Аланин 12
Тиразин 6
Всего 83
Незаменимые
Трианин 7
Глицин 13
Валин 9
Метианин 1
Изолейцин 11
Лейцин 11
Фенилаланин 4
Гистидин 6
Лизин 10
Аргинин 6
Всего 78
Для характеристики биологической ценности данного препарата, пользуются таким понятием как аминокислотный индекс, который характеризует аминокислотную полноценность,
он равен соотношению незаменимых аминокислот к заменимым.
В биологически полноценных веществах этот показатель
колеблется в пределах 1, аминокислотный индекс стимулятора
СИТР = 78/83=0,94.
В препарате СИТР содержится следующие гормоны (таблица 8).

55
Таблица 8 – Содержание гормонов в препарате СИТР
Наименование гормонов Количество
Ат к ТГ, Мед/мл 0,09
ФСГ (фолликулостимулирующий гормон),
мМЕ/мл
1,7
Свободный Т4 (L-тироксин), пмоль/л 0,1
ЛГ (лютенизирующий гормон), мМЕ/мл 2,5
Прогестерон, нмоль/л 9,5
Тестостерон, нмоль/л 14,5
Корнизол, нмоль/л 0,01
Пролактин, мМЕ/мл 75,0
СТГ (соматотропный гормон), мМЕд/л 12,0
ДГЭАс (дегидроэпиандростерон), мкг/мл 0,1
АКТГ (адренокортикотропный гормон), пг/мг 1,0
Содержание ферментов, микроэлементов и витаминов в
биологических стимуляторах СТ и СИТР представлено в таблице 9.
Исследования показали что в стимуляторе СИТР содержится на 5,0 г/л больше общего белка, чем в стимуляторе СТ. По активности ферментов переаменирования стимулятор СТ превосходит препарат СИТР: по АЛТ – на 12 ИЕ/л, а по АСТ – на 24
ИЕ/л. По содержанию микроэлементов и витаминов существенных различий между препаратами не наблюдается.
Интерес к различным биогенным стимуляторам проявлялся
всегда и не снижается он и в настоящее время.
Нами разработаны способы приготовления новых биологических стимуляторов на основе личинок трутневого расплода
пчел (СИТР) и на основе взрослых
трутней (СТ).
Одной из задач наших исследований явилось изучение количественного и качественного состава этих стимуляторов.

56
Таблица 9 – Содержание ферментов, микроэлементов,
витаминов в биологических стимуляторах СТ и СИТР
Показатель
Наименование
биостимулятора
СТ СИТР
Общий белок, г/л 16,2 21,2
Ферменты
АЛТ (аланинаминотрансфераза),
ИЕ/л
26 14
ГГТ (γ-глутамилтрансфераза), ИЕ/л 10 11
АСТ (аспартатаминотрансфераза),
ИЕ/л
255 231
Микроэлементы
Кальций, ммоль/л 9,58 11,38
Фосфор, ммоль/л 8,24 7,21
Магний, ммоль/л 3,69 2,35
Витамины
А (ретинол), мкг/г 0,024 0,031
В1 (тиамин), мкг/г 0,84 0,112
В2 (рибофлавин), мкг/г 1,44 1,23
D (холикальциферол), мкг/г 0,0156 0,0121
При масс-спектрометрическом исследовании химического
состава препаратов CИTР и CT было установлено, что основная
доля компонентов приходится на высшие жирные кислоты и их
эфиры, многоатомные спирты и гетероциклические соединения.
Перечень соединений, обнаруженных в обоих препаратах
СИТР и CT, представлен в таблицах 10 и 11.

57
Таблица 10 – Результаты качественного и количественного массcпектрометрического анализа стимулятора СИТР
№
п/
п
Название химического
соединения
Класс соедине-
ния
Количество, %
1
(3
–
метил–оксиран–2–ил)
–
метанол
Спирты
0,26
2 3–метилгексанол–2 Спирты 0,76
3
(2
–
метоксиэтокси)–этен Произв.
неп
р
ед.УВ
0,77
4
1
–
метоксиоктан Произв.
п
р
ед.УВ
2,25
5
3
–
этокси–1,2–пропандиол Многоатомный
спи
р
т
1,93
6
Глицерин Многоатомный
спи
р
т
10,24
7
2,5
–
диметил–4–гидрокси
–
3(2Н
)
– фур
анон
Гетероцикл
2,56
8
1
–
нитрозо–2
–
азетидинкарбоксиловая ки-
слота
Гетероцикл
1,21
9
2,3
–
дигидро–3,5
–
дигидрокси–6–метил–4Н–
пи
р
ан–4–он
Гетероцикл
13,44
10
Формилтриметилмочевина Амид угольной
кислоты
–
11 Тиофен 1,1
12 3–метокси–1–пропанамин Амины 1,7
13
Бутандиовая кислота Карбоновые
кислоты
1,21
14 N,N–диметилпропанамид Амиды 3,67
15 2–этилхинолин Гетероцикл 1,08
16
Цис(+)
–2–
(1,1
–
диметилентил)–3–окса–1–
азабицикло[3.2.0]гептан–4–
он
Гетероцикл
0,68

58
Продолжение таблицы 10
20
Цис
–3–
децен Непредельный
УВ
1,4
21
1
–
пипериденилокси–4
–
амино–2,26,6–тетрометил
Гетероцикл
3,35
22
Тетрадекановая кислота Карбоновая
(жирная) кисло-
та
0,43
23
2,2,3
–
триметил–3
–
циклопентен–1–
ацетальдегид
Производные
уксусного аль-
дегида
1,21
24
(Z)
–2–
этил–3
–
метилдиметиловый1 эфи
р
Липид
2,53
25
Гексагидро
–3–(2–
метилпропил)–пироло[1.2–
a]пи
р
озин–1,4–дион
Гетероцикл
2,7
26
5
–
изопропилиден–3,3
–
диметилдигидро
фур
ан–2–он
Гетероцикл
1,34
27
пирроло[1.2
–
a]пирозин–1,4
–
дионгексогидро–3–(2–
метилп
р
опил
)
Гетероцикл
2,7
28
5,10
–
диэтокси–2,3,7,8
–
тетрогидро–1–Н,6–Н дипи-
р
оло[1.2–a, 1', 2'
–
d
]пиразин
Гетероцикл
2,0
29
n гексадекановая кислота
(пальмитиновая)
Карбоновая
(жирная) кисло-
та
5,11
30
Этиловый эфир гексадекано-
вой кислоты
липиды
1,0
17 2
–
ацетоксиимидазол Гетероцикл 0,36
18
Метил
–β–D–
рибопиронозид Гетероцикл 5,9
19
Эфир 5
–
этил–L
–
глутаминовой кислоты
Производное
аминокислоты
1,33

59
Окончание таблицы 10
31
Олеиновая кислота Карбоновая
(жирная) ки-
слота
7,32
32 Этил олеат Липиды 3,3
33
4
–
метил–5–(5–m–этил–1Н–пиразол
–
3–ил
)
–1Н–
1,2,3–триазол
Гетероцикл
0,8
34
7
–
этил–3.7–дигидро–1,3–диметил
–
1Н–пурин–2,6–дион
Гетероцикл
1,65
35
4α, 5
–
цикло–А–омо–5α–холестан–6
–
он
Стероид
0,68
36 Стигмастан–3,5–диен Стероид 1,19
Таблица 11 – Результаты качественного и количественного
Масс-cпектрометрического анализа стимулятора СТ
№
п/п
Название химического
соединения
Класс соединения Количе-
ство, %
1 Циклогексилизогексило-
вый эфир щавелевой ки-
слоты
Сложные эфиры
двухосновных орг.
кислот
1,28
2 Триметилпирозин Гетероцикл 1,54
3 Тетраметилтиомочевина Метильное произ-
водное серосодер-
жащего амида
у
гольной кислоты
2,74
4 2,6–диметилоктадиен–2,7
–
диол–1,6
Спирты много-
атомные (непре-
дельные
)
3,67
5 3–пирролидин–2
–
илпропионовая кислота
Гетероцикл 4,84
6 Пирроло [1.2–a] пирозин
–
1,4–дионгексогидро–3–(2–
метилп
р
опил
)
Гетероцикл 27,51
7 Диэтилдитиофосфиновая
кислота
Фосфорорг. соеди-
нения
3,19
8 L–лейци–N
–
циклопропилкарбонил–
метиловый э
фир
Гетероцикл
12,41

60
Окончание таблицы 11
Содержание пальмитиновой, олеиновой, стеариновой кислот (основные компоненты жиров) и их этиловых сложных
эфиров составляет более 17% от общей массы препарата (СИТР),
а в препарате (СТ) на их долю приходится не более 3%.
Содержание гетероциклических соединений, которые используются в дочерних клетках для синтеза ДНК и РНК, составляют почти 27%
в препарате (СИТР). В то же время содержание
гетероциклических соединений в препарате (СТ) составляет более 72 %.
В состав препаратов также входит большое количество
различных химических соединений, которые могут представлять
интерес в плане синтеза белков, липидов, стероидов.
Ряд стероидов, обнаруженных в препаратах (СИТР) и
(СТ), как например, стигмастан–3,5–диен и 4α,5–
цикло–А–
омо–5α–холестан–6–он, содержание которых в препарате составляет около 2%мас. и содержащийся в препарате (СТ) пирроло[1.2–a]пиразин–1,4–дион,гексагидро–3–(фенилметил) – более 12 %, являются основой синтеза холестерина, холановых кислот (диспергируют липиды в кишечнике), половых и стероидных гормонов.
Следует отметить, что содержание химических ингреди-
ентов в
препарате (СИТР) составляет 36 наименований (с вероятностью совпадения более 35 % с имеющимися в каталоге прибора и в международном каталоге соединениями), что значительно больше, чем в препарате (CT), в котором всего 11 наименований, что, вероятно, связано с не вполне свершившимися
метаболическими процессами в личинках, по сравнению с
9 5,10
–
диэтокси–2,3,7,8
–
тетрогидро–1Н,6Н–
дипироло дипироло [1.2–a,
1', 2'
–
d
]пиразин
Гетероцикл 26,19
10 n– гексадекановая кислота
(
пальмитиновая
)
Карбоновая (жир-
ная
)
кислота
3,37
11 Пирроло [1.2–a] пирозин
–
1,4–дионгексогидро–3–
(ф
енил–метил
)
Стероиды 13,26
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]
