Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Биохимия в животноводстве. Учебное пособие

.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
07.09.2026
Размер:
2 Мб
Скачать
Достаточно подробно изучены врожденные болезни, свя­занные с недостатком ферментов, катализирующих разложение гликогена. В результате нарушения этого процесса гликоген на­чинает накапливаться в тканях в избыточном количестве и пре­пятствует нормальному течению обмена веществ. Такие болезни получили название гликогенозов. В зависимости от того, какой именно фермент отсутствует, развиваются гликогенозы разного типа с преимущественным отложением гликогена в различных тканях (печени, мышцах, нервной ткани и др.).
Авитаминозы. Но бывают случаи, когда недостаток фер­мента в организме не связан с генетическими ошибками. Весь механизм биосинтеза белка может быть в полном порядке, и тем не менее, некоторые ферменты не синтезируются. Многие витамины представляют собой составные части ферментов – их небелковую группировку. Организм не умеет ее синтезиро­вать и должен получать в готовом виде с пищей. Если тот или иной витамин в пище отсутствует, то соответствующий фер­мент не может быть построен, и выпадает катализируемая им биохимическая реакция. Болезни, связанные с отсутствием ви­таминов, называют авитаминозами. Но по существу они явля­ются аферментозами.
Давно известна и когда-то была широко распространена болезнь «бери-бери» (сейчас ее называют полиневритом – множественным воспалением нервов, в некоторых слаборазви­тых странах она и теперь встречается нередко). Причина ее – отсутствие в пище витамина В1. Этот витамин – тиамин – в со­единении с фосфорной кислотой представляет собой небелко­вую часть фермента декарбоксилазы: декарбоксилаза разруша­ет карбоксильную группу (СООН) некоторых органических кислот, отщепляя от нее углекислоту (СО2). Для обмена ве­ществ в нервной системе особую роль играет декарбоксилиро­вание пировиноградной кислоты. В отсутствие витамина В1 декарбоксилаза образоваться не может, реакция прекращается и в нервной ткани наступают нарушения, типичные для поли­неврита: параличи конечностей, боли в мышцах, слабость, кон­трактуры:
31
СН3
С = О
– СО2
ЛТПФ-декарбоксилаза
СН3
С = О
Тяжелое заболевание – пеллагра – связано с отсутствием в
СООН
Пируват
Н
Ацетальдегид
пище витамина РР – никотиновой кислоты. При пеллагре наблю­даются воспаление кожи, нарушения деятельности кишечника и психические расстройства. Интересно отметить, что связь пел­лагры с недостатком никотиновой кислоты была установлена только в 1937 году. Сейчас мы знаем, что причина нарушений при авитаминозе РР заключается в том, что никотиновая кислота в форме никотинамида входит в состав кофермента – небелковой части большой группы окислительных ферментов – никотинамидных дегидрогеназ.
COOH
+ NH3
CONH2
трансаминаза
N
Никотиновая кислота
Естественно, что в отсутствие никотинамида фермент не работает.
Никотинамид
N
Следовательно, и здесь в случае пеллагры авитаминоз обернулся аферментозом.
По некоторым данным пеллагра вызывается отсутствием в пище не одной только никотиновой кислоты, но и еще одного со­единения – пиридоксина, известного под названием витамина В6. Считают, что нервные расстройства, наблюдаемые при пеллагре у людей, зависят именно от отсутствия пиродоксина. На протя­жении двух-трех последних десятилетий, главным образом бла­годаря исследованиям русского биохимика академика А. Е. Бра­унштейна и его школы, было показано, что производные пири­доксина в соединении с фосфорной кислотой входят в состав многих ферментов обмена аминокислот. Недостаток в пище пи-
32
ридоксина – вещества, не синтезируемого в организме животных, приводит к невозможности построить нуждающиеся в нем фер­менты, а это, в свою очередь, ведет к нарушениям обмена ве­ществ и к характерным заболеваниям.
Упомянем еще об одном витамине. Он называется витами­ном В2, а по химической природе представляет собой рибофла­вин. Авитаминоз В2 связан с тяжелыми поражениями кожи лица и глаз. Причина – недостаток фермента. Вспомним, что в цепи биологического окисления кроме никотинамидных дегидрогеназ участвует еще одна группа сходных с ними ферментов – флави­новые дегидрогеназы. Именно они не могут быть синтезированы в организме при отсутствии в пище рибофлавина, а их недостаток проявляется в форме тяжелого заболевания.
Мы рассмотрели несколько примеров, показывающих, что при самых различных авитаминозах причина заболевания – это отсутствие или недостаток ферментов, которые не могут быть синтезированы в организме из-за отсутствия необходимых строи­тельных деталей. Легко понять, что в большинстве случаев лече­ние такого рода заболеваний не составляет особого труда: доста­точно начать систематически давать больному нужный витамин в нужном количестве.
Отравления. Следует назвать еще одну форму заболеваний, связанную с нарушением ферментов. Это отравления ядами, из­бирательно угнетающими активность определенных ферментов. Дело в том, что избирательное угнетение фермента ничтожным количеством яда может произойти только тогда, когда яд специ­фически реагирует с активным центром фермента, т. е. с тем уча­стком его молекулы, который непосредственно отвечает за ката­литическую активность.
Такого рода ядов известно немало. Это, например, синильная кислота и ее соли, обладающие способностью связывать железо важнейшего дыхательного фермента – цитохромоксидазы. Выход из строя этого фермента приводит к почти мгновенной смерти.
Очень ядовиты многие соединения мышьяка, ртути, некото­рых других тяжелых металлов. Их токсическое действие заключа­ется в избирательном связывании тиоловых групп (SH-группы), являющихся активной частью многих ферментов. Высокое срод­ство ядов этого типа к тиоловым группам было использовано и
33
для лечения отравлений такими ядами. Фермент холинэстераза участвует в важнейшем физиологическом процессе – передаче нервного импульса. Угнетение холинэстеразы нарушает этот про­цесс, возникают многочисленные болезненные явления: слабость, параличи, судороги, затруднение дыхания и в конце концов на­ступает смерть. Среди фосфорорганических ядов нашлись такие, которые были малотоксичными для человека и животных, но в то же время необычайно ядовитыми для некоторых видов насеко­мых. Их стали использовать как химические вещества защиты растений от насекомых-вредителей. Некоторые из них применяют и для борьбы с бытовыми насекомыми: мухами, клопами, тарака­нами и др. Вероятно, всем известны такие средства, как хлорофос, дихлофос. Это и есть типичные представители фосфорорганиче­ских соединений – ингибиторов холинэстеразы.
Таким образом, многие заболевания имеют в своей основе нарушение активности ферментов. Причины этого нарушения разнообразны:
1) генетически обусловленная невозможность синтезировать ферментный белок вследствие мутации, изменившей код соот­ветствующего гена;
2) отсутствие в пище витаминов, являющихся незаменимы­ми составными частями ферментов;
3) попадание в организм ядовитых веществ.
Ферменты в диагностике
В последние годы определение активности ферментов в биологических жидкостях и тканях стало неотъемлемым средст­вом лабораторной диагностики различных заболеваний человека и животных. Измерение активности определенного фермента совершенно необходимо в тех случаях, когда причина заболевания стоит в дефиците этого фермента. Здесь результат лабораторного анализа прямо подтверждает или опровергает предположительный диаг­ноз. Такого рода определения необходимы при всех рассмотрен­ных нами формах дефицита ферментов: и при генетически обу­словленной недостаточности, и при авитаминозах, и при отравле­ниях, связанных с угнетением ферментов. Во всех этих случаях вопрос ставится прямо: имеется ли недостаточность фермента?
34
Производится лабораторный анализ и на прямой вопрос получа­ют прямой ответ.
Но этим далеко не ограничивается использование фермен­тов в диагностике. Гораздо чаще и нередко с очень большим ус­пехом лабораторное определение активности ферментов произ­водится для диагностики таких заболеваний, которые нельзя рас­сматривать как прямое следствие недостаточности того или ино­го фермента.
Для диагностических целей ферментативную активность определяют почти исключительно в крови, значительно реже в моче и лишь в отдельных случаях – в тканях. Но и тогда, когда речь идет о крови, то главным объектом исследования служит не цельная кровь, а ее жидкая часть – плазма. Получают плазму пу­тем отстаивания или чаще центрифугирования крови, свертыва­ние которой искусственно предотвращено. Тогда форменные элементы – клетки крови – оседают на дно пробирки, а над осад­ком собирается чуть мутноватая, с небольшим желтым оттенком плазма, которая и идет на анализ.
В плазме содержатся разные ферменты, и активность их, в зависимости от условий, меняется в широких пределах. Очень важно ясно представить себе, что в плазме ферменты не синтези­руются. Они образуются только в клетках разных тканей, а отту­да уже попадают в плазму, причем разные ферменты с неодина­ковой легкостью проникают через клеточные барьеры. Те, кото­рые совершают это легко, попадают в плазму в значительном ко­личестве, и, следовательно, в нормальных условиях их актив­ность в плазме будет высокой. Другие ферменты лишь с большим трудом выходят из неповрежденных клеток, активность таких ферментов в плазме здоровых людей низка. При заболеваниях может меняться как способность клеток вырабатывать ферменты, так и проницаемость клеточных мембран. Все это, естественно, отразится на ферментативной активности плазмы.
Не все ткани в одинаковой мере синтезируют разные фер­менты. Для печени, например, типична высокая активность одних ферментов, для почек или скелетных мышц – другая. Это явление называется органоспецифичностью ферментов. Иногда органос­пецифичность выражена очень четко: фермент содержится толь­ко в каком-нибудь одном органе и отсутствует в других.
35
Высокой органоспецифичностью обладают также многие изоферменты. Органоспецифичные ферменты – это, как правило, типичные тканевые ферменты. Они работают в клетках, катали­зируют очень важные для клеточного метаболизма реакции и лишь в очень небольшом количестве проникают в кровь. Поэто­му в нормальных условиях их активность в плазме крови невели­ка. Но стоит развиться какому-нибудь заболеванию, связанному с поражением определенного органа, как функция клеточных мем­бран этого органа будет нарушена, их проницаемость возрастет, и многие компоненты клеточного содержимого, в том числе фер­менты, перейдут в кровь. Это неизбежно приведет к повышению (иногда очень значительному) активности ферментов, специфич­ных для данного органа, в плазме.
Таким образом, можно по повышению активности некото­рых ферментов в плазме крови выявлять заболевания, связанные с нарушением функции совершенно определенных органов. В по­следние годы энзимологические методы получили очень широкое распространение для диагностики многих тяжелых заболеваний.
Тяжелое заболевание, при котором ферментативные измене­ния в плазме крови имеют огромное диагностическое значение и позволяют контролировать ход болезни, – это острый инфекцион­ный гепатит (воспаление печени). Повышение активности фер­ментов начинает выявляться на ранних стадиях болезни, когда другие симптомы еще не выражены. Особенно быстро на пораже­ние печени при гепатите реагируют трансаминазы. Установлено, что повреждения всего лишь одной печеночной клетки из каждых 750 достаточно для значительного повышения активности аланин­трансферазы в плазме крови. Уровень трансаминаз в первые 2 – 3 недели заболевания иногда в 50 раз превышает норму.
Скелетные мышцы очень богаты ферментами, и поврежде­ние мышц, как правило, сопровождается повышением активности ряда ферментов в крови. Особенно выражено это при наследст­венной мышечной дистрофии.
Мы помним, что поджелудочная железа вырабатывает не­сколько весьма активных пищеварительных ферментов (трипсин, химотрипсин, амилазу, липазу), которые через выводной проток железы поступают в кишечник, где выполняют свою важную роль в пищеварении. При остром воспалении поджелудочной же-
36
лезы (панкреатите) проницаемость клеток нарушается и пищева­рительные ферменты поступают в кровь. Повышение активности амилазы в крови служит одним из ранних и надежных признаков заболевания острым панкреатитом.
Щелочная фосфатаза содержится во многих тканях, но больше всего ее в костях. При многих заболеваниях костной тка­ни активность этого фермента в крови повышается. Нередко ак­тивность щелочной фосфатазы повышается и при злокачествен­ных опухолях костей.
Во всех рассмотренных примерах диагностическим признаком болезни служило повышение активности ферментов в крови. Но бывает и так, что на наличие заболевания указывает не повышение, а, наоборот, снижение ферментативной активности. Так, при тяже­лых заболеваниях печени, например циррозе печени, активность хо­линэстеразы резко снижается. Это указывает на нарушение целост­ности гепатоцитов, не способных синтезировать белки.
Ферменты нередко используют для выявления и количест­венного определения в ткани и крови ядовитых веществ, особен­но тогда, когда такие вещества обладают способностью избира­тельно угнетать определенные ферменты: это синильная кислота и ее соли, многие токсичные фосфорорганические вещества и др. Ферментативные методы отличаются исключительно высокой чувствительностью и дают возможность обнаружить в тканях ни­чтожное количество яда, что имеет практическое значение для токсикологии и судебной экспертизы.
Уже давно некоторые ферменты применяют для так назы­ваемой заместительной терапии – для возмещения дефицита ферментов, возникающего при некоторых заболеваниях. Особен­но успешна такая терапия при нарушениях функции желудочно­кишечного тракта, связанных с недостаточной выработкой пище­варительных ферментов. Так, препараты пепсина применяются при некоторых формах гастрита (воспаления желудка) или пан­креатина – смеси пищеварительных ферментов поджелудочной железы – при заболеваниях, вызванных недостаточным синтезом этих ферментов.
С успехом применяют ферменты в тех случаях, когда лече­ние требует разрушить накопившиеся в большом количестве бел­ковые образования, мешающие нормальному функционированию
37
тканей. Это бывает при ожогах, гнойных ранах, гнойно-воспа­лительных заболеваниях легких, когда в бронхах скапливается густая масса, препятствующая прохождению воздуха, и т. д. В таких случаях в качестве лекарства применяют протеолитические ферменты, приводящие к быстрому гидролизу белков и способ­ствующие рассасыванию гнойных накоплений.
Лечебное применение имеют и некоторые ферменты, гидро­лизующие сложные полисахариды, – лизоцим, гиалуронидаза. Эти ферменты повышают проницаемость тканей и клеточных мембран, что оказывает противовоспалительное действие, а пре­параты лизоцима, кроме того, разрушают оболочку некоторых болезнетворных бактерий и используются для лечения ряда ин­фекционных заболеваний.
В последние годы наметился очень перспективный путь при­менения ферментов для рассасывания сгустков крови, образовав­шихся внутри кровеносных сосудов. Это плазмин, содержащийся в крови, некоторые ферменты плесневых грибов и бактерий; фибри­нолитической активностью обладают также ферменты поджелу­дочной железы – трипсин и химотрипсин. На основе некоторых из этих ферментов и разных добавок созданы лекарственные фер­ментные препараты – стрептокиназа, стрептаза и другие.
2.2. Ферменты в животноводстве
Ферменты, или энзимы, представляют собой высокоспеци­фический класс веществ белковой природы, используемых жи­выми организмами для осуществления огромного разнообразия связанных химических реакций, лежащих в основе жизнедея­тельности организма.
Использование ферментов в сельском хозяйстве необычайно широко и разнообразно. Это находит свое естественное объясне­ние прежде всего в том, что сельское хозяйство имеет дело с жи­выми объектами – растениями и животными, а всякое проявление жизни основано на действии ферментов. Все актуальные задачи сельскохозяйственной практики, связанные с повышением про­дуктивности растениеводства и животноводства, так или иначе упираются в теоретические или прикладные проблемы энзимоло­гии. Прежде всего это относится к ветеринарии и зоотехнии. Так,
38
определение активности ферментов в крови сельскохозяйствен­ных животных способствует выявлению болезней и помогает контролировать их лечение, а добавление некоторых ферментных препаратов к кормам ускоряет прирост живого веса и улучшает качество мяса. Особенно эффективно использование ферментных препаратов в промышленном птицеводстве. Некоторые препара­ты протеолитических и других ферментов, приготовленные из плесневых грибов и бактерий, увеличивают яйценоскость кур, улучшают липидный обмен в печени и повышают интенсивность переваривания составных частей корма.
Специальный интерес представляет использование фермен­тов в кормопроизводстве. Этот важный аспект сельскохозяйст­венной практики лежит на стыке растениеводства и животновод­ства. Агрономы заботятся о том, чтобы получить полноценный растительный корм, содержащий все существенные составные части, необходимые для обеспечения потребностей животного организма. Животноводы составляют наиболее эффективные ра­ционы, определяют количество корма, необходимое для каждого вида животных в разных условиях, чередование дачи различных кормов, разрабатывают введение различных добавок и т. д.
Но между выращиванием кормовых растений и их скармли­ванием скоту лежит очень важный этап – собственно приготов­ление корма – переработка растений с целью повышения их ус­вояемости, сохранности, возможности запасания и др. Вот здесь роль ферментов оказалась особенно значительной. Ферментные препараты для производства кормов получают из плесневых гри­бов и бактерий. Для повышения усвояемости грубых кормов не­обходим фермент целлюлаза, гидролизующий клетчатку и повы­шающий возможность ее переваривания и усвоения, особенно, у таких животных, как свиньи, которые переваривают клетчатку хуже, чем крупный рогатый скот.
В последнее время ферментные препараты с успехом при­меняют для повышения эффективности силосования, улучшения химического состава и биологической ценности силосованных кормов.
Силосование кормов не ново, и сам процесс несложен: размельченную растительную массу закладывают в траншеи или ямы и герметически закупоривают. В этих условиях жи-
39
вущие на растениях бактерии начинают «трудиться» и пре-
HCl
вращают сахаристые вещества в органические кислоты, кото­рые консервируют корм, предохраняя его от порчи. Однако не все культуры пригодны для силосования. В бобовых и злако­вых слишком мало сахара, а при силосовании высокосахари­стых растений случается иногда, что корм перекисает и пор­тится. Значит, нужно регулировать бродильные процессы при силосовании, регулировать созревание силоса. Это может быть достигнуто внесением в силосную массу препаратов фермен­тов.
Ученые Казахской Академии наук решили эту проблему не путем введения изолированных препаратов ферментов, а добав­лением особых бактериальных заквасок, содержащих бактерии разных видов, способные вырабатывать необходимые ферменты. Внесенные в силосуемое сырье закваски выступают не только как биологические «регулировщики», но и обогащают корм ценными питательными веществами. Эти закваски удалось приготовить в хорошо сохраняющемся сухом виде, что значительно облегчает их применение.
С помощью соответствующих заквасок можно силосовать такие растения, которые без этого силосованию не поддаются, например солому и, что особенно важно, камыш.
2.2.1. Ферментные системы пищеварительного тракта сельскохозяйственных животных
Процессы переваривания кормов в желудочно-кишечном тракте животных протекают с участием ферментов класса гидро­лаз. В ротовой полости происходит механическая обработка кор­ма. Механическая обработка заключается в том, что корма из­мельчаются, обволакиваются слюной и транспортируются в же­лудочно-кишечный тракт. Химический гидролиз углеводов обу­словлен действием фермента амилазы, расщепляющей крахмал до мальтозы при рН 7,0-7,2. Измельченный и смоченный слюной корм поступает в желудок. У моногастрических животных кор­мовая кашица пропитывается желудочным соком и действие амилазы слюны прекращается. Свое гидролитическое действие
проявляют ферменты желудочного сока – пепсиноген пеп-
40