Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Биохимия в животноводстве. Учебное пособие
.pdf
Достаточно подробно изучены врожденные болезни, связанные с недостатком ферментов, катализирующих разложение
гликогена. В результате нарушения этого процесса гликоген начинает накапливаться в тканях в избыточном количестве и препятствует нормальному течению обмена веществ. Такие болезни
получили название гликогенозов. В зависимости от того, какой
именно фермент отсутствует, развиваются гликогенозы разного
типа с преимущественным отложением гликогена в различных
тканях (печени, мышцах, нервной ткани и др.).
Авитаминозы. Но бывают случаи, когда недостаток фермента в организме не связан с генетическими ошибками. Весь
механизм биосинтеза белка может быть в полном порядке, и
тем не менее, некоторые ферменты не синтезируются. Многие
витамины представляют собой составные части ферментов –
их небелковую группировку. Организм не умеет ее синтезировать и должен получать в готовом виде с пищей. Если тот или
иной витамин в пище отсутствует, то соответствующий фермент не может быть построен, и выпадает катализируемая им
биохимическая реакция. Болезни, связанные с отсутствием витаминов, называют авитаминозами. Но по существу они являются аферментозами.
Давно известна и когда-то была широко распространена
болезнь «бери-бери» (сейчас ее называют полиневритом –
множественным воспалением нервов, в некоторых слаборазвитых странах она и теперь встречается нередко). Причина ее –
отсутствие в пище витамина В1. Этот витамин – тиамин – в соединении с фосфорной кислотой представляет собой небелковую часть фермента декарбоксилазы: декарбоксилаза разрушает карбоксильную группу (СООН) некоторых органических
кислот, отщепляя от нее углекислоту (СО2). Для обмена веществ в нервной системе особую роль играет декарбоксилирование пировиноградной кислоты. В отсутствие витамина В1
декарбоксилаза образоваться не может, реакция прекращается
и в нервной ткани наступают нарушения, типичные для полиневрита: параличи конечностей, боли в мышцах, слабость, контрактуры:
31

СН3
С = О
– СО2
ЛТПФ-декарбоксилаза
СН3
С = О
Тяжелое заболевание – пеллагра – связано с отсутствием в
СООН
Пируват
Н
Ацетальдегид
пище витамина РР – никотиновой кислоты. При пеллагре наблюдаются воспаление кожи, нарушения деятельности кишечника и
психические расстройства. Интересно отметить, что связь пеллагры с недостатком никотиновой кислоты была установлена
только в 1937 году.
Сейчас мы знаем, что причина нарушений при авитаминозе РР
заключается в том, что никотиновая кислота в форме никотинамида
входит в состав кофермента – небелковой части большой группы
окислительных ферментов – никотинамидных дегидрогеназ.
COOH
+ NH3
CONH2
трансаминаза
N
Никотиновая кислота
Естественно, что в отсутствие никотинамида фермент не работает.
Никотинамид
N
Следовательно, и здесь в случае пеллагры авитаминоз обернулся
аферментозом.
По некоторым данным пеллагра вызывается отсутствием в
пище не одной только никотиновой кислоты, но и еще одного соединения – пиридоксина, известного под названием витамина В6.
Считают, что нервные расстройства, наблюдаемые при пеллагре
у людей, зависят именно от отсутствия пиродоксина. На протяжении двух-трех последних десятилетий, главным образом благодаря исследованиям русского биохимика академика А. Е. Браунштейна и его школы, было показано, что производные пиридоксина в соединении с фосфорной кислотой входят в состав
многих ферментов обмена аминокислот. Недостаток в пище пи-
32

ридоксина – вещества, не синтезируемого в организме животных,
приводит к невозможности построить нуждающиеся в нем ферменты, а это, в свою очередь, ведет к нарушениям обмена веществ и к характерным заболеваниям.
Упомянем еще об одном витамине. Он называется витамином В2, а по химической природе представляет собой рибофлавин. Авитаминоз В2 связан с тяжелыми поражениями кожи лица
и глаз. Причина – недостаток фермента. Вспомним, что в цепи
биологического окисления кроме никотинамидных дегидрогеназ
участвует еще одна группа сходных с ними ферментов – флавиновые дегидрогеназы. Именно они не могут быть синтезированы
в организме при отсутствии в пище рибофлавина, а их недостаток
проявляется в форме тяжелого заболевания.
Мы рассмотрели несколько примеров, показывающих, что
при самых различных авитаминозах причина заболевания – это
отсутствие или недостаток ферментов, которые не могут быть
синтезированы в организме из-за отсутствия необходимых строительных деталей. Легко понять, что в большинстве случаев лечение такого рода заболеваний не составляет особого труда: достаточно начать систематически давать больному нужный витамин в
нужном количестве.
Отравления. Следует назвать еще одну форму заболеваний,
связанную с нарушением ферментов. Это отравления ядами, избирательно угнетающими активность определенных ферментов.
Дело в том, что избирательное угнетение фермента ничтожным
количеством яда может произойти только тогда, когда яд специфически реагирует с активным центром фермента, т. е. с тем участком его молекулы, который непосредственно отвечает за каталитическую активность.
Такого рода ядов известно немало. Это, например, синильная
кислота и ее соли, обладающие способностью связывать железо
важнейшего дыхательного фермента – цитохромоксидазы. Выход из
строя этого фермента приводит к почти мгновенной смерти.
Очень ядовиты многие соединения мышьяка, ртути, некоторых других тяжелых металлов. Их токсическое действие заключается в избирательном связывании тиоловых групп (SH-группы),
являющихся активной частью многих ферментов. Высокое сродство ядов этого типа к тиоловым группам было использовано и
33

для лечения отравлений такими ядами. Фермент холинэстераза
участвует в важнейшем физиологическом процессе – передаче
нервного импульса. Угнетение холинэстеразы нарушает этот процесс, возникают многочисленные болезненные явления: слабость,
параличи, судороги, затруднение дыхания и в конце концов наступает смерть. Среди фосфорорганических ядов нашлись такие,
которые были малотоксичными для человека и животных, но в то
же время необычайно ядовитыми для некоторых видов насекомых. Их стали использовать как химические вещества защиты
растений от насекомых-вредителей. Некоторые из них применяют
и для борьбы с бытовыми насекомыми: мухами, клопами, тараканами и др. Вероятно, всем известны такие средства, как хлорофос,
дихлофос. Это и есть типичные представители фосфорорганических соединений – ингибиторов холинэстеразы.
Таким образом, многие заболевания имеют в своей основе
нарушение активности ферментов. Причины этого нарушения
разнообразны:
1) генетически обусловленная невозможность синтезировать
ферментный белок вследствие мутации, изменившей код соответствующего гена;
2) отсутствие в пище витаминов, являющихся незаменимыми составными частями ферментов;
3) попадание в организм ядовитых веществ.
Ферменты в диагностике
В последние годы определение активности ферментов в
биологических жидкостях и тканях стало неотъемлемым средством лабораторной диагностики различных заболеваний человека
и животных.
Измерение активности определенного фермента совершенно
необходимо в тех случаях, когда причина заболевания стоит в
дефиците этого фермента. Здесь результат лабораторного анализа
прямо подтверждает или опровергает предположительный диагноз. Такого рода определения необходимы при всех рассмотренных нами формах дефицита ферментов: и при генетически обусловленной недостаточности, и при авитаминозах, и при отравлениях, связанных с угнетением ферментов. Во всех этих случаях
вопрос ставится прямо: имеется ли недостаточность фермента?
34

Производится лабораторный анализ и на прямой вопрос получают прямой ответ.
Но этим далеко не ограничивается использование ферментов в диагностике. Гораздо чаще и нередко с очень большим успехом лабораторное определение активности ферментов производится для диагностики таких заболеваний, которые нельзя рассматривать как прямое следствие недостаточности того или иного фермента.
Для диагностических целей ферментативную активность
определяют почти исключительно в крови, значительно реже в
моче и лишь в отдельных случаях – в тканях. Но и тогда, когда
речь идет о крови, то главным объектом исследования служит не
цельная кровь, а ее жидкая часть – плазма. Получают плазму путем отстаивания или чаще центрифугирования крови, свертывание которой искусственно предотвращено. Тогда форменные
элементы – клетки крови – оседают на дно пробирки, а над осадком собирается чуть мутноватая, с небольшим желтым оттенком
плазма, которая и идет на анализ.
В плазме содержатся разные ферменты, и активность их, в
зависимости от условий, меняется в широких пределах. Очень
важно ясно представить себе, что в плазме ферменты не синтезируются. Они образуются только в клетках разных тканей, а оттуда уже попадают в плазму, причем разные ферменты с неодинаковой легкостью проникают через клеточные барьеры. Те, которые совершают это легко, попадают в плазму в значительном количестве, и, следовательно, в нормальных условиях их активность в плазме будет высокой. Другие ферменты лишь с большим
трудом выходят из неповрежденных клеток, активность таких
ферментов в плазме здоровых людей низка. При заболеваниях
может меняться как способность клеток вырабатывать ферменты,
так и проницаемость клеточных мембран. Все это, естественно,
отразится на ферментативной активности плазмы.
Не все ткани в одинаковой мере синтезируют разные ферменты. Для печени, например, типична высокая активность одних
ферментов, для почек или скелетных мышц – другая. Это явление
называется органоспецифичностью ферментов. Иногда органоспецифичность выражена очень четко: фермент содержится только в каком-нибудь одном органе и отсутствует в других.
35

Высокой органоспецифичностью обладают также многие
изоферменты. Органоспецифичные ферменты – это, как правило,
типичные тканевые ферменты. Они работают в клетках, катализируют очень важные для клеточного метаболизма реакции и
лишь в очень небольшом количестве проникают в кровь. Поэтому в нормальных условиях их активность в плазме крови невелика. Но стоит развиться какому-нибудь заболеванию, связанному с
поражением определенного органа, как функция клеточных мембран этого органа будет нарушена, их проницаемость возрастет, и
многие компоненты клеточного содержимого, в том числе ферменты, перейдут в кровь. Это неизбежно приведет к повышению
(иногда очень значительному) активности ферментов, специфичных для данного органа, в плазме.
Таким образом, можно по повышению активности некоторых ферментов в плазме крови выявлять заболевания, связанные
с нарушением функции совершенно определенных органов. В последние годы энзимологические методы получили очень широкое
распространение для диагностики многих тяжелых заболеваний.
Тяжелое заболевание, при котором ферментативные изменения в плазме крови имеют огромное диагностическое значение и
позволяют контролировать ход болезни, – это острый инфекционный гепатит (воспаление печени). Повышение активности ферментов начинает выявляться на ранних стадиях болезни, когда
другие симптомы еще не выражены. Особенно быстро на поражение печени при гепатите реагируют трансаминазы. Установлено,
что повреждения всего лишь одной печеночной клетки из каждых
750 достаточно для значительного повышения активности аланинтрансферазы в плазме крови. Уровень трансаминаз в первые 2 – 3
недели заболевания иногда в 50 раз превышает норму.
Скелетные мышцы очень богаты ферментами, и повреждение мышц, как правило, сопровождается повышением активности
ряда ферментов в крови. Особенно выражено это при наследственной мышечной дистрофии.
Мы помним, что поджелудочная железа вырабатывает несколько весьма активных пищеварительных ферментов (трипсин,
химотрипсин, амилазу, липазу), которые через выводной проток
железы поступают в кишечник, где выполняют свою важную
роль в пищеварении. При остром воспалении поджелудочной же-
36

лезы (панкреатите) проницаемость клеток нарушается и пищеварительные ферменты поступают в кровь. Повышение активности
амилазы в крови служит одним из ранних и надежных признаков
заболевания острым панкреатитом.
Щелочная фосфатаза содержится во многих тканях, но
больше всего ее в костях. При многих заболеваниях костной ткани активность этого фермента в крови повышается. Нередко активность щелочной фосфатазы повышается и при злокачественных опухолях костей.
Во всех рассмотренных примерах диагностическим признаком
болезни служило повышение активности ферментов в крови. Но
бывает и так, что на наличие заболевания указывает не повышение,
а, наоборот, снижение ферментативной активности. Так, при тяжелых заболеваниях печени, например циррозе печени, активность холинэстеразы резко снижается. Это указывает на нарушение целостности гепатоцитов, не способных синтезировать белки.
Ферменты нередко используют для выявления и количественного определения в ткани и крови ядовитых веществ, особенно тогда, когда такие вещества обладают способностью избирательно угнетать определенные ферменты: это синильная кислота
и ее соли, многие токсичные фосфорорганические вещества и др.
Ферментативные методы отличаются исключительно высокой
чувствительностью и дают возможность обнаружить в тканях ничтожное количество яда, что имеет практическое значение для
токсикологии и судебной экспертизы.
Уже давно некоторые ферменты применяют для так называемой заместительной терапии – для возмещения дефицита
ферментов, возникающего при некоторых заболеваниях. Особенно успешна такая терапия при нарушениях функции желудочнокишечного тракта, связанных с недостаточной выработкой пищеварительных ферментов. Так, препараты пепсина применяются
при некоторых формах гастрита (воспаления желудка) или панкреатина – смеси пищеварительных ферментов поджелудочной
железы – при заболеваниях, вызванных недостаточным синтезом
этих ферментов.
С успехом применяют ферменты в тех случаях, когда лечение требует разрушить накопившиеся в большом количестве белковые образования, мешающие нормальному функционированию
37

тканей. Это бывает при ожогах, гнойных ранах, гнойно-воспалительных заболеваниях легких, когда в бронхах скапливается
густая масса, препятствующая прохождению воздуха, и т. д. В
таких случаях в качестве лекарства применяют протеолитические
ферменты, приводящие к быстрому гидролизу белков и способствующие рассасыванию гнойных накоплений.
Лечебное применение имеют и некоторые ферменты, гидролизующие сложные полисахариды, – лизоцим, гиалуронидаза.
Эти ферменты повышают проницаемость тканей и клеточных
мембран, что оказывает противовоспалительное действие, а препараты лизоцима, кроме того, разрушают оболочку некоторых
болезнетворных бактерий и используются для лечения ряда инфекционных заболеваний.
В последние годы наметился очень перспективный путь применения ферментов для рассасывания сгустков крови, образовавшихся внутри кровеносных сосудов. Это плазмин, содержащийся в
крови, некоторые ферменты плесневых грибов и бактерий; фибринолитической активностью обладают также ферменты поджелудочной железы – трипсин и химотрипсин. На основе некоторых из
этих ферментов и разных добавок созданы лекарственные ферментные препараты – стрептокиназа, стрептаза и другие.
2.2. Ферменты в животноводстве
Ферменты, или энзимы, представляют собой высокоспецифический класс веществ белковой природы, используемых живыми организмами для осуществления огромного разнообразия
связанных химических реакций, лежащих в основе жизнедеятельности организма.
Использование ферментов в сельском хозяйстве необычайно
широко и разнообразно. Это находит свое естественное объяснение прежде всего в том, что сельское хозяйство имеет дело с живыми объектами – растениями и животными, а всякое проявление
жизни основано на действии ферментов. Все актуальные задачи
сельскохозяйственной практики, связанные с повышением продуктивности растениеводства и животноводства, так или иначе
упираются в теоретические или прикладные проблемы энзимологии. Прежде всего это относится к ветеринарии и зоотехнии. Так,
38

определение активности ферментов в крови сельскохозяйственных животных способствует выявлению болезней и помогает
контролировать их лечение, а добавление некоторых ферментных
препаратов к кормам ускоряет прирост живого веса и улучшает
качество мяса. Особенно эффективно использование ферментных
препаратов в промышленном птицеводстве. Некоторые препараты протеолитических и других ферментов, приготовленные из
плесневых грибов и бактерий, увеличивают яйценоскость кур,
улучшают липидный обмен в печени и повышают интенсивность
переваривания составных частей корма.
Специальный интерес представляет использование ферментов в кормопроизводстве. Этот важный аспект сельскохозяйственной практики лежит на стыке растениеводства и животноводства. Агрономы заботятся о том, чтобы получить полноценный
растительный корм, содержащий все существенные составные
части, необходимые для обеспечения потребностей животного
организма. Животноводы составляют наиболее эффективные рационы, определяют количество корма, необходимое для каждого
вида животных в разных условиях, чередование дачи различных
кормов, разрабатывают введение различных добавок и т. д.
Но между выращиванием кормовых растений и их скармливанием скоту лежит очень важный этап – собственно приготовление корма – переработка растений с целью повышения их усвояемости, сохранности, возможности запасания и др. Вот здесь
роль ферментов оказалась особенно значительной. Ферментные
препараты для производства кормов получают из плесневых грибов и бактерий. Для повышения усвояемости грубых кормов необходим фермент целлюлаза, гидролизующий клетчатку и повышающий возможность ее переваривания и усвоения, особенно, у
таких животных, как свиньи, которые переваривают клетчатку
хуже, чем крупный рогатый скот.
В последнее время ферментные препараты с успехом применяют для повышения эффективности силосования, улучшения
химического состава и биологической ценности силосованных
кормов.
Силосование кормов не ново, и сам процесс несложен:
размельченную растительную массу закладывают в траншеи
или ямы и герметически закупоривают. В этих условиях жи-
39

вущие на растениях бактерии начинают «трудиться» и пре-
HCl
вращают сахаристые вещества в органические кислоты, которые консервируют корм, предохраняя его от порчи. Однако не
все культуры пригодны для силосования. В бобовых и злаковых слишком мало сахара, а при силосовании высокосахаристых растений случается иногда, что корм перекисает и портится. Значит, нужно регулировать бродильные процессы при
силосовании, регулировать созревание силоса. Это может быть
достигнуто внесением в силосную массу препаратов ферментов.
Ученые Казахской Академии наук решили эту проблему не
путем введения изолированных препаратов ферментов, а добавлением особых бактериальных заквасок, содержащих бактерии
разных видов, способные вырабатывать необходимые ферменты.
Внесенные в силосуемое сырье закваски выступают не только как
биологические «регулировщики», но и обогащают корм ценными
питательными веществами. Эти закваски удалось приготовить в
хорошо сохраняющемся сухом виде, что значительно облегчает
их применение.
С помощью соответствующих заквасок можно силосовать
такие растения, которые без этого силосованию не поддаются,
например солому и, что особенно важно, камыш.
2.2.1. Ферментные системы пищеварительного тракта
сельскохозяйственных животных
Процессы переваривания кормов в желудочно-кишечном
тракте животных протекают с участием ферментов класса гидролаз. В ротовой полости происходит механическая обработка корма. Механическая обработка заключается в том, что корма измельчаются, обволакиваются слюной и транспортируются в желудочно-кишечный тракт. Химический гидролиз углеводов обусловлен действием фермента амилазы, расщепляющей крахмал
до мальтозы при рН 7,0-7,2. Измельченный и смоченный слюной
корм поступает в желудок. У моногастрических животных кормовая кашица пропитывается желудочным соком и действие
амилазы слюны прекращается. Свое гидролитическое действие
проявляют ферменты желудочного сока – пепсиноген пеп-
40
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]
