5. Абсолютное и относительное содержание гемоглобина в крови.
Абсолютное содержание гемоглобина в эритроците– количество Hb в составе одного эритроцита. Норма 25.4-34.6 пг.
Относительное содержание Hb-соотношение между кол-вом Hb крови и числом эритроцитов является цветовой показатель (ЦП), который указывает, является ли содержание Hb нормой (нормохромным), гипо- или гиперхромия. Норма: ♂ – 130-170 г/л, ♀ – 120-150 г/л. Гипохромия наблюдается при дефиците железа, гиперхромия при недостатке В12или фолиевой кислоты, при мегалобластической анемии ЦП=0,8-1,05.
ЦП=(найденное сод. Hb/ найденное сод. эритроцитов)/(нормаHb/ норма сод. эритроцитов)=3*Hb/(первые 3 цифры сод. эритр.)
6. Приведите пример определения крови 1-й группы с помощью метода цоликлонов.
7. Приведите пример определения крови 2-й группы с помощью метода цоликлонов.
8. Приведите пример определения крови 3-й группы с помощью метода цоликлонов.
9. Приведите пример определения крови 4-й группы с помощью метода цоликлонов.
Один ответ: определение групповой принадлежности крови по системе ав0 методом цоликлонов.
Цоликлоны - продукты гибридных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Индивидуальные гибридные клеточные линии продуцируют гомогенные антитела только одного класса иммуноглобулинов, полностью идентичных по структуре и биологической активности. Антитела, продуцируемые клетками одного клона (потомство одной клетки), являются моноклональными.
Цоликлоны анти-А (аналог агглютинина альфа) и анти-В (аналог агглютинина бета) предназначены для определения групп крови человека вместо стандартных сывороток. Реагенты не должны храниться открытыми, так как при высыхании активность антител снижается; температура воздуха в помещении должна быть от 15 до 25º С.
ЦЕЛЬ: освоить методику определения групп крови по системе АВ0 методом цоликлонов.
ОСНАЩЕНИЕ: стерильные перчатки, цоликлоны анти-А (розовый цвет) и анти-В (голубой цвет), исследуемая кровь.
ХОД РАБОТЫ: наденьте перчатки. Нанесите на пластинку по одной капле (0,1 мл) реагентов анти-А и анти-В и рядом по одной капле крови (0,1 мл), которая в 10 раз меньше капли сыворотки.
Реактив и кровь тщательно перемешайте стеклянными палочками. Наблюдение за ходом реакции проводите при легком покачивании пластинки в течение 2-5 минут. При положительном результате - агглютинация эритроцитов; при отрицательном результате капля - равномерно окрашена в красный цвет, агглютинаты не обнаруживаются.
Группа крови |
цоликлон анти-А |
цоликлон анти-В |
0(I) ab |
- |
- |
A(II)b |
+ |
- |
B(III)a |
- |
+ |
АВ (IV) - |
+ |
+ |
10. Приведите пример определения резус-фактора крови с помощью метода цоликлонов.
Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D
На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.
если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)
если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)
Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует