110. Микробиологическая диагностика дифтерии.

Бактериологический

Материал: от больного – слизь и воспалительный налет из зева, носа, миндалин, носоглотки и т.д., на бактерионосительство – слизь из зева и носа.
Среда с теллуритом		Сывороточная среда
Микроскопия окраска по Граму, по Нейссеру и синькой Леффлера,	Свернутая сыворотка	Определение токсигенности преципитацией в агаре
Биохимические свойства – среды с глюкозой, сахарозой, крахмалом, цистином, мочевиной	Фаготипирование	Определение серотипа

111. Методы определения токсигенности дифтерийной палочки.

Для обнаружения токсигенности дифтерийных бактерий можно использовать следующие способы:

1. Биологические пробы на животных. Внутрикожное заражение морских свинок фильтратом бульонной культуры дифтерийных бактерий вызывает у них некроз в месте введения.

2. Заражение куриных эмбрионов. Дифтерийный токсин вызывает их гибель.

3. Заражение культур клеток. Дифтерийный токсин вызывает отчетливый цитопатический эффект.

4. Метод твердофазного иммуноферментного анализа с использованием мечен­ных пероксидазой антитоксинов.

5. Использование ДНК-зонда для непосредственного обнаружения Юх-оперона в хромосоме дифтерийных бактерий.

Однако наиболее простым и распространенным способом определения токсиген­ности дифтерийных бактерий является серологический – метод преципитации в геле. Суть его состоит в следующем. Полоску стерильной фильтровальной бумаги разме­ром 1,5 х 8 см смачивают антитоксической противодифтерийной сывороткой, со­держащей 500 АЕ в 1 мл, и наносят на поверхность питательной среды в чашке Пет­ри. Чашку подсушивают в термостате 15—20 мин. Испытуемые культуры засевают бляшками по обе стороны от бумажки. На одну чашку засевают несколько штаммов, один из которых, заведомо токсигенный, служит контролем. Чашки с посевами ин­кубируют при 37 °С, результаты учитывают через 24—48 ч. Вследствие встречной диффузии в геле антитоксина и токсина в месте их взаимодействия образуется чет­кая линия преципитации, которая сливается с линией преципитации контрольного токсигенного штамма. Полоски неспецифической преципитации (они образуются, если в сыворотке кроме антитоксина присутствуют в небольшом количестве другие антимикробные антитела) появляются поздно, выражены слабо и никогда не сливаются с полоской преципитации контрольного штамма.

112. Специфическая профилактика и лечение дифтерии, препараты.

Специфическим средством лечения дифтерии является применение противодифтерийной антитоксической сыворотки, содержащей не менее 2000 МЕ в 1 мл. Сыворотку вводят внутримышечно в дозах 10000 до 400000 МЕ в зависимости от тяжести течения болезни. Эффективным методом лечения является применение антибиотиков (пенициллины, тетрациклины, эритромицин и др.) и сульфамидных препаратов. С целью стимулирования выработки собственных антитоксинов можно использовать анатоксин. Для освобождения от бактерионосительства следует использовать те антибиотики, к которым данный штамм коринебактерий высокочувствителен.

Основным методом борьбы с дифтерией является массовая плановая вакцинация населения. С этой целью используют раз­личные варианты вакцин, в том числе комбинированные, т. е. направленные на од­новременное создание иммунитета против нескольких возбудителей. Наибольшее распространение в России получила вакцина АКДС.

Адсорбированный дифтерийный анатоксин. Состав: очищенный и концентрированный дифтерийный анатоксин, адсорбированный на гидроокиси алюминия. Назначение: для профилактики дифтерии у детей с 5-6-месечного возраста. Способ применения: внутримышечно или подкожно.

Противодифтерийная сыворотка. Состав: очищенная и концентрированная методом Диаферм-3 сыворотка лошадей, гипериммунизированных дифтерийным анатоксином. Назначение: для лечения и профилактики. Способ применения: внутримышечно.

Очищенный дифтерийный токсин для реакции Шика. Состав: очищенный и концентрированный дифтерийный токсин. Назначение: для выявления невосприимчивости к дифтерии у детей. Способ применения: внутрикожно в среднюю часть ладонной поверхности предплечья.