- •Итоговое контрольное занятие «оои, капельные инфекции, гноеродные кокки»
- •1. Особенности организации работы баклаборатории особо опасных инфекций.
- •2. Какие признаки (критерии) характерны для особо опасных инфекций?
- •3. Аллергены для диагностики особо опасных инфекций.
- •Значение реакции иммунофлуоресценции в диагностике оои.
- •Морфологические и тинкториальные особенности возбудителя чумы.
- •Культуральные свойства возбудителя чумы.
- •Подвиды Yersinia pestis.
- •Главные факторы патогенности возбудителя чумы
- •Плазмиды и факторы патогенности возбудителя чумы.
- •Эпидемиология чумы.
- •Пути и способы заражения человека чумой.
- •Основные клинические формы чумы, материал для мб диагностики.
- •В каких случаях ставится аллергическая проба с пестином?
- •Характеристика иерсиний, патогенных для человека, отличия от палочки чумы.
- •Методы мб диагностики чумы.
- •Специфическая профилактика чумы.
- •Морфологические и тинкториальные свойства бруцелл.
- •Культуральные свойства бруцелл.
- •Эпидемиология бруцеллеза.
- •Почему бруцеллез – особо опасная инфекция?
- •Патогенез бруцеллеза.
- •Микробиологическая диагностика бруцеллеза.
- •Методы мб диагностики бруцеллеза.
- •Серодиагностика бруцеллеза.
- •Преимущества реакции Кумбса при серодиагностике бруцеллеза.
- •Серологические экспресс-реакции для диагностики бруцеллеза.
- •Реакция Хеддльсона и реакция Райта, их сущность.
- •Проба Бюрне, сущность, постановка, учет результатов.
- •Специфическая профилактика бруцеллеза.
- •Морфологические и тинкториальные свойства Bacillus anthracis.
- •Культуральные свойства возбудителя сибирской язвы.
- •Плазмиды и факторы патогенности возбудителя сибирской язвы
- •Отличия сибиреязвенной палочки и антракоидоз.
- •Эпидемиология сибирской язвы.
- •Патогенез сибирской язвы.
- •Основные клинические формы сибирской язвы.
- •Методы мб диагностики сибирской язвы
- •38. Бактериоскопическая диагностика сибирской язвы.
- •Выделение чистой культуры возбудителя сибирской язвы.
- •В каких случаях ставится аллергическая проба с антраксином?
- •Специфическая профилактика и лечение сибирской язвы.
- •Морфологические и тинкториальные свойства возбудителя туляремии.
- •Культуральные свойства возбудителя туляремии.
- •Факторы патогенности возбудителя туляремии.
- •Географические расы возбудителя туляремии.
- •Эпидемиология туляремии.
- •Патогенез туляремии.
- •Специфическая профилактика туляремии.
- •Культуральные свойства стафилококков.
- •Заболевания, которые вызывают стафилококки.
- •Межвидовые различия стафилококков.
- •Факторы патогенности стафилококков.
- •Методы микробиологической диагностики стафилококковых инфекций.
- •Выделение чистой культуры стафилококков.
- •Для чего и как проводят фаготипирование?
- •Какие экзотоксины продуцируют стафилококки?
- •Ферменты защиты и агрессии стафилококков.
- •Факторы патогенности стафилококков, влияющие на процесс фагоцитоза.
- •Как определяют гиалуронидазную активность?
- •Мембраноповреждающие токсины, разновидности, механизм действия.
- •Свойства стафилококковых энтеротоксинов.
- •Как у стафилококков определяют наличие плазмокоагулазы?
- •Методы определения чувствительности к антибиотикам
- •Классификация стрептококков по росту на кровяном агаре.
- •Культуральные свойства стрептококков.
- •Выделение чистой культуры пиогенных стрептококков.
- •Какие заболевания вызывают стрептококки?
- •Серологическая классификация стрептококков.
- •Факторы патогенности стрептококков.
- •Какие стрептококки вызывают скарлатину?
- •Патогенез скарлатины.
- •Особенности иммунитета при скарлатине.
- •Патогенез ревматизма.
- •Факторы патогенности стрептококков.
- •Морфология пневмококков.
- •Правила взятия и пересылки материала при подозрении на менингококковую инфекцию.
- •Эпидемиология менингококковых инфекций.
- •Культуральные свойства менингококков.
- •Методы микробиологической диагностики менингококковых инфекций.
- •Формы менингококковых инфекций.
- •85. Патогенез менингококковых инфекций.
- •Какие заболевания вызывают пневмококки?
- •Бактериологическая диагностика менингококковых инфекций.
- •Бактериоскопическая диагностика менингококковых инфекций.
- •Серологическая классификация менингококков.
- •Иммунологическая диагностика менингококковых инфекций.
- •Специфическая профилактика менингококковых инфекций.
- •Отличия пневмококков от других стрептококков.
- •Факторы патогенности менингококков.
- •94. Какие заболевания вызывают гонококки?
- •95. Морфологические, тинкториальные, культуральные свойства гонококков.
- •96. Бактериоскопическая диагностика гонореи.
- •97. Бактериологическая диагностика гонореи.
- •98. Серологическая диагностика гонореи.
- •99. Иммунитет при гонорее.
- •100. Для каких целей используют гоновакцину.
- •101. Факторы патогенности гонококков.
- •102. Эпидемиология гонококковых инфекций.
- •103. Морфологические и тинкториальные свойства дифтерийной палочки.
- •104. Культуральные и биохимические свойства дифтерийной палочки.
- •105. Факторы патогенности дифтерийной палочки.
- •106. Дифтерийный токсин, активация, структура, механизм действия.
- •107. Генетический контроль синтеза дифтерийного токсина.
- •108. Эпидемиология дифтерии.
- •109. Патогенез дифтерии.
- •110. Микробиологическая диагностика дифтерии.
- •111. Методы определения токсигенности дифтерийной палочки.
- •112. Специфическая профилактика и лечение дифтерии, препараты.
- •113. Основные свойства возбудителя коклюша.
- •114. Факторы патогенности коклюшной палочки.
- •115. Эпидемиология и патогенез коклюша.
- •116. Микробиологическая диагностика коклюша.
- •117. Специфическая профилактика коклюша, препараты.
- •118. Морфологические и тинкториальные особенности туберкулезной палочки.
- •119. Классификации микобактерий по скорости роста и пигментообразованию.
- •120. Факторы патогенности туберкулезной палочки.
- •121. Свойства микобактерий, определяемые высоким содержанием липидов.
- •122. Эпидемиология туберкулеза.
- •123. Патогенез туберкулеза, строение бугорка.
- •124. Методы обогащения исследуемого материала при мб диагностике туберкулеза.
- •125. Бактериоскопическая диагностика туберкулеза.
- •126. Бактериологическая диагностика туберкулеза, преимущества и недостатки.
- •127. Аллергический метод диагностики туберкулеза.
- •128. Специфическая профилактика и лечение туберкулеза.
- •129. Понятие о микобактериозах, их возбудители.
- •130. Основные свойства возбудителя проказы.
- •131. Эпидемиология и патогенез проказы.
- •132. Микробиологическая диагностика проказы.
Для чего и как проводят фаготипирование?
Фаготипирование стафилококков, как и многих других возбудителей бактериальных инфекций, проводится исключительно для эпидемиологических целей – для более тонкого типирования возбудителя внутри вида, что помогает найти источник инфекции и определить пути её распространения.
Для типирования патогенных плазмокоагулирующих стафилококков используют международный набор из 23 умеренных бактериофагов. Эти фаги разделены на группы:
1 группа - фаги 29, 52, 52А, 79, 80;
2 группа - фаги ЗА, ЗС, 55, 71;
3 группа - фаги 6, 42Е, 47, 53, 54, 75, 77, 83А, 84, 85;
4 группа - фаги 94 ,95 ,96; и вне групп фаг 81.
Перед работой набор сухих фагов стерильно растворяют в щелочном бульоне (рН-7,6) с 0,4% глюкозы и 0,02% CaCl2 . В ампулу добавляют I мл бульона и получают разведение фага 10-1. Из этого основного разведения готовят два рабочих разведения, соответствующие тест-разведению (ТР) и 100 ТР. Разведение, соответствующее 1 ТР, указано на этикетке фага.
Степень лизиса культуры разными разведениями фага регистрируется по следующей схеме:
++++ сливной, полный лизис,
+++ полусливной лизис (незначительный рост культуры в зоне лизиса),
++ наличие в месте нанесения капли фага свыше 50 колоний фага (пятен лизиса),
+ от 20 до 50 колоний фага,
— полное отсутствие лизиса.
Наивысшее разведение, вызвавшее лизис эталонного штамма на +++, называется тест разведением (I TP) фага. Например, если на этикетке указано, что I ТР данной серии фага 10-3, то для получения I TP надо из разведения 10-1 сделать два последовательных десятикратных разведения, и разведение 10-3 будет соответствовать I ТР.
Методика фаготипирования
Суточную агаровую культуру стафилококка засевают в 2,5 мл бульона Хоттингера, Мартена или МПБ (рН 7,2-7,4) и выращивают 3-4 часа при 37°C (до появления заметной мути).
Одновременно готовят чашки с 1,2% агаром, приготовленным на бульоне Хоттингера с добавлением свежей мясной вода (рН 7,6; глюкозы 0,4%). CaCl2 добавляют в расплавленный агар непосредственно перед разливом (0,2 мл стерильного 10%-ного раствора CaCl2 на 100 мл агара). По 25-30 мл расплавленного агара разливают в чашки Петри и после застывания подсушивают чашку 30-40 минут при 37°C. Затем 3-4-часовую испытуемую культуру стафилококка пастеровской пипеткой засевают газоном, избыток культуры удаляют пипеткой, а чашку подсушивают 30-40 минут.
Дно засеянной чашки расчерчивают карандашом на 23 квадрата и в каждый квадрат засеянной среды стандартной петлей (диаметр 2 мм) или тонко оттянутой пипеткой наносят каплю соответствующего фага всегда в одном и том же порядке.
После подсыхания фага чашку переворачивают крышкой вниз и инкубируют 18-20 часов при 30°C или 5-6 часов при 37°C и оставляют до следующего утра при комнатной температуре.
Фаготипирование начинают рабочим разведением фагов, соответствующим I ТР. Штаммы, с которыми получен отрицательный результат, на следующий день типируют повторно, используя разведения фагов, соответствующие 100 ТР (разведение 1:10) в нашем опыте.
Учет и регистрация результатов
Штамм считается типируемым, если хотя бы один фаг вызвал сильную реакцию при типировании I ТР или 100 ТР. Стафилококковые штаммы чаще лизируются не одним, а несколькими фагами, что дает для каждого штамма характерную для него фагомозаику. В зависимости от фагов, входящих в эту мозаику, штамм стафилококка относят к тем или иным фагогруппам.